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组织切片制作技术

组织切片制作技术. 组织标本的处理. 阶段 1. 阶段 2. 阶段 3. 阶段 4. 固定 目的 常用固定液 固定方法. 取材 标记 大小 时间. 脱水 透明 浸蜡. 包埋. 阶段 1. 取材注意事项 : 1 处死动物要迅速 2 标本材料要新鲜 3 取材所使用解剖器械要锋利 4 标本大小 , 形状要适宜 ( 小而薄 ) 5-10mm,2-5mm 5 标本表面的清洁 6 取材部位要准确. 阶段 2. 固定的目的 : 1 防止组织自溶 , 腐败

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组织切片制作技术

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Presentation Transcript

  1. 组织切片制作技术

  2. 组织标本的处理 阶段 1 阶段 2 阶段 3 阶段 4 固定 目的 常用固定液 固定方法 取材 标记 大小 时间 脱水 透明 浸蜡 包埋

  3. 阶段 1 取材注意事项: 1 处死动物要迅速 2 标本材料要新鲜 3 取材所使用解剖器械要锋利 4 标本大小,形状要适宜(小而薄) 5-10mm,2-5mm 5 标本表面的清洁 6 取材部位要准确

  4. 阶段 2 固定的目的: 1 防止组织自溶,腐败 2 使标本成分凝固为不溶性物质,与生活状态相仿 3 硬化作用

  5. 固定的方式: 浸泡固定 灌注固定 常用的固定液: 常用的固定液: 10%福尔马林（pH7.0-7.2) 固定时间: 1-2天不定

  6. 阶段 3 脱水: 利用某种化学试剂逐步将标本内部的水分置换出来,以使标本内部处于无水状态的过程。 脱水剂: 无水乙醇 脱水方法: 梯度脱水 70% 80% 90% 95% 100% 30-40分钟

  7. 透明： 利用某些有机试剂既能与脱水剂混合，又能与石蜡液相融合的特性，来置换标本内的脱水剂，为浸蜡作准备。 目的：桥梁作用 常用透明剂： 正丁醇*2 二甲苯*1 时间： 过夜 20分钟

  8. 浸蜡： 透明后的标本投入到温度适宜的熔化的石蜡液中，置换出标本内透明剂的过程 浸蜡材料： 不同熔点的石蜡 54度 时间：2-3小时

  9. 阶段 4 包埋目的： 去除标本中透明剂成分，使熔化的石蜡渗入到标本内部，通过冷却进一步增强整体硬度而成为适宜的石蜡标本固体，便于石蜡切片。

  10. 包埋的具体操作过程： 1 准备好用具 2 包埋器皿内倒入洁净的石蜡液 3 将浸蜡的标本依次取出放入包埋器皿中 4 作好标签 5 将包埋器皿冷却

  11. 包埋的注意事项： 1 标本的切面朝下，一定要接触包埋器的底部 2 包埋时动作迅速，避免气泡产生 3 包埋后应迅速冷却

  12. 组织切片的制作 石蜡切片机

  13. 修切蜡块 原则： 1 近似长方形或正方形 2 标本长轴与蜡块长轴一致 3 标本四周留有1-2mm蜡边

  14. 切片操作 1 固定标本蜡块，使之成垂直面 2 固定切片刀于刀架上 3 调节切片厚度（5-7um) 4 调节蜡块切面与刀刃间的距离 5 左手持毛笔，右手转动轮盘 6 取下石蜡带

  15. 展片、捞片与烤片 水浴展片： 借助于一定热度的水温和水的张力，使得皱缩的石蜡切片舒展而平整，近似达到标本蜡块切面的大小。 展片的标准： 组织变白且周围石蜡透明，组织完整，无裂口或撕裂，无皱褶和气泡

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