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报告人:李茜 单 位:天津大学. NP s 改性支架的制备与生物学表征. 目的:控制基因纳米粒时序释放 方法:利用静电纺丝技术,制备纳米纤维静电纺丝支架。. 三种纺丝方法: 方法 1 :靶向纳米粒吸附在纤维支架缝隙中;. 方法 2 :靶向纳米粒通过静电共纺包埋在 纳米纤维中;. 方法 3 :基因纳米粒同时包载于纤维缝隙和纤维中。. 通过控制静电纺丝技术工艺,精密调控基因纳米粒与纤维直径和缝隙的匹配程度,以调控释放速度。 通过释放速率的调整使基因纳米粒的释放周期(速率)与血管内皮细胞的生长周期相匹配,最终达到内皮细胞的快速增殖,使人工血管快速内皮化。
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报告人:李茜 单 位:天津大学 NPs改性支架的制备与生物学表征
目的:控制基因纳米粒时序释放 • 方法:利用静电纺丝技术,制备纳米纤维静电纺丝支架。
三种纺丝方法: • 方法1:靶向纳米粒吸附在纤维支架缝隙中;
方法2:靶向纳米粒通过静电共纺包埋在 纳米纤维中;
方法3:基因纳米粒同时包载于纤维缝隙和纤维中。方法3:基因纳米粒同时包载于纤维缝隙和纤维中。
通过控制静电纺丝技术工艺,精密调控基因纳米粒与纤维直径和缝隙的匹配程度,以调控释放速度。通过控制静电纺丝技术工艺,精密调控基因纳米粒与纤维直径和缝隙的匹配程度,以调控释放速度。 • 通过释放速率的调整使基因纳米粒的释放周期(速率)与血管内皮细胞的生长周期相匹配,最终达到内皮细胞的快速增殖,使人工血管快速内皮化。 • 精确控制负载量和纤维材料降解速度,以实现时序控制释放,达到与内皮细胞生长周期相匹配的目的
靶向性基因纳米粒和REDV 多肽协同修饰血管材料示意图
基因纳米粒血液相容性评价指标 • 测定凝血酶原时间(PT) • 活化部分凝血酶时间(APTT) • 溶血率 • 血小板黏附 生物学评价
毒性及转染率测定 • MTT:评价基因纳米粒体外细胞毒性 • RT-PCR (聚合酶链反应法):检测ZNF580 mRNA 表达情况 • 中性红摄取法:鉴定载体材料的生物相容性 • 流式细胞仪:分析基因纳米粒对EA. hy926的转染效率 • Western blot • 目的:定量分析纳米粒选择性吸附内皮细胞能力。重点研究基因进入内皮细胞的几率和转染效率,调控纳米粒构造、所带正电荷量、REDV 活性肽的携带量和纳米粒粒径,以实现携带基因的靶向多功能纳米粒的高选择性和高转染效率。
考察这三种修饰方法的实验结果,分析它们对细胞关键蛋白和基因表达水平的影响,促进支架内皮化过程。考察这三种修饰方法的实验结果,分析它们对细胞关键蛋白和基因表达水平的影响,促进支架内皮化过程。 • 观察内皮细胞形貌:激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)和原子力显微镜(AFM)
评价三种修饰方法对靶向性基因纳米粒时序性控制释放规律,重点精确调控基因纳米粒材料结构及其在人工血管材料中的分布,以及改变材料组成,实现基因释放速度与内皮细胞生长和增殖相匹配。评价三种修饰方法对靶向性基因纳米粒时序性控制释放规律,重点精确调控基因纳米粒材料结构及其在人工血管材料中的分布,以及改变材料组成,实现基因释放速度与内皮细胞生长和增殖相匹配。