DETERMINAZIONE DELLO STATO DI HER2 E VALIDAZIONE METODICA SISH IN CARCINOMI MAMMARI, OVARICI, PROSTATICI, POLMONARI E CO

1. DETERMINAZIONE DELLO STATO DI HER2 E VALIDAZIONE METODICA SISH IN CARCINOMI MAMMARI, OVARICI, PROSTATICI, POLMONARI E COLICI: STUDIO PRELIMINARE MT Ramieri, R Murari, E Pica, PL Alò UOC Anatomia Patologica ASL Frosinone

2. Introduzione Gli studi sullo stato di HER2 nei carcinomi non mammari riportano dati molto variabili e ancora di scarso rilievo clinico, anche data la variabilità e la mancanza di standardizzazione delle metodiche utilizzate • Il nostro studio ha valutato lo stato di HER2 tramite metodica SISH su casi di neoplasie mammarie, ovariche, polmonari, prostatiche e coliche, con due finalità: • a) validazione della metodica nella UOC di Anatomia Patologica di Frosinone • b) valutazione diagnostica della sovraespressione di HER2 in neoplasie non mammarie, in prospettiva di studi prognostici e terapeutici

3. Materiali e metodi • 50 casi di carcinomi mammari, ovarici, polmonari, prostatici e colici, 10 consecutivi per ciascun organo; dai campioni, tutti fissati in formalina per più di 6 ore e meno di 48 ed inclusi in paraffina, sono state allestite sezioni consecutive per lo studio morfologico, immunoistochimico (IHC) e per la SISH. • Per lo studio IHC è stato utilizzato l’ anticorpo HER2 clone 4B5 (Ventana) e per lo studio SISH il KitINFORM HER2/Neu (Ventana).

4. Criteri di valutazione e algoritmi • IHCSono stati applicati i seguenti criteri: negativo per score 0 e 1+: assenza o debole, incompleta, colorazione di membrana; equivoco, score 2+: colorazione di membrana completa, debole o non uniforme, in almeno il 10% delle cellule neoplastiche; positivo, score 3+: uniforme ed intensa colorazione di membrana in più del 30% delle cellule neoplastiche. • SISHSono stati applicati i seguenti criteri: non amplificato con ratio HER2/Chr17 < a 1.8; equivoco con ratio HER2/Chr17 compresa tra 1.8 e 2.2; amplificato con ratio superiore a 2.2.

5. Mammella Polmone EE EE IHC: Score 0 IHC: Score 0

6. Mammella Polmone SISH HER2: non amplificato SISH HER2: non amplificato SISH Chr 17 SISH Chr 17

7. Prostata Colon EE EE IHC: Score 1 IHC: Score 1

8. Prostata Colon SISH HER2: non amplificato SISH HER2: non amplificato SISH Chr 17 SISH Chr 17

9. Colon Polmone EE EE IHC: Score 2 IHC: Score 2

10. Colon Polmone SISH HER2: non amplificato SISH HER2: non amplificato SISH Chr 17 SISH Chr 17

11. Mammella Ovaio EE EE IHC: Score 3 IHC: Score 3

12. Mammella Ovaio SISH HER2: amplificato SISH HER2: amplificato SISH Chr 17 SISH Chr 17

13. Risultati SISH amplificato equivoco non amplificato m: mammella;p: polmone; o: ovaio; pr: prostata; c: colon

14. Conclusioni Nel nostro studio è stata rilevata una concordanza tra immunoistochimica e SISH pari al 100% nei casi con score 3+ e al 97,14% nei casi con score 0 e 1+ La SISH potrebbe sostituire, vista la facilità di esecuzione e la concordanza dei risultati, la FISH e la CISH E’ inoltre auspicabile che la standardizzazione delle metodiche su ampie casistiche possa consentire di conoscere il reale impatto prognostico e predittivo di HER2 anche in neoplasia non mammarie

15. Bibliografia Dietel M et al. Comparison of automated silver enhanced in situ hybridisation (SISH) and fluorescence ISH (FISH) for the validation of HER2 gene status in breast carcinoma according to the guidelines of the American Society of Clinical Oncology and the College of American Pathologists.Virchows Arch 2007;451(1):19-25 Ménard S et al. HER2 overexpression in various tumor types, focussing on its relationship to the development of invasive breast cancer.Ann Oncol 2001;12(Suppl.1): S15-S19 Wolff AC et al. American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists guideline recommendations for human epidermal growth factor receptor 2 testing in breast cancer. J Clin Oncol 2007;25(1):118-45