Nukleozidok, n ukleotidok, n ukleinsavak

1. Nukleozidok, nukleotidok, nukleinsavak

2. Történeti háttér Savas karakterű anyagok a sejtmagból 1869-71 DNS a sejtmag fő komponense F. Miescher (Svájc) CHROMO (szín) SZOMA (festék láthatóvá tétel) 1930 DNS molekulatömege kb. 500 000 Hammersten, Caspersson tisztított növényi vírusban is van Stanly (USA), Bawden(UK)1940 első elektronmikroszkópos kép DNS pozitívan töltött fehérjék1947-50 nukleotid összetétel E. Chargaff (USA) 1952 A. Todd1953 kettős hélix J. O. Watson, F. H. C. Crick (UK) (N.d. 1962)1958 DNS polimeráz I enzim (első DNS „készítő” enzim)1960 RNS polimeráz; mRNS felfedezése1964 tRNSAla szekvenálása R. Holley (USA)1966 genetikai kód megfejtése1970 DNS hasító enzim (restrikciós) felfedezése1973 DNS fragmensek beépítése plazmidba E. coli „Androméda-törzs”1975 RNS kromoszóma szekvenálása; M52 fág (3 fehérje)1977 GENENTECH1978 somatostatin-az első emberi hormon-rekombináns technológiával Nobel-díj: restrikciós enzimek1979 malignus sejtből származó DNS-sel „fertőzni” lehet egészséges sejtvonalat

3. 1980 Nobel-díj: DNS szekvenálás; rekombináns DNS szintézis F. Sanger; W. Gilbert1982 -humán inzulin (DNS technológia) a piacon (humulin) -első onkogének izolálása, expresszálása, szekvenálása (egy aminosav különbség)1983 DNS a l baktérium fágból (48 502 bázispár)1988 HUMAN GENOM projekt elfogadása (USA Kongresszus) kb 3 x 109 bázispár 3 milliárd USD 1 USD/ bázispár1968 védett nukleotidok összekapcsolása (A. Todd, Khorana) Felosztás RNSMs: 104-106plazmavírusoklánchossz:> 3x103 Nukleotid koenzimADP, ATPNAD FAD Co-A UDP-cukrok DNSMs: 108-1012sejtmagvírusoklánchossz: > 107 Súly% 0,4 6 1db/sejt 1,2x107 rRNS: 6x104 tRNS: 4x105 4 mRNS: 103fajta 200 2 40 1 1000 E. coli

4. - szénhidrát-foszfát – heterociklusos bázis n A nukleinsavak primer szerkezete 1. Szénhidrát: monoszacharid, aldopentózb-D-ribóz (RNS), b-D-2-dezoxiribóz (DNS) 1 1 b-D-2-dezoxiribóz D-2-dezoxiribóz 2. Heterociklusos bázis 7 e 1 1 5 1 1 a 3 b 3 c 9 adenin(A) guanin(G) citozin(C) timin R= -CH3 (T)R= -H (U)(C) pirimidin purin (pirimidin(d)imidazol)

5. Keto-enol tautoméria guanin vagy timin keto enol Amino-imino tautoméria citozin adenin

6. 3. Nukleozid – (N-glikozid) dezoxicitidin dezoxitimidin dezoxiguanozin dezoxiadenozin b-N-glikozid

7. Foszforsavak foszforsav(ortofoszforsav) monoészter foszfodiészter- lineáris- ciklusos 160 oC >300 oC metafoszforsav difoszforsav trifoszforsav difoszforsav-észter trifoszforsav-észter

8. 4. Nukleotid – (3’,5’-diészter) észter (primer OH) 5’-vég 5’ 5’ 3’ 3’ 3’-hidroxi észter (szekunder OH) 5’ 5’-foszfát 5’ 3’ 3’ 3’-vég

9. Ribonukleotidok ionizációs állandói (pK) * 5’-AMP (vagy 5’-rAMP) jelentése : ribonukleotid. 5’-dAMP jelentése : deoxiribonukleotid (deoxinukleotid).

10. A polinukleotid lánc primer szerkezete 5’-vég felé timin adenin pK=3,8 pK=4,5 citozin guanin pK=2,4 9,4 3’-vég felé

11. A kettős polinukleotid lánc primer szerkezete

12. A’ Z’ csó (RNA) csó A Z B Higherretained salt 3’M salt C 72% EtOHin low salt 50%EtOH Minimalsalt(not Li2+) 0.7 M MgCl2or2.5 M NaCl Lower humidity in fibres Higher salt solutions

13. Francis Crick, 1916-2004 James D. Watson, 1928- Watson, 1928 Crick, 1916

14. A nukleinsavak térszerkezete A 2-dezoxi-D-ribóz téralkata (A gyűrű síkja fölötti C atom szerint) 0,5 Å c2’-endo c3’-endo

15. A b-glikozidkötéshez kapcsolódó konformerek

16. A, B és Z típusú DNS jellemzői

19. A-DNS B-DNS

20. A-DNS B-DNS

21. B-DNS Z-DNS

22. DNS hő-denaturáció

23. A DNS-től a kromoszómáig

24. Egykromoszóma és...

26. Az RNS

27. mRNS másodlagos szerkezete

28. tRNS másodlagos szerkezete (75-95 nukleotid) tRNSAla (Holley , N.d. 1968)

29. tRNS térszerkezete Aminosav kapcsolódása A. Rich, A. Klug (1974)

30. tRNS bioszintézise intron 10 % módosított bázis

31. tRNS – aminosav szintézise (P. Zamencik, M. Hoogland, 1957) 1. Aminoacil-adenilát (AMP) keletkezése P.Zamencik, M. Hoogland (1957)

32. 2. Aminoacil-tRNS keletkezése

33. Nukleozid hatóanyagok dezoxiguanozin acyclovir dezoxiadenozin ganclovir zidovudine dezoxitimidin

34. tRNS – aminosav