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Testes. Metodologia no Imunodiagnóstico. Coleta, conservação e remessa do material. Interpretação dos resultados. Sensibilidade.

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Presentation Transcript

  1. Testes Ana Paula Ravazzolo

  2. Metodologia no Imunodiagnóstico • Coleta, conservação e remessa do material. • Interpretação dos resultados. Ana Paula Ravazzolo

  3. Sensibilidade • A sensibilidade de um teste é definida pela proporção de animais com a doença de interesse que têm o resultado do teste positivo. Indica quão bom é o teste para identificar os indivíduos infectados. • Percentual de resultados positivos em pacientes com a infecção. • Uma sensibilidade de 95% significa que 95% dos pacientes com a infecção serão identificados e que 5% dos pacientes terão um resultado “falso negativo”. Ana Paula Ravazzolo

  4. Especificidade • A especificidade de um teste é a proporção de animais sem a infecção que tem o teste negativo. Indica quão bom é o teste para identificar os indivíduos  que não estão infectados. • Percentual de resultados negativos em pacientes sem a infecção. • Uma especificidade de 95% significa que….. • ….falso positivo…. Ana Paula Ravazzolo

  5. Sensibilidade e Especificidade Sensibilidade = A/ (A+C) Especificidade = D/ (D+B) Ana Paula Ravazzolo

  6. Metodologia no Imunodiagnóstico • Coleta, conservação e remessa do material. • Interpretação dos resultados. • Detecção de anticorpos. Ana Paula Ravazzolo

  7. Precipitação Ana Paula Ravazzolo

  8. Ana Paula Ravazzolo

  9. AGID Ouchterlony Ana Paula Ravazzolo

  10. Imunodifusão radial (Mancini) Ana Paula Ravazzolo

  11. Inibição da Hemaglutinação Ana Paula Ravazzolo

  12. ELISA Ana Paula Ravazzolo

  13. Positive Control Negative Control Patient A Patient B Patient C Assay Control 1.689 0.153 O.055 0.412 1.999 0.123 Ana Paula Ravazzolo

  14. Soroneutralização Ana Paula Ravazzolo

  15. Western blot Ana Paula Ravazzolo

  16. Limite de detecção • Concentração de Ac [em g/mL] detectada por alguns testes: • SN [0,00005] < ELISA [0,0005] < IHA [0,005] < HA [0,01] < FC [0,05] = Aglutinação bacteriana [0,05] < Precipitação (teste do anel) [18] < AGID [30] Ana Paula Ravazzolo

  17. Metodologia no Imunodiagnóstico • Coleta, conservação e remessa do material. • Interpretação dos resultados. • Detecção de anticorpos. • Detecção de antígenos. Ana Paula Ravazzolo

  18. Imunofluorescência Ana Paula Ravazzolo

  19. Imunofluorescência Ana Paula Ravazzolo

  20. Imunoperoxidase Ana Paula Ravazzolo

  21. Metodologia no Imunodiagnóstico • Coleta, conservação e remessa do material. • Interpretação dos resultados. • Detecção de anticorpos. • Detecção de antígenos. • Avaliação da imunidade celular: • hipersensibilidade tardia; • citotoxicidade; • citocinas; • proliferação de linfócitos. Ana Paula Ravazzolo

  22. FACS Ana Paula Ravazzolo

  23. Ana Paula Ravazzolo

  24. Western blot http://www.dnatube.com/video/4338/Western-Blot Ana Paula Ravazzolo

  25. FluorescenceActivatedCellSorter - FACS http://media.invitrogen.com.edgesuite.net/tutorials/4Intro_Flow/player.html Ana Paula Ravazzolo

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