Reação de Aglutinação (EX: ASO , PCR, FR) Princípio:

1. UNIVERSIDADE CATÓLICA DE GOIÁS DEPARTAMENTO DE MEDICINA IMUNOLOGIA (AGRESSÃO E DEFESA) Fone: 3946-1393 Professor: Wilson de Melo Cruvinel Monitor: Fernando Vianna Pucci • Reação de Aglutinação • (EX: ASO , PCR, FR) • Princípio: • Quando um antígeno particulado (bactérias; ou látex adsorvidos com antígenos) é colocado em contacto com soro que tenha altos níveis de anticorpos específicos ocorre uma reação de aglutinação das partículas antigênicas e processa-se a reação antígeno-anticorpo, o que é evidenciado pela aglutinação das partículas de látex que formam agregados facilmente visíveis. • Materiais necessários: • Látex sensibilizado ou suspensão antigênica. • Controle positivo. • Controle negativo. • Lâmina para teste (reutilizável). • Pipetas semi-automáticas. • Ponteiras descartáveis. • Tubos de ensaio. • Recipiente para descarte de material. • Solução fisiológica ou água destilada. • Cronômetro. • Lâmina ou placa para teste. • Bastão plástico. • Procedimento Técnico: • 1. Adicionar ao primeiro círculo da lâmina 50µl de soro e ao segundo 50 µl ou uma gota do controle positivo e ao terceiro 50 µl ou uma gota do controle negativo. • 2.Homogeneizar o látex sensibilizado ou suspensão antigênica e adicionar 50 µl do mesmo em cada círculo. • 3. Homogeneizar as duas gotas, com uma vareta plástica. Utilizar varetas diferentes para cada controle. • 4.Imprimir movimentos rotatórios à placa durante 2 minutos. • Leitura e Interpretação da Reação: • Teste positivo: nítida aglutinação • Teste negativo: suspensão homogênea • Interferentes: • Externos: • Soros velhos ou turvos darão falsas reações. • Soros lipêmicos, hemolisados ou contaminados podem dar resultados falso-positivos, devido à formação de aglutinações inespecíficas. • Pacientes no uso de corticóides podem apresentar valores artificialmente alterados nas reações de aglutinação. • Deve-se, de preferência, usar soro. • Internos: • A placa utilizada deverá estar limpa e isenta de gordura, o que permite que a reação seja corretamente homogeneizada. É aconselhável que a lâmina seja desengordurada com álcool antes da realização do teste, devendo ser observada a completa evaporação do mesmo. • A agitação deve ser feita em condições padronizadas, a fim de que se obtenham resultados comparáveis em diferentes provas. • O congelamento do látex leva a reações inespecíficas de aglutinação. Os frascos de látex devem permanecer bem fechados, caso contrário poderá ocorrer floculações. • Após o tempo determinado para a leitura da reação, podem ocorrer aglutinações inespecíficas sugerindo falsos resultados. + -