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2006届硕士学位论文答辩

2006届硕士学位论文答辩. 研 究 背 景. COX － 2 的生物学性能. ◆ COX － 2 为前列腺素 ( PGs) 合成过程中一个主要限速酶，在大多数恶性肿瘤的表达升高。 ◆与肿瘤的发生、发展密切相关： ☆ 促进肿瘤血管的生成 VEGF ☆ 刺激肿瘤细胞的增殖 EGF ☆ 抑制肿瘤细胞的凋亡 Bcl-2 ☆ 促进肿瘤的浸润转移 MMP2. COX － 2 与鼻咽癌的研究.

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2006届硕士学位论文答辩

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Presentation Transcript

  1. 2006届硕士学位论文答辩

  2. 研 究 背 景

  3. COX－2的生物学性能 ◆COX－2为前列腺素(PGs)合成过程中一个主要限速酶，在大多数恶性肿瘤的表达升高。 ◆与肿瘤的发生、发展密切相关： ☆促进肿瘤血管的生成 VEGF ☆刺激肿瘤细胞的增殖 EGF ☆抑制肿瘤细胞的凋亡 Bcl-2 ☆促进肿瘤的浸润转移 MMP2

  4. COX－2与鼻咽癌的研究 ◆目前国内外研究的不多，Peng JP等发现N1-N3期患者的COX-2较N0期患者表达升高 ，提示COX-2与鼻咽癌颈部淋巴结转移有关 。 ◆COX－2对CNE-2E细胞的粘附、运动和侵袭能力有何影响，与CD44V6、E-cadherin之间的表达调控关系如何，它们之间否有相关性 ，尚未见相关报道。

  5. 研 究 目 的

  6. ◆ COX－2在鼻咽癌淋巴道转移中有何重要作用，其对鼻咽癌细胞的粘附性和运动、侵袭能力有何影响？ ◆在CNE-2E细胞中COX－2和CD44V6,E- cadherin的表达有无相关性，COX－2可否通过诱导CD44V6的表达升高和下调E- cadherin的表达来参与鼻咽癌细胞的淋巴道转移 ？

  7. 技 术 路 线

  8. 体外实验 临床病理 CNE-2Z 慢性炎 原发灶 转移灶 塞莱昔布(-) 塞莱昔布(+) 免疫组化 免疫细化 RT-PCR 细胞运动粘附实验 COX2 ECAD CD44V6 COX2 ECAD CD44V6 细胞运动、侵袭、同异粘附性 综合结果分析 COX2对细胞侵袭能力的影响

  9. 结果和讨论临床病理部分

  10. COX-2在鼻咽慢性炎上皮的弱阳性表达（SP ×400） COX-2在鼻咽癌癌旁上皮的阳性表达（SP ×400） COX-2在鼻咽癌组织的阳性表达（SP ×400） COX-2在淋巴结转移灶的强阳性表达（SP ×400）

  11. CD44v6在鼻咽慢性炎上皮的弱阳性表达（SP ×400） CD44v6在鼻咽癌癌旁上皮的阳性表达（SP ×400） CD44v6在鼻咽癌组织的阳性表达（SP ×400） CD44v6在淋巴结转移灶的强阳性表达（SP ×400）

  12. E-cad在鼻咽慢性炎上皮的弱阳性表达（SP ×400） E-cad在鼻咽癌癌旁上皮的阳性表达（SP ×400） E-cad在鼻咽癌组织的阳性表达（SP ×400） E-cad在淋巴结转移灶的强阳性表达（SP ×400）

  13. COX-2在鼻咽癌癌栓的表达 （SP ×400） CD44v6在鼻咽癌癌栓的表达 （SP ×400） E-cadherin在鼻咽癌癌栓的表达 （SP ×400） 鼻咽癌阴性对照 （SP ×400）

  14. 结果 COX-2、 CD44v6 和E-cad在不同鼻咽病变表达 阳性率（％） 组别 例数 COX-2 CD44v6 E-cad 慢性炎 26 26.9 15.4 100 癌旁上皮 33 54.5 48.5 69.7 鼻咽癌 65 61.5 50.8 53.8 癌栓组 27 92.6 85.2 11.1 无癌栓组 38 39.5 26.3 92.1 淋巴结转移灶 30 83.3 86.7 33.3 R ×C表卡方检验，x2＝28.556 , df=3 , P<0.0005

  15. COX-2 CD44v6 鼻咽癌组织中两者相关分析 鼻咽癌癌栓中两者相关分析 COX-2 CD44v6 － ＋ ＋＋ － 0 2 2 ＋ 1 7 2 ＋＋ 1 0 12 r = 0.489 , P<0.01 COX-2 CD44v6 － ＋ ＋＋ － 16 10 6 ＋ 7 4 5 ＋＋ 2 3 12 r = 0.403 , P<0.01 鼻咽癌淋巴结转移灶中两者相关分析 COX-2 CD44v6 － ＋ ＋＋ － 2 2 0 ＋ 2 4 6 ＋＋ 1 2 11 r = 0.496 , P<0.005

  16. COX-2 E-cadherin 鼻咽癌组织中两者相关分析 鼻咽癌癌栓中两者相关分析 COX-2 E-cad － ＋ ＋＋ － 0 7 13 ＋ 1 1 2 ＋＋ 1 1 1 COX-2 E-cad － ＋ ＋＋ － 9 5 13 ＋ 4 3 7 ＋＋ 12 9 3 r = - 0.260 , P<0.05 r = -0.432 , P<0.05 鼻咽癌淋巴结转移灶中两者相关分析 COX-2 E-cad － ＋ ＋＋ － 0 7 16 ＋ 2 0 1 ＋＋ 3 1 0 r =－0.647 , P<0.01

  17. 讨论 ◆ COX-2、CD44v6 、E-cad在鼻咽癌的恶性分化和淋巴道转移中起着重要作用。 ◆ COX-2与CD44v6呈正相关，与、E-cad呈负相关，提示COX-2可能通过诱导CD44v6表达升高和下调E-cad的表达来促进鼻咽癌的 浸润和转移。

  18. 结果和讨论实验病理部分

  19. 结果 MTT塞莱昔布对CNE-2Z细胞活性影响 浓度 OD值 （μmol/L） 24h 48h 0 0.439±0.008 0.345±0.039 25 0.418±0.002 0.305±0.026 50 0.402±0.005 0.272±0.032 75 0.343±0.006 0.227±0.024 100 0.283±0.006 0.181±0.017 。 F检验：在同一时间范围内，各组间差异有极显著性 （P<0.001）， F值分别为462.204，1328.306

  20. 结果 不同塞莱昔布浓度组细胞克隆形成率％ 浓度 细胞数 克隆形成数 （μmol/L） （个）（个） 0 300 256.0±7.4 25 300 206.5±11.6 50 300 177.0±6.5 75 300 119.8±12.3 100 300 38.0±10.7 F检验：各组间克隆形成率比较，差异有极显著性(P<0.001) F值321.187。

  21. 免疫细化结果 COX-2 CD44v6 E-cadherin 不同浓度组三者的表达情况 浓度 细胞数 强阳性数（个） （µmol/ L ） （个） COX-2 CD44v6 E-cad 0 400 380±11 375±10 89±11 25 400 313±12 327±13 118±10 50 400 213±8 302±8 158±6 F检验：各组间COX-2、CD44v6、E-cadherin 的表达差异 有显著性（P<0.01），F值分别为298.578 ,107.845, 78.637。

  22. 0µmol/L塞莱昔布组COX-2的强阳性表达（SP×400） 25µmol/L塞莱昔布组COX-2的强阳性表达（SP×400） 5 0µmol/L塞莱昔布组COX-2的强阳性表达（SP×400）

  23. 0µmol/L塞莱昔布组CD44v6的强阳性表达（SP×200） 25µmol/L塞莱昔布组CD44v6的阳性表达（SP×200） 50µmol/L塞莱昔布组CD44v6的弱阳性表达（SP×200）

  24. 0µmol/L塞莱昔布组E-cad的弱阳性表达（SP×200） 25µmol/L塞莱昔布组E-cad的阳性表达（SP×200） 5 0µmol/L塞莱昔布组E-cad的强阳性表达（SP×200）

  25. RT-PCR结果 不同浓度组各指标的mRNA表达水平 相对光密度值（OD） 组别（µmol/L） n COX-2 CD44v6 E-cad 0 3 1.3561±0.0192 1.0941±0.0257 0.5150±0.0083 25 3 0.8884±0.0198 0.8026±0.0234 0.8724±0.0122 50 3 0.8265±0.0169 0.6001±0.0152 1.3596±0.0115 经两独立样本T检验，用药组各指标mRNA与无药组比较， 均P<0.01。

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