苛养菌是指对营养要求苛刻，在普 通培养基上不生长或难以生长的一类 细菌；体外培养éœ

1. 第十章 苛养菌及人兽 共患病原菌 • 苛养菌是指对营养要求苛刻，在普 • 通培养基上不生长或难以生长的一类 • 细菌；体外培养需添加特殊因子或其 • 他营养成分。

2. 第一节 苛养菌 • 一、嗜血杆菌属 • 为一群无动力、无芽孢的G-细小杆菌；呈球杆状，有时呈丝状或多形态。属于巴斯德菌科,嗜血杆菌属。与临床有关的有9个：流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌、溶血嗜血杆菌、副溶血嗜血杆菌、杜克雷嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌、嗜沫嗜血杆菌、副嗜沫嗜血杆菌、迟缓嗜血杆菌。模式菌为流感嗜血杆菌。

3. （一）临床意义 • 本菌属存在于上呼吸道，定植可达人群 • 的50％。 • 1．流感嗜血杆菌 常引起鼻炎、咽炎、中耳炎、肺炎。在G-杆菌中引起肺炎者占到第三位。脑膜炎、心包炎、骨髓炎、关节炎也可分离到该菌。有荚膜b型对人致病性最强，脑膜炎病人中检出率最高，同时还可引起菌血症。其主要致病物质是内毒素、荚膜、菌毛和酶类。荚膜有杭吞噬作用，菌毛能粘附于人类口咽部细胞。致病力强的流感嗜血杆菌菌株具有lgA蛋白酶，能水解SIgA。

4. 2. 副流感嗜血杆菌 引起人类咽炎及心内膜炎，是寄居健康人体上呼吸道细菌之一。 • 3．溶血嗜血杆菌 存在于人体的鼻咽部，常引起儿童上呼吸道感染； • 4．埃及嗜血杆菌 有高度的传染性，易侵犯儿童。常存在于细胞内。 • 5．副嗜沫嗜血杆菌 属于正常菌群，引起心内膜炎、败血症、脑脓肿、脑膜炎。 • 6．杜克氏嗜血杆菌 为性传播病菌。常引起外阴脓疱、溃疡、淋巴结肿大。

5. (二) 微生物特性 • 1.为G-短小球杆菌，无芽孢、无鞭毛、有荚膜菌株，毒力较强。 • 2.需氧或兼性厌氧，最适生长温度为35℃，pH以7．6-7．8为最佳。培养时必须供给含有X、V因子的新鲜血液。最佳培养基是巧克力琼脂：因为加热可使V因子释放。 • 3.根据荚膜多糖抗原可分为6个血清型，其中b型的致病性最强，f型次之。 • 4.抵抗力弱，加热50℃30分钟被杀死。消毒剂敏感，干燥易死亡。DNA 的G+Cmol％为37—44。

6. (四)微生物检验 • 1．根据不同感染分别采取血液、脑脊液、鼻咽分泌物，采集后立即送检。 • 2．直接镜检 查到G-短小杆菌或多形态杆菌，结合临床症状，可做初步诊断。 • 3.分离培养 巧克力琼脂中加入抗生素(万古霉素、杆菌肽、氯林可霉素)，可提高本菌的阳性率。经18～24h培养出现小、无色透明的菌落。因为葡萄球菌能合成Ｖ因子释放，促进本菌的生长，故与金黄色葡萄球菌一起培养时，可见到靠近葡萄球菌的菌落较大，而远离的菌落较小，称为“卫星现象”。

7. 4.抗原检测：可做荚膜肿胀试验,取抗体与菌悬液混匀，加美蓝混合后，室温10分钟用油镜观察，如菌体呈蓝色，周围绕有膨大空白圈为阳性。4.抗原检测：可做荚膜肿胀试验,取抗体与菌悬液混匀，加美蓝混合后，室温10分钟用油镜观察，如菌体呈蓝色，周围绕有膨大空白圈为阳性。 • 5.核酸检测：即取囊性纤维化病人的痰，采用DNA杂交的方法，检查流感嗜血杆菌的外膜蛋白，比传统的培养方法阳性率高。

8. 6.药物敏感试验 流感嗜血杆菌引起的感染性疾病，若β-内酰胺酶阴性，则首选氨苄青霉素、阿莫西林，次选磺胺及增效剂(TMP-SMZ)、二、三代头孢菌素、红霉素及氨曲南。应选用专用培养基(HTM)，检测β-内酰胺酶，如阳性提示对青霉素、氨苄西林和阿莫西林均耐药。b型与非b型相比，b型产生β-内酰胺酶比非b型高两倍。

9. 二、鲍特菌属 • (一)分类 • 包括百日咳鲍特菌、副百日咳鲍特菌、支气管鲍特菌、鸟鲍特菌、欣氏鲍特菌、霍氏鲍特菌，前三种DNA同源性高达72％～94％，DNA的G+C mol％为66～70，是临床常见的致病菌，而后三种临床致病报道较少。

10. (二)临床意义 • 百日咳的致病菌，人是惟一的传染源，通过飞沫传染。 • 感染后传染性强，患者出现阵发性剧烈咳嗽，直至咳出粘稠的痰液或呕吐为止。 • 病后及预防接种后可产生较持久的免疫力。

11. 本菌粘附在气管和支气管上皮细胞上并迅速繁殖释放毒素：①百日咳毒素是主要毒力因子，与阵发性咳嗽、支气管痉挛有关。②丝状血细胞凝集素能促进病原菌粘附在纤毛上皮细胞上。③腺嘌呤环酶毒素可使吞噬活性受抑，导致免疫力减低。④气管细胞毒素对纤毛上皮细胞有特殊亲和力，抑制纤毛摆动并使细胞坏死脱落。本菌粘附在气管和支气管上皮细胞上并迅速繁殖释放毒素：①百日咳毒素是主要毒力因子，与阵发性咳嗽、支气管痉挛有关。②丝状血细胞凝集素能促进病原菌粘附在纤毛上皮细胞上。③腺嘌呤环酶毒素可使吞噬活性受抑，导致免疫力减低。④气管细胞毒素对纤毛上皮细胞有特殊亲和力，抑制纤毛摆动并使细胞坏死脱落。

12. (三)微生物特性 • 该菌属为G-小杆菌，无芽胞，有荚膜。专性需氧，最适生长温度为35℃—37℃， • O抗原为共同抗原，K抗原的因子7为百日咳、副百日咳和支气管炎鲍特菌所共有。经多次传代后，菌落变为粗糙而呈多形性；失去荚膜变为无毒株。 • 抵抗力弱，但在低温能生存，对紫外线敏感，日光照射60分钟可死亡。

13. （四）微生物检验 • 1．标本采集 ①咳碟法：患者对准打开的鲍-金氏培养基平板咳嗽数次，直接收集病人咳出的飞沫培养。②鼻咽拭子法：将拭子进入鼻咽部采集标本。 • 2．革兰染色直接镜检为G-小杆菌。 • 3．初次分离对营养要求较高，需要半胱氨酸和组氨酸等，并产生过多的脂肪酸可抑制生长，因此应加入15％-25％血、活性炭吸附多余的脂肪酸；2—3天可形成细小光滑、灰色不透明的露滴状菌落，并有狭窄的溶血环。

14. 4.抗原检测： • （1）以荧光标记抗体检测菌体，外周呈 • 绿色荧光，中心暗的球杆菌为阳性。 • （2）可用 ELISA的方法测特异性脂多糖 • 抗原。 • 5.核酸检测： • 检测百日咳鲍特菌的DNA, • 有高度特异性。

15. (五)临床治疗 • 首选红霉素类；次选氨曲南及磺胺增效剂(SMZ-TMP)，对青霉素不敏感。 • 该菌感染的控制以预防接种为主，小于6个月的婴儿患病时应注意并发肺炎、脑膜炎及呼吸衰竭。

16. 第二节 人兽共患病原菌 • 大多数引起动物感染的微生物，不能引起人类感染。但有少数微生物既能感染动物也能感染人，被称为人兽共患微生物。包括病毒、细菌、螺旋体、立克次体等。 • 人兽共患炭疽细菌包括芽胞杆菌、鼠疫耶尔森菌、布鲁菌属、巴斯德菌届、弗朗西斯菌属等。

17. 一、布鲁菌属 • 包括羊布鲁菌(又称马尔他布鲁菌)、牛 • 布鲁菌(又称流产布鲁菌)、猪布鲁菌、绵 • 羊布鲁菌、狗布鲁菌、森林鼠布鲁菌等6 • 个种，但经DNA-DNA杂交研究只有一种, • 其他均为变种。 • DNA G+C mol％为56～58。

18. （一）临床意义 • 可通过皮肤、呼吸道、消化道引起感染，以长期发热多汗、关节痛及全身乏力疼痛为特征。多见于牧区，城市散发，发病季节以夏秋较多。传染源为病兽，病菌存在于乳液、阴道分泌物、胎儿及羊水内，引起动物死胎及流产。在淋巴结、脾、骨髓等处繁殖，并多次进入血液引起菌血症，有各种类型发热，常见波状热。

19. 布鲁菌为胞内寄生菌，故以细胞免疫为主，它有较强的内毒素，能产生透明质酸酶和过氧化氢酶有关。有利于细菌生长繁殖和扩散，致病性还与迟发性超敏反应有关。但特异性IgM和lgG可发挥免疫调节作用。布鲁菌各菌种或生物型的抗体有交叉保护作用，其初期的免疫为有菌免疫，但随着免疫力不断增强，可转变为无菌免疫。

20. （二）微生物特性 • Ｇ-短小球杆菌，无动力无芽胞、光滑型有微荚膜，家畜的胎盘、绒毛膜中都含有赤癣醇，为本菌的生长因子；所以这些部位对感染敏感。 • 为需氧菌，营养要求高，初次分离时需５～10％的C02及硫胺、烟酸、生物素等物质，最适生长温度为35℃，最适pH 6．7。生长缓慢，初代分离更为迟缓。 • 其抗原结构复杂，主要有A和M抗原，羊布鲁菌A：M约为1：20；牛布鲁菌A：M约为20：1。

21. (三)微生物检验 • 1.采集血液、骨髓、尿液或流产胎儿的淋 • 巴、肝脾肺组织，及流产的子宫分泌物 • 等标本。 • 2.在血琼脂平板培养5～7天可形成微小、 • 灰色不溶血菌落。延长培养≥30天才能 • 报告阴性 • 3．生化鉴定及染料抑制试验：可利用葡萄 • 糖等糖类，但产酸量少。

22. 各种布鲁菌的生化鉴定

23. 4．药物敏感试验 临床治疗首选强力霉素，次选磺胺增效剂(TMP／SMZ)；由于病程长，用药时间需4—6周。药敏试验可不作为临床常规。 • 5．抗体检测 感染后2周血中开始出现不完全抗体，需用抗人球蛋白检测，且在病程进展中不断的升高。发病3周后出现IgG抗体，其特异性较高。

24. 6．结果解释 • 由于培养的营养苛求而且时间长，应以血 • 清学诊断为主。从患者的标本中分离出布鲁 • 菌即为确诊的依据。应尽早抽血或骨髓作分 • 离培养。 • 血清学检查是常用的诊断方法，症状出现 • 后，抗体效价上升，持续时间很长；若抗体 • 效价再次升高，可能是重复感染或复发。补 • 体结合试验特异性强，诊断价值较高。

25. 二、巴斯德菌属 • 常寄生在上呼吸道，与人类疾病相关的有 • 多杀巴斯德菌、嗜肺巴斯德菌、溶血巴斯德 • 菌、犬巴斯德菌等。其中常见的为多杀巴斯 • 德菌，为模式菌种。DNA G+Cmol％为 • 40～45。 • 引起动物败血病、鸡霍乱等，人类感染多 • 是通过被狗、猫咬伤或抓伤所致。常引起肺 • 部感染、菌血症、脑膜炎、脑脓肿及伤口感 • 染，近年来，家养宠物增多，所以该病较为 • 多见。

26. G-球杆菌，无动力无芽胞，触酶、氧化酶阳性。为需氧或兼性厌氧菌，生长温度为35℃，在血培养基上生长良好。18—20h，可形成白色不溶血，直径0．5～1．5mm的小菌落，发酵葡萄糖产酸不产气不发酵乳糖，能还原硝酸盐。 • 首选治疗药物是阿莫西林加棒酸：如β-内酰胺酶类抗生素过敏，可选环丙沙星、氟哌酸或磺胺类。

27. 三、弗朗西斯菌属 • 本菌属有土拉弗朗西斯菌和新凶手弗朗西 • 斯菌等2个种。 • 土拉弗朗西斯菌是引起土拉热病(野兔热) • 的病原菌，流行于野兔和啮齿动物中，人因摄 • 入污染食物和水可经消化道感染，吸入污染空 • 气经呼吸道感染，或因昆虫叮咬而感染。 • 其DNA的G+Cmol％为36 — 38。

28. 本菌属甲类菌种，分离鉴定只能在专门实验室进行，应注意安全，防止交叉感染，工作人员应接受预防接种。本菌属甲类菌种，分离鉴定只能在专门实验室进行，应注意安全，防止交叉感染，工作人员应接受预防接种。 • 为G-小杆菌，无芽胞、鞭毛和荚膜。为需氧菌，用卵黄或胱氨酸血培养基分离，最适生长温度为35℃，降低温度则生长缓慢。 • 水中可存活1—2个月；对热、消毒剂敏感。与鼠疫耶尔森菌有共同抗原和交叉反应。

29. 采用血清凝集试验检测抗体，发病一周后 • 即出现血凝抗体，在病程中抗体效价4倍增长 • 或单价血清效价1：160才可诊断。 • 该菌对氨基糖甙类抗生素敏感，首选链霉 • 素或庆大霉素，此外还可选四环素类药物均 • 有较高的治愈率，抗生素敏感试验可不作为 • 常规试验。