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Estudio de Caso

Estudio de Caso. Selection and characterization of BCR-ABL positive cell lines with differential sensitivity to the tyrosine kinase inhibitor STI571: diverse mechanisms of resistance BLOOD, 1 AUGUST 2000 • VOLUME 96, NUMBER 3. Leucemia Mieloide Cr ónica. Translocaci ón t(9;22)(q34;q11).

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Presentation Transcript

  1. Estudio de Caso Selection and characterization of BCR-ABL positive cell lines with differential sensitivity to the tyrosine kinase inhibitor STI571: diverse mechanisms of resistance BLOOD, 1 AUGUST 2000 • VOLUME 96, NUMBER 3

  2. LeucemiaMieloideCrónica • Translocaciónt(9;22)(q34;q11)

  3. LeucemiaMieloideCrónica Resultado: Gen BCR ABL

  4. Gen BCR – ABL • La translocación genera unaproteínaquimérica (de la unificación del gen BCR y ABL), la cualocasionaunaproteína con actividadtirosinquinasadesregulada.

  5. CascadaTirosinquinasa

  6. Desarrollo de medicamento • STI571, inhibidor de la tirosinquinasa, derivado del 2 –fenilaminopirimidina. Estainhibecompletamente el enlace entre el ATP y el dominio ABL en concentracionesmicromolares. Inhibetambién la mayoría de laslíneascelularescromosomafiladelfiapositivas. • Sin embargo, algunascolonias de sangreperiférica o médulaóseasobreviven a la presencia del compuesto.

  7. Objetivo del Estudio • Investigar el mecanismo de resistencia a STI571 mediante la generación de sublineascelulares, resistentes y sensibles en diferenteslíneasfiladelfiapositivas. • Se observaráque se presentaunasobreexpresiónsignificativa del gen en variaslíneascelulares.

  8. Metodología 1: Southern Blot • Presencia del Gen

  9. Metodología 2: Northern blot • Expresión del gen: cADN o ARN.

  10. Metodología3: Western blot

  11. Resultados: Norhtern blot

  12. Reslutados: Western Blot

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