360 likes | 882 Vues
KRONISK LYMFATISK LEUKÆMI Biologi Risikovurdering Behandling. Jesper Jurlander Leukæmilaboratoriet Hæmatologisk Klinik Rigshospitalet. KRONISK LYMFATISK LEUKÆMI. Incidens: 250 nye tilfælde pr år i Danmark Medianoverlevelse: 7 år Prævalens: 1750 patienter i DK i dag.
E N D
KRONISK LYMFATISK LEUKÆMI Biologi Risikovurdering Behandling Jesper Jurlander Leukæmilaboratoriet Hæmatologisk Klinik Rigshospitalet
KRONISK LYMFATISK LEUKÆMI Incidens: 250 nye tilfælde pr år i Danmark Medianoverlevelse: 7 år Prævalens: 1750 patienter i DK i dag Pär Josefsson, Leukæmilaboratoriet, Blood, 2007 176 RH patienter 1990-2003
RISIKOVURDERING VED CLL Medianoverlevelse: 7 år 176 RH patienter 1990-2003 Klinisk stadieinddeling (Rai eller Binet) Kun lymfocytose > 15 år Lymfeknudesvulst 7 år Knoglemarvssvigt 2 år Et deskriptivt værktøj, som kun siger noget om tumorstørrelse på diagnosetidspunktet
B-CELLE UDVIKLING CD79, CD20 m.fl. cyCD22 CD19, CD10 Membranprotein ekspression Immunglobulin gen rearrangement VDJ rekombination sIgM, sIgD, k/l Non-funktionel eller autoreaktiv BCR Funktionel BCR Moden B-celle Apoptose
VDJ REKOMBINATION Immunglobulingener Tunge kæder på kromosom 14 Joining gen segment Variabelt gen segment Diversitets gen segment RAG-gener og Terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT) constant Unik (klonal) IgVH sekvens
FUNKTIONELLE B-CELLE RECEPTORER Kappa eller lambda letkæde IgM eller IgD tung kæde IgM eller IgD tung kæde CD79a (Ig-a) CD79b (Ig-b) CD79a (Ig-a) CD79b (Ig-b) Overlevelsessignal
GERMINAL CENTER REAKTIONEN Klonal ekspansion Somatisk hypermutation Antigen dreven selektion Proliferation Isotype switch Differentiering Plasma celle Naiv B-celle Memory B-celle
DEN IMMUNOLOGISKE SYNAPSE DENDRITISK CELLE T-LYMFOCYT CD28 CD80 HLA-DR TCR CD70 ? CD40-L CD27 IL-2 IL-4 IL-10 CD40 BCR ANTIGEN Cytokin receptor B-LYMFOCYT OVERLEVELSE OG VÆKST
B-CELLEUDVIKLING OG IMMUNGLOBULINGENER IMMUNOPOIESE I lymfeknuder Afhængig af antigen Hypermutation af immunglobulingener LYMFOPOIESE I knoglemarven Uafhængig af antigen Rearrangement af immunglobulingener
ANTIGEN RECEPTOR ANALYSE constant Polyklonale B-celler B-celle klonalitet RT-PCR GeneScan analyse
FR1 CDR1 FR2 CDR2 FR3 UPN1 UPN3 UPN4 UPN5 UPN6 UPN7 UPN8 UPN24 UPN25 UPN62 CLL IgH SEKVENSER - UMUTEREDE UPN2 UPN34 UPN59
CLL IgH SEKVENSER - MUTEREDE UPN12 UPN15 UPN10 UPN9 UPN11 UPN13 UPN16 UPN14 UPN18 UPN26 UPN20 UPN21 UPN27 UPN28 UPN29
IgVh MUTATIONER VED CLL Binet Stadium A Alle patienter BLOOD SEPTEMBER 1999 IgVh mutationsstatus forudsiger overlevelsen ved CLL
CD38 VED CLL CD38 forudsiger overlevelsen ved CLL
EN ELLER TO SYGDOMME? Unmutated Mutated Kan skelne mellem CLL og andre sygdomme, samt umuteret og muteret CLL. Men CLL profilen er meget homogen = 1 sygdom Rosenwald et al, J Exp Med, December 2001
MUTERET ELLER UMUTERET CLL? Umuteret Muteret Det mest differentielt udtrykte gen, mellem umuteret og muteret CLL, var ZAP70 Rosenwald et al, J Exp Med, December 2001
ZAP-70 VED CLL ZAP70 forudsiger overlevelsen ved CLL Crespo et al, N Eng J Med: 2003; 348; 1764-1775 Rassenti et al, N Eng J Med: 2004; 351; 893-901
CYTOGENETIK VED CLL Leukæmilaboratoriet, Josefsson et al, Blood, 2007 Modificeret hierarkisk model efter Döhner et al NEJM 2000 Median overlevelse Deletion 13q14: Ikke nået Normal, Trisomi 12 6,9 år Del11q22, del17p: 2,5 år Visse kromosom forandringer forudsiger overlevelsen ved CLL
p GENETISKE AFVIGELSER VED CLL DNA SKADE KONTROL CLL celler med deletion 11q22 taber ATM funktion ATM CELLE CYKLUS KONTROL CLL celler med 17p deletion taber p53 funktion p53 APOPTOSE KONTROL BCL-2 (miR15 eller miR16) CLL celler med deletion 13q14, og dermed miR15 og miR16 deletion erhverver BCL-2 funktion
p CLL GENETIK OG CANCER DNA SKADE KONTROL GENETISK INSTABILITET ATM CELLEVÆKST CELLE CYKLUS KONTROL CANCER p53 FORLÆNGET LEVETID BCL-2 APOPTOSE KONTROL
IgVH mutations status: DD-RT-PCR Differential Display Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction Umuteret Muteret UPN3 UPN4 UPN5 UPN6 UPN7 UPN8 UPN9 UPN10 UPN11 UPN12 UPN13 UPN14 UPN15 UPN16 UPN2 UPN1 CLLU1: Chronic Lymphocytic Leukemia Upregulated gene 1 Indeholder en 225 bp sekvens med perfekt homologi til en genomisk sekvens på kromosom 12q22 Buhl et al, Blood, 2006
KROMOSOMAL PLACERING AF CLLU1 Klonede fra germinal center B-celler Klonede fra CLL celler Buhl et al, Blood, 2006
CLLU1 ER OPREGULERET I ALLE PROGNOSTISK UGUNSTIGE GRUPPER Buhl et al, Eur J Haematol, 2006
CLLU1 SOM KONTINUERT VARIABEL Josefsson et al, Blood 2007
CLLU1 SOM KATEGORISK VARIABEL p = 0.0036 CLLU1low (n=101) (N = 176) Josefsson et al, Blood 2007
CLLU1 OG ALDER! DEN INFORMATIVE VÆRDI AF EN GIVEN RISIKOMARKØR KAN, ELLER VIL, AFHÆNGE AF STUDIEPOPULATIONENS ALDER Josefsson et al, Blood 2007
KRONISK LYMFATISK LEUKÆMI HVORDAN INDARBEJDER VI RISIKOMARKØRER I CLL BIOLOGI?
FUNDAMENTALISTISKE MODEL CLLU1 EKSPRESSIONS NIVEAU CLLU1 GENE EKSPRESSION OG FUNKTION INDOLENT SYGDOM (CBCLUS) PROGRESSIV SYGDOM NEDSAT TILBØJELIGHED TIL APOPTOSE ØGET PROLIFERATION
EKSTRINSIKKE MODEL HØJ SIGNALERINGS KAPACITET UMUTERET BCR HØJ ZAP-70 HØJ CD38 ELLER VH3-21 STEREOTYPI? LAV SIGNALERINGS KAPACITET MUTERET BCR LAV ZAP-70 LAV CD38 ELLER VH4-34 STEREOTYPI? FÆLLES ANTIGEN? ? VH3-21 ? ? ZAP-70 Inert CD38 SIGNAL GEN EKSPRESSIONS SIGNATURER CLLU1? INDOLENT SYGDOM KORT TID TIL FØRSTE BEHANDLING KORT TOTALOVERLEVELSE KORTVARIGT BEHANDLINGSRESPONS NEDSAT TILBØJELIGHED TIL APOPTOSE ØGET PROLIFERATION
INTRINSIKKE MODEL HØJT MALIGNT POTENTIALE LAVT MALIGNT POTENTIALE FRAKTION AF POSITIVE CELLER (SUBKLONER?) CLLU1? GEN EKSPRESSIONS SIGNATURER Bcl-2 p53 ATM Del 13q14 Normal ELLER Trisomi 12 Del 11q ELLER Del 17p KORT TID TIL FØRSTE BEHANDLING KORT TOTALOVERLEVELSE KORTVARIGT BEHANDLINGSRESPONS INDOLENT SYGDOM NEDSAT TILBØJELIGHED TIL APOPTOSE ØGET PROLIFERATION
KRONISK LYMFATISK LEUKÆMI HVORDAN INDARBEJDER VI RISIKOVURDERING I BEHANDLINGEN ?
KRONISK LYMFATISK LEUKÆMI HVORDAN INDARBEJDER VI RISIKOVURDERING I BEHANDLINGEN ? • Identifikation af patienter hvor tumorreduktion, • eller ingen behandling, er tilstrækkeligt eller eneste • mulighed. • 2) Identifikation af patienter hvor tumorkontrol, • med nye behandlingsregimer, er nødvendige. • 3) Identifikation af patienter som ikke kan opnå • tumorkontrol, og har behov for tumoreradikation.
GENEREL RISIKOVURDERING BEHANDLINGSSVIGT OG TIDLIG DØD HØJ BIOLOGISK RISIKO BEHANDLINGSSVIGT SYGDOMS RELATERET GOD PROGNOSE TIDLIG DØD LAV BIOLOGISK RISIKO LAV ALDER INGEN CO-MORBIDITET HØJ ALDER CO-MORBIDITET VÆRTS RELATERET
CLL BEHANDLING PROTOKOL ! FLUDARABIN BASERET KOMBINATION FORBERED ALLOGEN KMT PALLIATIV HØJ BIOLOGISK RISIKO SYGDOMS RELATERET LEUKERAN (FLUDARABIN BASERET KOMBINATION) FLUDARABIN BASERET KOMBINATION LAV BIOLOGISK RISIKO UNDER 70 ÅR INGEN CO-MORBIDITET OVER 70 ÅR CO-MORBIDITET
SAMARBEJDSPARTNERE Leukæmilaboratoriet Rigshospitalet ANNE METTE BUHL Christian Geisler Pär Josefsson Lone Bach Lone Pedersen Afdelingen for vækst og reproduktion Rigshospitalet HENRIK LEFFERS Guy Petersson Brian Vendelbo Hansen Anne Marie Ottesen Klinisk Genetisk Afdeling Rigshospitalet Mette Klarskov Andersen Granulocyt Laboratoriet Rigshospitalet Jack Cowland Institut for Biostatistik Københavns Universitet Jørgen Holm Petersen Farmaceutisk Universitet Flemming Steen Jørgensen
FORSKNINGEN ER STØTTET AF: Kræftens Bekæmpelse Benzon Fonden Svend Andersen Fonden Rigshospitalet Københavns Universitet Statens Sundhedsvidenskabelige Forskningsråd Nordisk Cancer Union John og Birthe Meyer Fonden Frænkel Fonden Anders Hasselbach Fonden Carla Thiels Legat