B cell aktivering. Kursbok: ”The immune system” Peter Parham Kapitel 7.1-7.5 utom figurer 7.5 och 7.6

1. B cell aktivering. Kursbok: ”The immune system” Peter Parham Kapitel 7.1-7.5 utom figurer 7.5 och 7.6

2. De flesta av de farligaste bakterierna förökar sig utanför cellen. • De intra-cellulära patogen sprider sig från det ena cellen till det andra, och • infinner sig också då utanför cellens gränser. Det humorala svaret leder till • eliminering av extracellulära patogen samt förhindrar att en infektion • skall fortplanta sig. • Det finns 3 olika sätt med vilka en antikropp kan ingripa: • Neutralisation: förhindrar virus och intracellulära bakterier att • penetrera i cellen. Den förhindrar också bakteriella toxiner av att ansatta • cellerna. • 2) opsonization: Antikroppar täcker patogen och antikroppens Fc del • binder till Fc receptorer närvarande på fagocyternas yta. Patogenet tas in, • och tuggas sönder. • 3) Komplement aktivering: antikroppar som binder till patogen yta • aktiverar komplement systemet. Komplement proteiner opsoniserar • patogen och binder till komplement receptorer på fagocyternasyta. • Andra komplement proteiner rekryterar andra fagocytiska celler till • inflammation stället. Slutligen, komplement systemet kan förstöra patogen • på ett mera direkt sätt genom att borra in porer i patogen membran.

4. B cell receptor: ITAM: Immunoreceptor Tyrosine Based activation receptor.

5. The crucial effect of ligand binding is antigen clustering which occurs when the receptors are crosslinked; it is also important for the effectivity and the strength of the signal. This clustering leads to activation of intracellular signals. Protein tyrosin kinaser är oftast de molekyler som sätter igång nästa signaleringssteg genom att addera en fosfat group på en tyrosine Y.

6. Fully phosphorylated ITAMs bind the protein tyrosine kinase Syk and enable to activate them. PTK Src

7. The B-cell co-receptor enhances the strength of signalling of the B-cell • receptor. • CR2 binder till komplement C3d på • patogenytan. Crosslinkung mellan B-cell • receptor och co-receptor. Clustering. • CD19´s cytoplasmiska svans fosforyleras • av protein kinaser, som associerats först • till B-cell receptorn. • CD19 binder då till andra • intracytoplasmiska proteiner som skapar • en signaleringskaskad som förstärker • B-cell receptorns initierad signal. • Vi vet inte vad CD81 (TAPA-1) gör. • B-cell receptor signalen är inte tillräckligt • stark ensam. B-cellen behöver bägge signal • processer, som ökar signaleringsstyrka • Med 1000 till 10000 gånger för att sätta igång.

9. Plasma cell: Note the extensive ER.

10. B-cellssvar aktivering

12. B-celler som får den andra signalen från Th2 celler bildar en ”primary focus of dividing B-lymphoblasts”.

14. Helper T-cells activate B-cells that recognize the same antigen = LINKED RECOGNITION. Before B-cells can be induced to make antibody to a given pathogen, a CD4 T-cell specific for peptides of the same pathogen must first be activated to produce armed helper T-cells. Helper T cells that have primed earlier in the infection by macrophages or DCs presenting these same internal peptides can then activate the B-cell to make antibodies that recognize the pathogen.This phenomena is very important to help ensuring self-tolerance. 1 2 IL-4 IL-5 IL-6 2

15. Hur kommunicerar de?: • CD40 binder till CD40L; • IL-4 produceras av T cellen • och jobbar i synergi • med CD40/CD40L kontakten • för att klonal • expansion skall påbörjas • (= SIGNAL 2). • IL-5 och IL-6 hjälper till att • påskynda B-cell • differentiering till plasma • celler. Polarization of the cytoskeleton

16. Germinal Centers: • B cell proliferation • Somatic hypermutation • Selection for antigen binding

17. AFFINITY MATURATION: • Processen genom vilken antikropparnas affinitet för antigenet ökar vid • ett humoralt svar. • Affinitets mognad innebär en kombination av somatisk hypermutation • samt en selektering av de B-cellerna som producerar antikroppar med • högsta affinitet. • Efter att B-cellen har blivit aktiverad i ”primary focus of clonal • expansion”området i T-cells zonen, attraheras de med sina koordinerande • hjälp T celler till B-cells zonen och mera exakt till det som kallas för • primary follicles, där de medverkar till att skapa en germinal center. • Några stycken B-celler kommer att förflyttas till ”medullary cords” • zonen i lymfkörteln där de snabbt differentierar till kort-livade plasma • celler som producerar IgM eller IgG och är snabbt ute för att bekämpa • patogen invasionen. • Närvaro av follikylära dendritiska celler (FDC) är nödvändig för • germinal centrum funktion. De attraherar aktiverade och naiva B-celler • till B-cells zonen samt spelar en central roll i affinity maturation.

18. FDCs är väldigt bra på att presentera antigen en mycket lång tid (men de • uttrycker inte MHC klass II och har inget att göra med vanliga DCs). • Mycket litet är känt apropå FDCs. • När aktiverade B-celler kommer in i de primära follikylära områdena, • börjar de att dela på sig och blir centroblast celler. De formerar den • mörka delen (dark side) av germinala centret. • Centroblaster blir så småningom centrocyter som förflyttar sig till det • ljusa delen (light side) av germinala centret och interagerar med FDCs. • Hjälper T-cells följer med hela vägen och genomgår klonal expansion. • B-cellerna som inte är specifika för antigenet är utkastade till yttre delen • av germinala centret, i det så kallade mantle zone. • Hypersomatiska mutationen av V-generna sker i centroblasterna. • 1) Creation of variability: Somatic hypervariation • 2) Selection of the fittest cells: FDCs. • Centrocyter ger slutligen upphov till: • 1) memory B cells. • 2) antibody-secreting plasma cells.

19. Centroblast Proliferation + isotyp switching + somatisk hypermutation Centrocyt Non-dividing PlasmaMinne Follicular Dendritic Cells

21. FDC binder hela antigen på ytan. Antigen ensamma eller i komplex med antikroppar eller komplement (Immune complexes). Centrocyter är programmerade till att begå apoptos. De kommer att undgå detta genom att binda via deras B-cells receptorer till patogen på FDC, ta in det, antigen processera det och presentera peptid ånyo på MHC klass II till Th2. Centrocyter behöver också CD40/CD40L signalering från Th2-celler för att överleva. FDC B-cell taking in an iccosome. Iccosome beads Iccosome: Immune-complex coated bodies.

22. Affinity Maturation.

23. Lymfocyt överlevnad bibehålls genom en balansgång mellan dödpromovering (död +) och dödinhiberande (död -) signaler från Bcl2-familjen. Death-inhibiting genes: bcl-2 and bcl-XL. Death-promoting genes: Bax and Bad.

24. Tydliga skillnader mellan vanliga B-celler och plasma celler: • Plasma celler kan inte längre interagera med antigen eller med Th2 celler • Plasma celler får signaler från bone marrow stromal celler för att överleva • Ingen vet varför en B-cell till en plasma cell eller till en memory cell.

25. ISOTYP SWITCHING: • The specificity of an antibody response is determined by the antigen • binding site, which is consisting of two V-domains. The effector action • of the antibody is determined by • the isotype of its heavy chain. • Helper T-cells regulate both the • production of antibodies by B cells • and the isotype that determines • the effector function of the antibody • that is ultimately produced. • They do that through the use • of cytokines. • The same VH exon can associate • with different CH genes during the • course of an immune response. IgM, IgD Naive B-cells IgG Isotype switching IgG, IgA, (IgE)

26. Olika cytokiner inducerar isotyp switch till olika isotyper: Isotyp switching fordrar uttryck av CD40L på T helper cellen och styrs av de producerade cytokinerna. Th2 Th1 Th2

28. B cell effektor funktioner. Kursbok: ”The immune system” Peter Parham Kapitel 7.6-7.14

35. Accessory effector cells: • Macrophages Bakteria • Neutrophils Bakteria • Natural Killer cells (NK cells) • Eosinophils Parasites • Basophils Parasites • Mast cells Parasites • Dessa celler samarbetar och aktiveras när deras Fc receptorer • binder antikropparnas Fc del.

36. ADCC: ANTIBODY-DEPENDENT CELL-MEDIATED CYTOTOXICITY NK cell

39. Många bakterier (täckta med polysaccharides) kan undvika att bli fagocyterade av makrofager eller neutrofiler. Antikroppar täcker sådana bakterier och mha deras Fc del meddelar till makrofager eller/och till neutrofiler att ta in hela komplexet och förstöra allting genom att fusera lysosomer med fagosomet.

40. Det är endast när antikropparna har aggregerats på ytan av bakterien som den totala affiniteten går över en viss tröskel så att accessory cellerna triggas till action. Det är också på det sättet som Fc receptorer skiljer mellan lösliga och bundna antikroppar.