Доктор медицинских наук, профессор Мулдашев Эрнст Рифгатович

1. ВСЕРОССИЙСКИЙ ЦЕНТР ГЛАЗНОЙ И ПЛАСТИЧЕСКОЙ ХИРУРГИИ РЕАБИЛИТАЦИОННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ В ОФТАЛЬМОЛОГИИ С ПРИМЕНЕНИЕМ БИОМАТЕРИАЛОВ АЛЛОПЛАНТ Доктор медицинских наук, профессор Мулдашев Эрнст Рифгатович Кандидат медицинских наук ГалияхметовРадикФаязович

2. АКТУАЛЬНОСТЬ Исследование саногенетических механизмов восстановления функций организма и отдельных органов остается приоритетным направлением современной патофизиологии В силу морфофункциональных особенностей (оптические свойства, метаболизм), и большой значимости для нужд практической офтальмологии особый интерес представляет исследование процессов регенерации роговицы при различных экстремальных воздействиях, в частности при ожогах

3. ОТДЕЛ ВОССТАНОВИТЕЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫ И РЕАБИЛИТАЦИИ Определить эффективность репаративной регенерации поврежденной ожогом роговицы при локальном и рефлексогенном воздействиях диспергированнымаллогенным биоматериалом.

4. Основные свойства биоматериалов Аллоплант • Низкая антигенность • Аттракция стволовых клеток • Предотвращение рубцевания • Стимуляция регенерации нормальных тканей • Системное иммуномодулирующее действие 80 мкм биоматериалы Аллоплант БиоматериалыАллоплантдля акупунктурноговведения

5. ИММУННЫЙ ОТВЕТна аллотрансплантатысо свободными гликозаминогликанами более1000пациентов • Отсутствие специфической реакции(CD3, CD4, CD8, CD16, CD72, HLA-DR, CD25; функциональной активности лимфоцитов; уровня сывороточных иммуноглобулинов) • Иммуномодулирующее действие(стимуляция фагоцитарной активности, активация резидентных и медуллярных стволовых клеток и пр.) • Отсутствие изменений или снижение показателей тканеспецифической сенсибилизации(ретинальный S-антиген, антигены роговицы и хрусталика) (Э.Р. Мулдашев, 1975; В.У. Галимова, 1984; К.А. Захваткина с соавт. 1987; Р.З. Кадыров, 1998; Н.Н. Курчатова, 1990; С.В. Сибиряк 1996; В.Г. Яковлева 1998; Р.Т. Булатов, 1998; Г.Г. Корнилаева, 1999; Л.Ф. Галимова, 2000; Н.Е. Сельский, 2000 и др.)

6. Общий объем исследования

7. Основные методы исследования • Окраска гистологических срезов по Ван-Гизону, по Маллори, гематоксилином и эозином • Световая микроскопия на микроскопе MC-50 (объектив ×40, окуляр ×20), на микроскопе Мин. – 8 (объектив ×60, ×20, Гомаль-3) • Поляризационная микроскопия • Измерение коэффициента анизотропииколлагеновых волокон • Измерение площади суммарного просвета капилляров в области лимба • Иммуногистохимические исследования с использованием МКАТ к TGFβ-1 и PCNA • Статистический анализ данных

8. БИОХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ ДИСПЕРГИРОВАННОГО БИОМАТЕРИАЛА АЛЛОПЛАНТ (ХАСАНОВ Р.А. 2002) • Коллаген - 76,4% • Гепарансульфат – 0,59 % • Гиауроновая кислота – 2,42% • Хондроитинсульфат – 0,44% • Прочие белки – 10,35% • Вода – 9,8% Размеры частиц 80-120мкм

9. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ РЕАКТИВНОСТИ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ТОЧЕК (БАТ) ПРИ ВВЕДЕНИИ БИОМАТЕРИАЛОВ Первый раздел работы схемаинъекционного введениядиспергированного биоматериала Аллоплант (ДБМА) по акупунктурным точкам задней срединной линии Классическая иглорефлексотерапия ( контрольная серия от 1 до 10 процедур) Введение диспергированного биоматериала в БАТ (опытная серия) Идентификация биологически активных точек аппаратом «Acu Vision-04» (Россия) Сроки вывода из эксперимента – 14 сут. после завершения процедур Общее количество лабораторных животных – 22

10. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ (КОНТРОЛЬ) Второй раздел работы химический ожог роговицы модифицированная модельэкспериментального ожогового бельма,(А.Э. Бабушкин, Г.Г. Хафизов, 1996) Роговица Аппликация 2,5 % раствора NaOH Блефаростат Сроки вывода из эксперимента – 3, 7, 30 сут. Общее количество лабораторных животных – 27 (54 глаза)

11. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ (ОПЫТ) Щелочной ожог роговицы с перелимбальным введением ДБА инъекция ДБА Щелочной ожог роговицы с акупунктурным введением ДБА инъекция ДБА Фармакопунктура с ДБА

12. Динамика коэффициента анизотропии в различные сроки эксперимента в контроле (красные столбцы), при перилибальном введении (синие столбцы) и рефлексогенном воздействии (желтые столбцы) ДБА Окраска по Маллори % Дезорганизация собственного вещества 3-и сутки 7-е сутки Дифференцировка роговичных пластин Высокий коэффициент анизотропии показывает на активацию репаративных процессов в строме роговицы

13. Динамика митотического индекса в различные сроки эксперимента в контроле (красные столбцы), при перилибальном введении (синие столбцы) и рефлексогенном воздействии (желтые столбцы) ДБА Нормализация переднего эпителия Передний эпителий представлен 1-2 слоями 3-и сутки 7-е сутки % 3-и сутки 7-сутки Высокий уровень PCNA указывает на реализацию регенеративного потенциала эпителия роговицы

14. Динамика экспрессии TGFβ-1 в различные сроки эксперимента в контроле (красные столбцы), при перилибальном введении (синие столбцы) и рефлексогенном воздействии (желтые столбцы) ДБА 3-и сутки Область введения ДБА Смещение бельма контрлатерально от ДБА % 3-и сутки 7-е сутки Патологические изменения в средних слоях собственного вещества роговицы Нормальная экспрессия TGFβ-1 в нивелирует риск помутнения роговицы

15. Изменения суммарной площади просвета капилляров области лимба в различные сроки эксперимента в контроле (красные столбцы), при перилибальном введении (синие столбцы) и рефлексогенном воздействии (желтые столбцы) ДБА Область лимба 3-и сутки 2 мкм 3-и сутки 7-е сутки Область лимба 7-е сутки Сосуды лимба обеспечивают метаболизм роговицы в условиях ее регенерации

16. Относительный показатель содержания TGFβ-1 в сетчатом слое дермы (%) Нормализация экспрессии цитокина 60 Увеличение в 1,49 раза 20 0 30-е сутки Норма 3-и сутки 7-е сутки 14-е сутки Классическая акупунктура 100 80 Увеличение в 2,64 раза 60 Увеличение в 1,84 раза Увеличение в 1,49 раза 40 Фарамакопунктура с ДБА 20 Норма 3 укола 6 уколов 9 уколов 0 40 Высокая экспрессия TGFβ-1 – признак фиброзирования

17. Суммарная площадь просвета капилляров в сетчатом слое дермы (мкм2) 200 160 500 400 120 300 80 200 40 100 0 0 3-и сутки 7-е сутки 14-е сутки 21-е сутки 30-е сутки 60-е сутки N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Классическая акупунктура Увеличение в 1,3 раза Фарамакопунктура с ДБА 72% от нормы 48% от нормы Кратность процедур В 1,5 раза выше нормы Увеличение в 3,77 раза Уменьшение суммарной площади просвета капилляров – признак фиброзирования 0 Локальный фиброз Локальный фиброз Локальный фиброз Норма 3 укола 6 уколов 9 уколов

18. Динамика коэффициента анизотропии частиц ДБА в дерме 1 сутки 100 80 7 сутки 60 40 3 сутки 20 0 14 сутки 1-е сутки 3-и сутки 7-е сутки 14-е сутки 30-е сутки 30 сутки Снижение в 2,61 раза Снижение коэффициента анизотропии отражает постепенную резорбцию ДБА макрофагами

19. применение биоматериалов Аллоплант в различных областях медицины Более 2 млн. операций в мировой медицинской практике • офтальмология • челюстно-лицевая хирургия • стоматология • сердечно-сосудистая хирургия • урология • травматология и ортопедия • гинекология • терапия • неврология • лечение ожогов • онкология • абдоминальная хирургия • торакальная хирургия • проктология • пластическая и эстетическая хирургия • эндоскопическое лечение ЖКТ • хирургия циррозов клиническое применение Фармакопунктурас использованием диспергированных форм (экспериментальные исследования, клинические исследования)

20. клинические примеры перелимбальное пломбирование биоматериалом Аллоплант До операции клинические примеры 1 год после операции Пациент Г., 48 летДиагноз:OU-врожденная решетчатая дистрофия роговицы

21. клинические примеры Пациент Г., 44 годаДиагноз:остеохондроз поясничного отделапозвоночника. Задние грыжи дисков на уровне L3/ L4,L4/ L5, L5/ S1 клинические примеры До лечения После лечения по окончании курса визуализируется повышение интенсивности сигнала от межпозвоночных дисков, уменьшение отека эпидуральной клетчатки

22. OS OD Vis. 0.02 (0.05 с кор.) Vis. 0.02 (0.5 с кор.) Vis. 0.02 (0.1с кор.) Vis. 0.03 (0.5 с корр.) клинические примеры акупунктурное введение аллоплантареваскуляризация хороидеи в комбинации с задней аутолимфосорбции и ретросклеропломбированием pre-op клинические примеры Пациент С., 26 л.(Саудовская Аравия) Ds. синдром Фогта-Коянаги-ХарадаOU: хронический увеит, осл. катаракта, оперированная глаукома миопия выс. степени, миопический астигматизм 5лет post-op отменена кортикостероидная терапия

23. клинические примеры До лечения Пациент Э., 5 летДиагноз: двусторонняя нейросенсорная тугоухость IV степени Аудиометрия Аудиальные стволовые вызванные потенциалы клинические примеры Проведен курс акупунктурного введения ДБМА по биологически активным точкам, курс биорезонансной терапии, курс электроакустической коррекции слуха После лечения Аудиальные стволовые вызванные потенциалы Игровая аудиометрия Аудиометрия

24. клинические примеры Проведен курс акупунктурного введения ДБМА по биологически активным точкам клинические примеры До лечения Пациентка Х., 40 летДиагноз: вульгарный бляшечный псориаз, стационарная стадия, смешанная форма После лечения

25. клинические примеры После лечения клинические примеры До лечения Проведен курс акупунктурного введения ДБМА по биологически активным точкам Пациентка С., 45 летДиагноз: вульгарный бляшечный псориаз, стационарная стадия, смешанная форма

26. клинические примеры Проведен курс акупунктурного введения ДБМА по биологически активным точкам клинические примеры Пациентка Т., 35 летДиагноз: вульгарный бляшечный псориаз До лечения После лечения

27. клинические примеры Пациентка Х., 48 лет. Диагноз: Остеохондроз шейного отдела позвоночника с синдромом цервикобрахиалгии, корешковым синдромом С7, С8.При стимуляционной ЭНМГ выявлены признаки корешкового поражения на уровне С7, С8, Т1 справа и слева с нарушением функции локтевого нерва, слева – с признаками нарушения срединного нерва клинические примеры До лечения: нарушение функции локтевого нерва Проведено 2 курса акупунктурного введения ДБМАпо биологически активным точкам После лечения:полный регресс чувствительныхи трофических нарушений

28. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Первый раздел работы Акупунктурное введение диспергированного биоматериала Аллоплант не приводит к локальному фиброзу, что проявляется нормализацией уровня TGF β1и увеличением суммарной площади просвета капилляров Второй раздел работы Перилимбальное и акупунктурное введение биоматериала Аллоплант стимулирует репаративные процессы в эпителии и соединительной ткани, что продемонстрировано на модели ожога роговицы с исследованием факторов TGFβ-1, PCNA, оптической анизотропии КВ и плотности капилляров области лимба Клиническое внедрение Акупунктурное введение биоматериала Аллоплант показано в восстановительном лечении и реабилитации пациентов с поражениями роговицы, что доказано результатами клинических исследований

29. Благодарю за внимание!