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实验二十三 运动对尿液、血细胞指标的影响

实验二十三 运动对尿液、血细胞指标的影响. 1. 实验目的. 1 实验目的. ⑴ 通过实验使学生掌握测试尿液和血细胞相关指标的原理、方法及在运动实践中的应用和意义，为体育教学和运动训练提供指导； ⑵ 熟练和掌握优利特 Uritest—200A 型尿液分析仪和 BC-3000 全自动血细胞分析仪的操作方法； ⑶ 根据拟定的实验内容与指标，查找国内外近十年有关运动训练中的尿液和血细胞指标的文献资料，讨论拟定运动实验对象的训练方案：运动方式、运动强度与时间等（包括学会训练实验动物）；.

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实验二十三 运动对尿液、血细胞指标的影响

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  1. 实验二十三 运动对尿液、血细胞指标的影响

  2. 1.实验目的 1 实验目的 ⑴ 通过实验使学生掌握测试尿液和血细胞相关指标的原理、方法及在运动实践中的应用和意义，为体育教学和运动训练提供指导； ⑵ 熟练和掌握优利特Uritest—200A型尿液分析仪和BC-3000全自动血细胞分析仪的操作方法； ⑶ 根据拟定的实验内容与指标，查找国内外近十年有关运动训练中的尿液和血细胞指标的文献资料，讨论拟定运动实验对象的训练方案：运动方式、运动强度与时间等（包括学会训练实验动物）；

  3. ⑷通过设计型实验的设计与研究过程，提高学生的学习兴趣，培养自由组合大学生科研与创新团队，形成强烈团结精神和学习严谨的科研态度。培养学生查阅文献资料、独立思考、创新思维、动手操作、分析问题和解决问题的能力，使学生基本掌握从事一般科学研究的方法。⑷通过设计型实验的设计与研究过程，提高学生的学习兴趣，培养自由组合大学生科研与创新团队，形成强烈团结精神和学习严谨的科研态度。培养学生查阅文献资料、独立思考、创新思维、动手操作、分析问题和解决问题的能力，使学生基本掌握从事一般科学研究的方法。

  4. 2 实验原理⑴ 优利特Uritest—200A型尿液分析仪测试尿液指标的原理 通过一次性负定量负荷，了解负荷前后的尿液指标和血细胞指标的变化。 ⑴ 优利特Uritest—200A型尿液分析仪测试尿液指标的原理 优利特Uritest—200A型尿液分析仪（以下简称“本仪器”或“仪器”）是根据双波长反射原理制成的分析仪器。用本仪器配合优利特Uritest A系列尿液分析仪专用试纸条可以方便、准确、快速地测出人体尿液中pH值、亚硝酸盐、葡萄糖、蛋白质、隐血、酮体、胆红素、尿胆原、尿比重、白细胞、维生素C等11个项目的指标。本仪器只能使用优利特Uritest A系列尿液分析仪专用试纸条才能保证其测量的精度。把浸了尿液的试纸条放入仪器的传送带槽内，传送带将试纸条传送到球面积分仪（简称积分球）下面进行扫描，在60秒钟的反应时间内，各个项目（空白块不参加反应，只作为标准参考用）的试纸块由于化学反应而呈现颜色变化，并吸收照射的单色光，测定每种试纸反射光的光量值与空白块的反射光量进行比较，通过计算机运算求出反射率并换算成浓度值，便可由仪器直接打印出半定量的等级符号和浓度的表示值。

  5. ⑵ BC-3000三分类血细胞仪测试血细胞指标的原理 ⑵ BC-3000三分类血细胞仪测试血细胞指标的原理 把用等渗电解质溶液（被称为稀释液）稀释的细胞悬液倒入一个不导电的容器中，将小孔管插到细胞悬液中。小孔管是电阻抗法细胞计数的一个重要的组成部分，其内侧充满了稀释液，并有一个内电极，外侧细胞悬液中有一个外电极。检测期间，当电流以接通通后，位于小孔两侧的电极产生稳定的电流。稀释液通过小孔孔管壁上固有的小孔（直径一般<100μm.厚度为75μm左右）向小孔内部流动。因为小孔这壁充满了具有专导性的液体，其电子脉冲是稳定的。

  6. 如果供给电流I和阻抗Z是稳定的，根据欧姆定期律通过小孔的电压E也是不变的（这时E=IZ）。当有一个细胞通过小孔时，由于细胞的导电性质比稀释液要低，在电路中小孔感应区内的电阻的增加，于瞬间能上能下起了电压变化而出现一个脉冲信号，自然数为通过脉冲。电压增加的变化的程度取决于非传导的细胞占据小孔感应区的体积，即细胞体积越大，引起的脉冲越，产生的脉冲振幅越高，脉冲信号经过下列步骤，得出细胞计数结果。利用BC-3000全自动三分类血细胞仪测定血细胞参数：红细胞数（RBC）、血红蛋白（HGB）和红细胞压积（HCT）、平均血红蛋白含量（MCH）、平均血球体积（MCV）、平均血球血红蛋白含量（MCHC）、白细胞数（WBC）、淋巴细胞数（Lymph）、中间细胞数（Mid）、中性粒细胞（Gran）、血小板数（FLT）、血小板分布宽度（PDW）和平均血小板体积MPV (fl)。

  7. 3 实验器材与试剂 3 实验器材与试剂 ⑴ 尿液指标的测试：优利特Uritest—200A型尿液分析仪、优利特Uritest A系列尿液分析仪专用试纸； ⑵ 血细胞相关指标的测试：BC-3000全自动血细胞分析仪、1.5ml离心管、采血针、吸液球、吸血管、移液枪；血液细胞分析仪用溶血剂（V-28CFL无氰溶血剂）、肝素抗凝剂、生理盐水。

  8. 4 实验方法与步骤⑴ 尿液指标的测试 4 实验方法与步骤 • ⑴ 尿液指标的测试 • ① 接通电源，打开位于一起后方的开关，使仪器进入待测状态。 • ② 在仪器进入待测状态后按开始键，此时仪器显示以下信息： • 准备好试纸→听到蜂鸣声→浸入尿样之中→鸣声止后取出→在滤纸上滤干→置于试纸槽中 • ③ 按上述提示，将试纸完全浸没于尿样之中，待鸣声止后，浸过尿样的试纸吸干残液后放入试纸槽内，即可进行尿液分析。

  9. ⑵ 血细胞相关指标的测试 • ⑵ 血细胞相关指标的测试 • 利用BC-3000全自动三分类血细胞仪测定血细胞参数：红细胞数（RBC）、血红蛋白（HGB）和红细胞压积（HCT）、平均血红蛋白含量（MCH）、平均血球体积（MCV）、平均血球血红蛋白含量（MCHC）、白细胞数（WBC）、淋巴细胞数（Lymph）、中间细胞数（Mid）、中性粒细胞（Gran）、血小板数（FLT）、血小板分布宽度（PDW）和平均血小板体积MPV (fl)。

  10. ① 开机前的准备：检查试剂是否足量，有无浑浊变质，试剂管道有无扭结，倒空废液瓶。 ② 开机：按下机器后部的开关键，约一分钟后出现计数界面。 ③ 本底检查：按“开始”键，机器计数本底。本底结果要求WBC≤0.3 RBC≤0.03 HGB≤1 PLT≤10

  11. ④ 测量 • 全血测量：按“菜单”选择“模式”项，将模式设置为“全血”。用EDTA二钾作抗凝剂取凝血标本（EDTA二钾用量为1.5－2.2mg/ml血）。混匀抗凝血，让采样针插入抗凝血。按“开始”键测量样本。 • 末梢血测量：按“菜单”选择“模式”项，将模式设置为“预稀释”。按“稀释液”，按“开始”键，自采样针下取1.6ml稀释液。将毛细吸管采取20μl末梢血标本迅速注入1.6ml稀释液杯中，制成稀释血样（注意针刺得要深，用不起毛的纸巾拭去第一滴血）制好稀释血样要摇匀（用拇指及食指捏住杯上部，用腕部旋转约一分钟左右，注意不要剧烈震荡，否则有可能计数不准），放置5分钟后，再摇匀。将稀释血样放于采样针下，按“开始”键计数。

  12. ⑤ 打印报告单。 ⑥ 关机：每天测试完毕一定要用E-Z液执行“关机”程序。等约一分钟后，屏幕提示可以关闭电源后关掉主机电源。

  13. 5 实验参考方案 主要包括在教师的指导下准备实验，实验对象的选择（不同项目运动员），确定检测指标，确定运动训练方式、强度和持续时间，选择取样时间，确定实验方法与步骤，对实验结果进行分析与讨论，写出实验报告或小论文等。

  14. ⑴ 实验内容⑵ 实验对象⑶ 实验方案⑷ 实验方法与步骤 ⑴ 实验内容：观察运动前后的尿11项和血细胞（三分类）相关指标的变化。 ⑵ 实验对象：为学生5-10名。 ⑶ 实验方案：运动模型的建立，采用功率自行车进行一次有氧运动训练，持续运动30分钟，运动强度为最大吸氧量的85~95％。 ⑷ 实验方法与步骤：在运动前和运动后即刻采集受试对象的尿液和血液，采用优利特Uritest—200A型尿液分析仪和BC-3000全自动血细胞分析仪进行指标的定量，具体操作仪器的步骤前已叙述。

  15. ⑸ 实验报告（实验结果与分析）内容①实验结果 ⑸ 实验报告（实验结果与分析）内容 ①实验结果： • 尿液指标方面，运动后排除尿蛋白平均为0.089g，及尿糖显著升高到0.3g，与运动前比较两者差异都具有统计学意义（P<0.05） • 血细胞指标方面，运动后红细胞数(RBC)和血红蛋白(HGB)下降，与运动前比较两者差异无统计学意义（P>0.05）。

  16. ② 实验结果分析 ② 实验结果分析： • 关于尿液指标。由于运动而使尿中蛋白质量增多的现象称为运动性蛋白尿。运动后尿蛋白可以作为评定运动员运动负荷强度和量度、身体机能状态及对训练负荷适应情况的指标。运动性蛋白尿在运动后能迅速地自行复原，不同于病理性蛋白尿。在评定运动负荷时，运动强度越大，尿蛋白生成量越多。正常人尿中葡萄糖含量极微，尿糖呈阴性反应。但在剧烈运动以后，尿中常出现葡萄糖，呈阳性反应。运动后尿中出现糖，其原因可能是运动时，肾上腺分泌增加，血糖上升，当升高超过肾糖阈时（160mg/100ml），尿中出现葡萄糖，运动时，也可能由于肾脏缺血，缺氧，肾功能下降，影响原尿中葡萄糖的重吸收而出现运动性糖尿。 • 关于血细胞指标。由于激烈运动，体内的血液流动加快，红细胞在血管内的流动过程中碰撞、挤压，导致红细胞破坏增加，反映出RBC和HGB减少。也可能由于运动负荷的强度和量均大，细胞内氧合血红蛋白的自动氧化速率增加

  17. 6 注意事项⑴ 采用优利特Uritest—200A型尿液分析仪测试尿液指标时 6 注意事项 ⑴ 采用优利特Uritest—200A型尿液分析仪测试尿液指标时 ① 使用干净的取样杯； ② 采集新鲜的尿液，并且中段尿，不必稀释或浓缩； ③ 试纸条浸入尿液的时间为2秒，所有的试纸块应全部浸入尿样中； ④ 放试纸时应将试纸槽的突出齿对准试纸块的间隙；

  18. ⑵ 采用三分类血细胞仪测试血细胞指标时 ⑵ 采用三分类血细胞仪测试血细胞指标时 ① 环境防尘；室内温度15－35℃，应配空调；电源要求稳定，一定要配稳压器，最好配UPS(500W)；电源线应有良好接地，零地电压部大于0.5V； ② 外接配置的废液桶必须放在低于仪器的水平面上；溶血素桶应和仪器放置在同一水平面上； ③ 血样应尽可能新鲜，否则所策数据将不准确； ④ 每2个月用蒸馏水清晰溶血素瓶及瓶盖组件，注意防止污染；每个星期请用探头清洗执行一次“探头清洗液浸泡”；如果24小时不关机，请在1天内做一次E－Z液浸泡。

  19. 7参考文献 7 参考文献 ⑴ 运动生物化学.许豪文等编. 北京：高等教育出版社，1998年5月第1版 ⑵ 运动生物化学.冯美云主编. 北京：人民体育出版社，1999年6月第1版 ⑶ 运动员机能评定—常用生理生化指标测试方法及应用.冯连世,李开刚主编.北京：人民体育出版社，2002年11月第1版

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