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HEMATOLOGÍA Aspectos Microscópicos

HEMATOLOGÍA Aspectos Microscópicos. HEMATOLOGÍA. La exploración de los elementos presentes en la sangre perisférica, sus precursores y algunos de sus productos constituyen la hematología

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HEMATOLOGÍA Aspectos Microscópicos

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Presentation Transcript

  1. HEMATOLOGÍAAspectos Microscópicos FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  2. HEMATOLOGÍA • La exploración de los elementos presentes en la sangre perisférica, sus precursores y algunos de sus productos constituyen la hematología • La sangre esta formada por un líquido de composición compleja y variable, que es el plasma que contiene eritrocitos, leucocitos y plaquetas en suspensión. • El plasma sanguineo y las células de la sangre forman el volúmen sanguíneo o la volemia que circula por los vasos sanguineos FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  3. HEMOGRAMA • El Hemograma es el exámen clínico de laboratorio, determinado por el análisis del Hematocrito (Hto), Hemoglobina (Hb), Recuento de G. Blancos o leucocitos, Fórmula Leucocitaria y sus observaciones morfológicas. • El profesional médico competente en el estudio del diagnóstico y tratamiento en patologías hematológicas y de hemostasia es el Hematólogo. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  4. HEMATOPOYESIS FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  5. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  6. Visión Microscópica de la Sangre FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  7. HEMATOLOGÍA: Punción Venosa • La punción para obtener una muestra representativa de sangre para su estudio es la venopuntura. • Para evitar la hemólisis y el líquido histico de arrastre, no se deberá emplear la muestra sin sacar la aguja y se deberá desechar la primer gota antes de hacer el frotis. • El EDTA como anticoagulante (concentración de 1 a 2 mgr/ ml de sangre), es aceptable para para el frotis o extensiones sanguíneas en porta hasta 3 horas después de la extracción y hasta 24 horas en heladera. • El citrato trisódico al 3,8 % y de dilución aprox. en 1/9 con sangre, es satisfactorio para coagulación. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  8. Muestra Sanguínea por Punción de Dedo • Limpiar la yema del dedo con una gota de alcohol a 70 grados y hacer una punción para conseguir una gota de sangre. • Depositar la gota de sangre, en un lado y en el centro de un porta bien limpio. • Seguidamente, con el empleo de un porta de borde esmerilado se hace un frotis o extensión de sangre. El porta con el que se hace la extensión debe deslizarse bien colocado y lo más perfectamente aplicado en su borde contra el otro porta sobre el que se hace la extensión. Sólo debe pasarse una vez, de forma continua e ininterrumpida. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  9. Realización de las extensiones de sangre periférica La extensión sanguínea es de gran importancia en algunas enfermedades hematológicas, ya que su diagnóstico puede realizarse o sospecharse sólo con observar la morfología de las células de la sangre. Uno de los métodos más empleados para la realización del frotis sanguíneo es el método de los dos portaobjetos. Consiste en la extensión de una gota de sangre sobre un portaobjetos mediante otro portaobjetos. La técnica es la siguiente: • Depositar una pequeña gota de sangre en el extremo de un portaobjetos. • Con el borde de otro portaobjetos a 45 grados, tocar la gota, dejar que la sangre se distribuya por capilaridad y después deslizar suavemente un portaobjetos sobre el otro en sentido longitudinal hasta que la gota quede bien extendida sobre la superficie del primer portaobjetos. • Dejar secar el frotis. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  10. FROTIS SANGUÍNEO Cuando la extensión se realiza por este procedimiento, el frotis presenta tres zonas diferenciadas, en las que la morfología eritrocitaria puede variar y la distribución de leucocitos puede ser diferente. La zona en que inicialmente se depositó la gota (“cabeza”) es excesivamente gruesa y no puede ser valorada adecuadamente. A continuación se extiende el “cuerpo” de la extensión, que corresponde a la región intermedia del frotis y en ella existe un reparto equilibrado de las células; es la zona ideal para la observación microscópica. Por último, al final de la extensión, se encuentran las “barbas” o la “cola”, es una zona fina dónde las células adoptan una disposición de cordones FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  11. FROTIS SANGUÍNEO LECTURA en GUARDA GRIEGA FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  12. Técnica de Extensión o FrotisSanguíneo FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  13. Técnica de Extensión o FrotisSanguíneo - Es conveniente realizar dos o tres extensiones, con el fin de seleccionar para la tinción la mejor lograda. - Las extensiones o frotis deben secarse al aire lo más rápidamente posible. La desecación se facilita con movimiento en forma de abanico, nunca soplando o por calor. La rápida desecación evita la deformación de los glóbulos sanguíneos. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  14. Técnica de Tinción para Frotis • Depositar el porta con la extensión de sangre encima del soporte de tinciones y éste sobre la cubeta. • Cubrir la extensión con metanoly esperar que el alcohol se evapore si se cubrió con gotas. En caso de cubrir todo el extendido, no dejar más de 3 minutos y lavar con agua. De esta forma se consigue el fijado. • Cubrir toda la extensión con unas gotas de Giemsa puro o con una dilución de giemsa probada, (1:8 ó 1:10), evitar la desecación y dejar actuar el colorante unos cinco minutos si es giemsa pura o más minutos según la dilución que se ha elegido. (se prueba el punto exacto) • Lavar la preparación, hasta que arrastre todo el colorante. • Tomando el porta por los cantos, se seca aireando el porta, o bien al calor muy lento de la llama del mechero. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  15. Frotis: Observación Microscópica • Con débil aumento ( objetivo de 10x ó 20x) explorar la preparación para localizar la zona en la que el frotis es más perfecto. Los lugares más aptos son aquellos en los que la extensión de los glóbulos se ha conseguido en una sola capa, están bien teñidos y no se han producido precipitados de los colorantes. Cuando se observe una zona apta, pasar a aumentos más fuertes: 40x para conteo y 100x para morfología patológica o diferenciar atípicos. 2. En el campo del microscopio, se verán con un dominio predominante los glóbulos rojos, hematíes o eritrocitos , teñidos en color rojo. No tienen núcleo y son más delgados por el centro que por los bordes. Los glóbulos blancos o leucocitos de identifican fácilmente por la presencia de núcleo. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  16. Hematíes o Eritrocitos • Los eritrocitos son las células sanguíneas que contienen en su interior la hemoglobina. Esta molécula es una proteína que contiene átomos de hierro que le otorgan el color rojo a la sangre, de allí su nombre: eritro (rojo) citos (células). • Dado la forma bicóncava del eritrocito se observa en la foto un disminución del color en el centro. Cuando esta dismunución no se observa puede deberse a una alteración de la forma del glóbulo. • El número promedio de glóbulos rojos en el hombre es de 5.000.000 por mm3 de sangre. La cifra media de glóbulos blancos es de 7.000 a 8.000 por mm3. Hay por tanto un glóbulo blanco por cada 600 ó 700 glóbulos rojos. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  17. Frotis: Hematíes o Eritrocitos FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  18. Valores e Índices de la Serie Roja En la evaluación de esta serie hematológica se considera: • Hematocrito (Hto): porcentaje de la sangre que corresponde a los glóbulos rojos. • Concentración de Hemoglobina (Hb) • Volumen Corpuscular Medio (MCV): tamaño globular promedio. • Concentración de Hemoglobina Corpuscular Media (MCHC): conc. promedio de Hb del total de eritrocitos. • Hemoglobina Corpuscular Media (MCH): concentración de hemoglobina promedio en cada eritrocito • Distribución por Tamaño de los Glóbulos Rojos (RDW):es la dispersión en los tamaños de los eritrocitos. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  19. Sexo Número Eritrocitos Hematocrito Hemoglobina Hombres 4.2-5.4 x 106/mm3 42-52 % 14-17 g/dl Mujeres 3.6-5.0 x 106/mm3 36-48 % 12 - 16 g/dl Valores e Índices Hematométricos Normales VCM:82-95. VCM < 85 microcitósis y >95 macrocitósis - (Hto/ n. hematíes) HCM:26-34 pgr./célula. HCM < 26 hipocromía y < 34 hipercrómico (Hto/ número de hematíes) CHCM: 31-37 g/dl . <31 hipocromía y > 37 hipercromía ( Hb/ Hto.) RDW: 11.5-14.5 es la distribución o dispersión de los hematíes. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  20. ANEMIA: principal patología de G.R. • Los parámetros normales para los glóbulos rojos son; tamaño normocítico de 7-8 µm, color: normocrómico (coloración normal), forma: disco bicóncavo y ser anucleado. • El mejor parámetro para evaluar si la cantidad de eritrocitos es adecuada para el organismo, es la hemoglobina que lleva oxígeno a la perisferia del organismo. • La disminución de Hb también origina anemia, cuya clasificación será discutida junto con la disminución del número eritrocitario y Hto. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  21. Función de los Índices Hematométricos Los índices de los glóbulos rojos permiten diferenciar las anemias: Según tamaño: Microcíticas (MCV disminuido), Normocíticas (MCV normal) Macrocíticas (MCV aumentado). Según concentración de hemoglobina: Hipocrómica (MCH o MCHC disminuido) Normocrómica (MCH o MCHC normal). Hipercromía (MCH o MCHC aumentado) FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  22. ANEMIAS FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  23. ANEMIAS y RETICULOCITOS Para evaluar si la capacidad regenerativa de los eritrocitos por parte de la médula ósea es adecuada, existe un examen llamado recuento de reticulocitos, (V. N. 0 - 2 %) que permite distinguir anemias causadas por falla medular. • Para corregir anemias se calcula el Índice Reticulocitario (IR): Reticulocitos corregidos = % reticulocitos x (Hto del paciente/ 45). - Son hiporegenerativas con Indice Reticulocitario (IR) menor a 2. Las originadas por destrucción, se llaman regenerativas y tienen un IR mayor de 3. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  24. Tinción para Reticulocitos El azul brillante de cresilo tiñe el tramado nuclear que corresponde a cadenas de ARN del hematíe. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  25. G. Rojos: Anormalidades • Anisocitosis:amplia variación de tamaño globular, ( haypequeños y grandes: anemia ferropénica, anemia hemolítica, Anisocromía: variedad de color globular. • Microcitosis: glóbulos pequeños( ANEMIA MICROCÍTICA). • Macrocitosis: glóbulos grandes( ANEMIA MACROCÍTICA). • Hipocromía: color globular pálido( ANEMIA HIPOCRÓMICA. • Poiquilocitos: variación anormal de la forma. Son anemias más severas ( anemias ferropénicas, megaloblástica, síndrome mieloproliferativo, hemólisis, etc). • Esferocitos: células esféricas sin centro pálido, frecuentemente pequeños (microesferocitosis): esferocitosis hereditaria, anemia hemolítica autoinmune Coombs (+) y post tranfusional. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  26. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  27. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  28. Microcitos en Anemia Ferropénica FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  29. Macrocitos en Anemia Megaloblástica FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  30. Hipocromía, Anisocitosis y Reticulocitos FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  31. Patologías con Poiquilocitosis • OVALOCITOS: células ovaladas: esferocitosis hereditaria, deficiencia de fierro. • TARGET CELLS, LEPTOCITOS o Células en DIANA: glóbulos con centro y periferia oscuros y anillo claro entremedio (como disco de "tiro al blanco"): Insuficiencia hepática, talasemias. • ESQUISTOCITOSIS: glóbulos contraídos irregularmente o fragmentados: uremia, anemia hemolítica, púrpura trombocitopénico trombótico. • ACANTOSITOS: glóbulos pequeños con evaginaciones espinosas de membrana: abetalipoproteinemia. • LAGRIMA: síndrome mieloproliferativo, talasemia. • Eritrocitos NUCLEADOS: glóbulos nucleados: anemias hemolíticas, leucemias, síndrome mieloproliferativo, policitemia vera, mieloma múltiple, cualquier anemia muy severa. • Cuerpos de HOWELL - JOLLY: cuerpos oscuros dentro de los glóbulos: esplenectomizados, anemia perniciosa, talasemia. • ROULEAUX: eritrocitos agrupados uno sobre otro: mieloma múltiple, hipergammaglobulinemia, embarazo. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  32. G.R. : Otras Anormalidades FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  33. Anormalidad: Hematíes Nucleados FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  34. Anormalidad: Hematíes Nucleados FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  35. Glóbulos Blancos o Leucocitos La evaluación de esta serie hematológica considera el conteo total de los leucocitos (WBC), y diferencial en neutrófilos, basófilos, eosinófilos, monocitos, linfocitos, así como también el conteo diferencial de las series hematopoyéticas de los neutrófilos y otros de condición inmadura o atípicas FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  36. Valores Normales de Rto. de Blancos - Adultos : 4.000 - 11.000 / mm3 - Recién nacidos: 10.000 - 25.000 / mm3 - Niños de 1 año: 6.000 - 18.000 / mm3 - Niños de 4 a 7 años: 6.000 - 15.000 / mm3 - Niños de 8 a 12 años: 4.500- 13.000 / mm3 FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  37. Recuento de Blancos • Muestra: sangre anticoagulada con EDTA • Liquido de Dilución: solución 2% de Acético Glacial. Líquido de Turk u otros. • Dilución; 1 en 20 (puede ser 1:10). Ejemplo: 20ul. en 0,38 ml. • Secar bien la punta de la micropipeta antes de descargar la sangre en el liquido de dilución. • Usar objetivo y ocular de 10x • Diafragma semicerrado y condensador arriba • Contar en los 4 ó 2 cuadrantes grandes FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  38. Cámara de Recuento - NEUBAUER FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  39. Los puentes exteriores se humedecen con agua destilada y luego se coloca el cubreobjeto a suave presión desde delante sobre la cámara de conteo.  ¡Atención: Peligro de rotura del cubreobjeto!  La formación de líneas de interferencia (anillos de Newton) entre los puentes exteriores y el cubreobjeto indica que el cubreobjeto ha sido correctamente colocado. Cámara de Recuento - NEUBAUER FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  40. Técnica de conteo Para realizar el recuento se leen todos los blancos de los cuadrantes grandes. Si se leen en los 4 cuadrantes grandes, el resultado se multiplica por 50. Si se lee solo los 2 cuadrantes que estan en diagonal, se multiplica el resultado por 100. El valor obtenido es por mm3. Ej: (25+28+29+27) x 50 = 5450 por mm3 FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  41. Técnica de conteo Para que las células, que están en o cerca de las líneas de limitación, no se cuenten dos veces o se sobrepasen en el conteo, hay que atenerse a determinadas reglas. Se cuentan todas las células dentro de una zona de medición definida. También se cuentan las células (marcadas en negro), que se apoyan o tocan en las 2 caras (I), p.ej. en la línea de medida izquierda y superior. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  42. Número total de Leucocitos • 5.000 — 11.000 mm3 • Neutrófilos • 50-65 % • Segmentados • 97 % • Cayados • 1-2 x mm3 (0 - 3%) • Juveniles • 0 x mm3 • Mielocitos • 0 x mm3 • Mieloblastos • 0 x mm3 • Basófilos • 0-1 % • Eosinófilos • 1 -3 % • Monocitos • 2 - 8 % • Linfocitos • 25-40 % Valores Normales – Serie Blanca FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  43. Anormalidades de la Serie Blanca • La medición del número total de los leucocitos, (WBC), sirve para evaluar la severidad de la enfermedad. • El análisis diferencial puede ayudar a precisar el diagnóstico del paciente, asociado a la clínica que presente. Un aumento de los WBC por sobre 10.000, se llama leucocitosis, que generalmente es causada por el aumento de una serie celular. Es raro que aumenten todas las series, ( ej. Hemoconcentración). Generalmente se produce en infecciones agudas, donde el número de los leucocitos depende de la gravedad de la infección, resistencia del paciente, edad, eficiencia y reserva de la médula ósea. • La disminución de los WBC, se llama leucopenia y ocurre como consecuencia de infecciones virales, fiebre tifoidea, depresión medular por causas varias, etc. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  44. NEUTRÓFILO • Los neutrófilos son los leucocitos más importantes y numerosos, (9-14 micras), que forman la primera defensa en contra de una invasión microbiológica. Neutrofilia es el aumento del número absoluto de neutrófilos a más de 8000/mm3 o más del 70% de los leucocitos, en respuesta a una infección o a células tumorales. Neutropenia es la disminución de estas células en cantidades menores a 1800/mm3 o menores del 40% de los leucocitos. • Según la forma de su núcleo se los puede clasificar en neutrófilos en banda o cayados y en neutrófilos segmentados. Presentan divisiones de sus núcleos en lóbulos en un número que va de 3 a 5. Si es mayor el número de divisiones nucleares se habla de neutrófilos hipersegmentados. • La denominada desviación a la izquierda es la aparición en el torrente circulatorio de un gran porcentaje de células inmaduras. FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  45. NEUTRÓFILO. Aumento: 20X FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  46. NEUTRÓFILO. Aumento: 20X FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  47. Borde Lateral. Aumento: 20X FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  48. Leucocitos normalesReferencias:1- Neutrófilos Normales – 40x FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  49. NEUTRÓFILO. Aumento: 100X FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

  50. Neutrófilos en Banda o Cayado. 10x FUNDACION BARCELO, FACULTAD DE MEDICINA

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