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上饶师范学院，化学化工学院. 报告人：陈宗保 单位 ： 上饶师范学院. 有机聚合物毛细管电色谱整体柱的制备及其药物分析中的应用研究. 主要内容. 1. 研究背景. 2. 目前研究工作进展. 研究背景. 20 世纪五十年代， Mould 和 Synge 首次在簿层色谱中加入电场分离胶棉中糖类化合物. 1981 年 ,Jorgenson 和 Lukacs 的毛细管填充了 10 μm 粒径 ODS ，在电场作用下成功分离了 9- 甲基蒽和芘，获得了 31000 理论塔板数的柱效，具有重要意义。.
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上饶师范学院，化学化工学院 报告人：陈宗保 单位 ： 上饶师范学院 有机聚合物毛细管电色谱整体柱的制备及其药物分析中的应用研究
主要内容 1. 研究背景 2. 目前研究工作进展
研究背景 20世纪五十年代，Mould和Synge首次在簿层色谱中加入电场分离胶棉中糖类化合物. 1981年,Jorgenson和Lukacs的毛细管填充了10 μm 粒径ODS，在电场作用下成功分离了9-甲基蒽和芘，获得了31000 理论塔板数的柱效，具有重要意义。 20世纪90年代，毛细管填充柱制备技术获得突破，大量的液相色谱专家进入CEC研究领域，使毛细管电色谱得到快速发展。 进入21世纪，毛细管电色谱理论与柱制备技术得到篷勃发展。尤其整体柱的制备具有明显的优点，得到广泛的研究与应用。
CE CEC LC 毛细管电色谱（CEC）原理与特点 CEC结合了两者优点,具 有两者的双重作用。 高柱效，高选择性，高分离度，快速分离
1.2 毛细管电色谱整体柱的分类 • 在毛细管内，通过原位聚合或固化的方法制备得到具有多孔结构的连续棒状整体 。 材质性质 分离模式
1.4 毛细管电色谱整体柱的应用研究 生命科学分析 药物分析 环境分析 食品分析 工业分析
研究内容： 1 疏水性(LMA-co-EDMA)毛细管有机聚合物整体柱的制备及其分离性能研究 2 聚(SMA-TRIMA) 毛细管电色谱整体柱的制备及其分离核苷及嘌呤类化合物 3 亲水性毛细管电色谱整体柱的制备及其分离生物碱的研究
1.LMA-co-EDMA的制备 1.1 毛细管处理及硅烷化 图1-1 毛细管预处理的步骤 图1-2毛细管硅烷化反应示意图
1.2 制备的优化 表2-1 致孔剂含量影响整体柱的制备 表2-2 致孔剂组分间的配比影响整体柱的制备
(a) (b) (c) (d) (e) (f) 图2-3 不同反应时间制备整体柱的SEM图 (a) 2h, (b) 5h, (c)10h,(d) 12h, (e) 15h, (f) 20h
1.3 整体的性能评价 1.3.1 整体柱形貌 图2-4 最佳条件下制备的整体柱不同截面的SEM图 (a) 800, (b) 3000, (c) 5000
1.3.2 分离性能评价 1.3.2.1 电渗流 pH考查: 随着pH值从2.5升至3.0，EOF速度从0.88 mm/s增大到1.15 mm/s，当pH>3.0后，EOF速度随pH值的增大基本上保持不变 图1-3 不同比例乙腈/ pH 7.0 10 mmol/L 磷酸盐缓冲溶液(v/v)
1.3.2.2 分离机理研究 实验选择芦丁、槲皮甘、槲皮素、山柰酚四种黄酮类化合物进行分离分析，考察了各种影响分离分析的因素，对四种黄酮类化合物在整体柱上的保留行为进行探讨. 表2-3 乙腈的含量对保留因子的影响 图2-6 四种黄酮类化合物的结构式
1.4 整体柱的应用研究 1.4.1 分离条件的优化 在线富集-CEC方法测定人体尿液中三种β2激动剂, 并优化各种分离条件及在线富集方法。实验考察了乙腈比例、缓冲液的pH对三种β2激动剂分离效果的影响。 图2-8 不同乙腈含量对分析物保留的影响 图2-9 缓冲溶液pH对分离的影响
1.4.2 富集技术的优化 图2-10 三种β2激动剂的结构式 1. 沙丁胺醇，2. 丙卡特罗，3. 福莫特罗 36倍 图2-12 进样电压与进样时间对富集效果的影响 320倍 45倍 图2-11 样品基质对富集效果的影响
1.4.3 方法评价 表2-4 回归方程、相关系数、线性范围、检测限及重现性
1.4.4 实际样品分析与回收率实验 表2-5 三种β2激动剂的加标回收率 图2-13 志愿者口服沙丁胺醇药片前后尿样电色谱图（a）空白尿样(口服后0 h);（b）实际尿样(口服后2 h);
2.2 聚(SMA-co-TMPTMA)整体柱的制备与表征 整体柱最佳配比：功能单体：SMA/TMPTMA=3/2（v/v）; 致孔剂(环己醇/1,4-丁二醇/水=66.7/23.3/10)：功能单体=6/4; 引发剂(AIBN)(g)/AMPS(g)/功能单体(mL)=4.0/1.2/100(w/w/v); 图2-1 聚(SMA-co-TMPTMA)整体柱孔结构及管壁截面电镜图 图2-2 影响电渗流的因素
2.3 整体柱应用研究 图2-3 1 胞苷; 2 腺苷; 3 N6 -甲基腺苷; 4 腺嘌呤; 5 鸟嘌呤
2.3.1 核苷类化合物分离条件的优化 图2-4 进样时间对分离的影响 图2-5 有机调节剂对分离的影响 Peak: 1 adenine, 2 guanine, 3 N6- methyladenosine, 4 adenosine, 5 cytidine
图2-6 pH对分离的影响 图2-7 缓冲溶液浓度的影响 Peak: 1 adenine, 2 guanine, 3 N6- methyladenosine, 4 adenosine, 5 cytidine
图2-9 最佳色谱条件下核苷类化合物的电色谱图 CEC conditions: mobile phase, pH 5.5, 6.0 mmol/L broax buffer; applied voltage, 15 kV; sample injection, 10 kV/5 s； detection wavelength, 210 nm 图2-8 电压对分离的影响 Peak: 1 adenine, 2 guanine, 3 N6- methyladenosine, 4 adenosine, 5 cytidine
2.3.2 方法线性范围及检测限 表3-3 回归方程、相关系数、线性范围和检测限
2.3.3 空白尿样回收率实验 表3-4 核苷类化合物的回收率(n=3)
4.1整体柱制备 3.1 亲水性整体柱的制备 表4-1 致孔剂组分间的比例优化 图4-1 功能单体与交联剂的结构式
3.2 整体柱的形貌 (b) (a) (c) 图4-2 整体柱的电镜图(a)1000×; (b) 3000×;(c) 5000×
3.3 整体柱分离性能评价 3.3.1 有机相比例的影响 图4-3不同比例的有机相（40%，45%，47.5%，50%，55%）的色谱图. 1 aniline, 2 naphthylamine，3 diphenylamine，4 DMA，5 thiourea
3.3.2 pH的影响 图4-4 不同pH值（3.0，5.0，6.5，8.0，9.0）的色谱图. 1 aniline, 2 naphthylamine，3 diphenylamine，4 DMA，5 thiourea
3.3.3 运行电压的影响 图4-5 不同运行电压（5.0，10，15，20）的色谱图. 1 aniline, 2 naphthylamine，3 diphenylamine，4 DMA，5 thiourea
3.5 整体柱的应用研究 3.5.1ACN含量的影响 图4-6 五种生物碱的结构式 图4-7不同比例的有机相（70%，65%，60%，55%）的色谱图. 1 piperine; 2，nuciferine; 3 kokuline; 4berberine; 5 Tetrandrine
3.5.2 pH的选择 3.5.3 分离电压的选择 图4-9不同比例的分离电压（18，15，12，10）的色谱图. 图4-8不同比例的pH（5.5，6.8，8.5）的色谱图.
3.5.4 方法线性范围及检测限 表4-2 线性方程、相关系数、检测限及精确度
3.5.5 回收率实验 3.5.6 实际样品分析 图4-10小檗碱药片样品图 图4-11尿样品图
