临床微生物标本的采集与运送

1. 临床微生物标本的采集与运送 眉山市人民医院检验科 郭涛弦

2. 微生物检验的重要性 在医学高度发展，新的抗菌药物不断涌 现的今天，感染性疾病的发病率和病死 率仍然居高不下。主要原因之一是当代 的感染性疾病，在病原上发生了较大的 变化，形成了现代感染性疾病在病原学 上的新特点 

3. 现代感染性疾病的新特点 低免疫人群增多 未知病原,条件致病或非致病病原引起感染多 新、老病原体的耐药性明显增强

4. 微生物让人类步步为营， 我们应该追求： “准确的病原学诊断” “针对性病原学治疗” 正确的微生物标本采集和运送， 是准确的病原学诊断的前提！

5. 检验误差发生率哪个阶段最高

6. 60%以上实验误差发生在分析前 1997年，一位意大利著名检验专家就对急诊 检验误差发生的种类和发生率进行了统计。结果 显示，约有68.2%的检验误差发生在检验前 期，而来自于检验中期和检验后期的误差率分别 为13.3%和18.5%。 2007年，这位检验专家又进行了类似统计， 结果显示，检验前期的误差发生率仍高达 61.9%。

7. 获得准确结果的重要环节 分析前质量控制

8. 基本原则 1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂 6.送检标本应注明来源和检验目的

9. 如何提高细菌阳性检出率？  标本采集时机  标本采集方法  标本的质与量  标本的运送与保存  镜检筛选合格标本（退检制度）  高质量、多种分离培养基  培养环境

10. 常见不合格标本主要有以下问 题： 标本采集时间错误 容器错误 标本量不足 标本采集延误 标本未及时正确运送 以及暂存条件错误。 。。。。。。    

11. 最有价值的细菌学检测项目 血液培养 脑脊液培养 胆汁培养 胸腹水培养 关节液 其他无菌体液或分泌液      

12. 血培养标本 采集与运送

14. 血培养概念: 采集患者的血液或无菌体液标本,送至微生物 实验室培养检测. 检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存 在. 如有细菌,则极有可能为致病的细菌. 进一步进行鉴定/药敏试验.    

15. 完整的血培养过程  医师开出医嘱  护理人员收集送检样本  实验室检测、分离并鉴定导致血流感 染的微生物  三级报告：为临床医生提供抗菌药物 敏感性试验结果

16. 目前血培养的问题： 采血时机不合适 采血套数不够 采血量不足 只做需氧培养，不同时做厌氧培养 采血前或采血时正在使用抗生素治疗     

17. 血流感染与血培养 的规范实践

18. ————关于血培养指征 “只有在发热时，才需要进行血培养。” 想 采 就 采

19. 答 案：血培养的指征 当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养 怀疑患者有血流感染的症状有：  不明原因的发烧(＞38℃)或体温过低(＜36℃)   白细胞增多（ ＞10,000/ul），粒细胞减少 （ ＜1,000ul） 休克，寒颤，僵直    严重的局部感染(脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂 肾炎，腹部术后感染，…) 心率异常加快 低血压或高血压  

20. ———关于采血时机 “何时采血进行血培养，无特殊时间要求。”

21. 血培养采血时机 体温 细菌浓度 30 时间 (分钟) 60 0

22. 答 案：采集血培养样本的最佳时间 尽可能在患者寒战或开始发热时 采血 在患者接受抗生素治疗前采血 如患者已经应用抗菌药物进行治 疗，应在下一次用药之前采血培 养

23. ———关于采血套数及部位 “为减轻患者痛苦，只从一个 穿刺部位采一份血液标本即可。”

24. 基本概念  成人“一套” 血培养应该包括需氧瓶和 厌氧瓶各一个，也叫“一份”  注意：一次穿刺采血，算“一套”，采 集第二套应从另一个穿刺点获得。  儿童一般只做需氧培养，但仍需从多 个部位采集多次。特殊患者才考虑厌 氧培养。

25. 采血套数

26. 表皮葡萄球菌的临床意义 采集1套无法判 断是病原菌还 阳性套数 采集套数 临床意义 污染可能 无法确认 ％ ％ ％ 是污染菌。 1 1 2 1 2 3 1 2 2 3 3 3 0 2 60 0 75 100 97 95 3 100 0 0 3 3 37 0 25 0 2－3套血培养，有助于污染的判断。 Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333

27. 答 案 ：关于血培养套数与采血部位  每位患者每次采血最少2套，3套更好  初发患者，绝不能只采1套标本 多个穿刺部位采血。因多部位同时发 生污染的几率较小，便于对结果进判断 

28. ——— 关于采血间隔 “两套血培养采集间隔无特殊要求。”

29. 答案：关于标本采集间隔时间 对于非持续性菌血症，同时或短时间内采集2－ 3 套血培养，因为体内巨噬细胞吞噬系统会在 15～30min内清除掉进入人体内的细菌。 可疑急性心内膜炎患者要立即取血作血培养， 30分钟内完成3套血培养的采集，采集后立即进 行 抗 菌 药 的 经 验 治 疗 。 如 果 24 小 时 内 报 告 阴 性，则继续采集2套血培养。 可疑的亚急性心内膜炎患者每间隔30分钟至1h 采集1套，连续采集3套标本。如果24小时内报 告阴性，则继续采集2套血培养。   

30. ——— 关于采血量 “每瓶采集多少血液无特殊要求。”

31. 采血量(ml)与检出率的关系 100 90 80 70 60 % Relative Yield 50 40 30 20 10 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 ml Overall 血培养物每增加一毫升，真性菌血症 成年人微生物的检出率增加3％ 但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培 养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质 （补体、抗体、抗生素）。所以血液与肉汤的最佳比例

32. 答 案：关于采集血液量 采血量是影响灵敏度最关键因素 成人一份标本 2 个培养瓶（需氧＋厌 氧），每瓶8－10ml，共20ml；要求 至少采两份标本，即40ml。 儿童一般只需采集需氧瓶，在保证采集血 量＜1％总血量下，一般为1－3ml 采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床 90％以上的感染为需氧菌或兼性需氧菌 感染    

33. ———关于各种血液标本的 采集顺序 先采生化、凝血标本，再采血培养标本。”

34. 答案：采各种血液标本的先后顺序  血培养对无菌操作的要求比注射、采集 生化、凝血等其它标本要高。  所以要最先采集血培养标本。  污染率的指标是 < 3% （100份标本里只能有不到3个标本出现 污染。）

35. ———关于皮肤及培养瓶 消毒 “消毒的重点是足够量的消毒 剂。”

36. 皮肤消毒程序： • 推荐使用碘町、洗必泰或碘 伏作为皮肤消毒剂。 • 碘町作用1min • 碘伏作用1.5-2min • 洗必泰作用时间与碘町一样 （但不能用于少于2个月婴儿 皮肤消毒）

37. 培养瓶的消毒程序： 1.去掉培养瓶口的塑料瓶盖。 2.75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60 秒。 3.自然待干。 4.将标本注入培养瓶内。 5. 颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液 凝集。

38. ———关于培养瓶的储存 温度 “培养瓶未使用时，需要冷藏或冷 冻。”

39. 答案：关于未用培养瓶的储 存温度 不需冷藏，更不能冷冻。保 存在15－25℃的室温即可，温 度过低会导致对温度敏感的耐 瑟氏菌等死亡。

40. ———关于夜班血培养的 送检 “加入标本后的培养瓶夜班未能及时送到检 验科，可以冷藏或放入35℃的温箱。”

41. 答案：关于夜班血培养的送检 培养瓶夜班未能及时送到检验科， 存在室温即可，不能冷藏也不能放入35 ℃的温箱 。过夜不会对检测造成影响， 但仍需尽快送检。冷藏可能导致对温度 敏感的耐瑟氏菌等死亡。温箱会导致细 菌进入生长对数期，从而错过检测的最 佳时期。

42. ———关于采血部位 “患者静脉中插有导管，可直接从 导管采血。”

43. 答案：关于从静脉留置装置直接采血 不可以，常规血培养不宜从 静脉导管或静脉留置装置中采集 ，检出污染或定植菌的可能性较 大。除非怀疑导管相关性血流感 染，请参照导管相关性血流感染 的采血方法。

44. 血培养标本的拒收  瓶子上帖的标签错误或未帖标签。  血培养瓶打破的、损坏的或渗漏。  血液凝固。

45. 上呼吸道标本

46. 上呼吸道感染： 绝大部分呼吸道感染局限于口咽、鼻咽和 鼻腔部位； 导致   咽痛、鼻涕、常常会发热。感染喉部、中耳、 鼻窦炎、结膜炎或角膜炎。  可能与严重疾病百日咳、流行性感冒、麻 疹和传染性单核细胞增多症并存。 

48. 不同的采样拭子 对标本的检测结果有影响吗?

49. 棉+木棍 抑菌区域的产生 由于棉中所含的 脂肪酸以及从木 棒中渗出的树脂 和甲醛。

50. 咽拭子运送培养基 可以运送需氧、厌氧、苛养菌 4℃或RT 24或48小时    建议用于病原菌培养而不是涂片的标本送 检。