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分 子 生 物 学 实 验

分 子 生 物 学 实 验. 分子生物学实验综合规程 分子生物学实验常用仪器设备 分子生物学基本技术 实验准备. 分子生物学实验综合规程. 上课时间提前 5 分钟进入实验室；不迟到、不早退，无故旷课累计 3 次没成绩； 请假须医院病假条或班主任签字的假条； 上课时需穿实验服，不许在实验室内吃东西，不背着书包做实验，不穿拖鞋进实验室； 实验课期间不许打闹、闲聊等，不大声喧哗，保持课堂纪律， 实验过程中，至始至终需全组同学一起完成，任何人中途不得缺席。 必须做到课前认真预习，课间做好实验记录、课后详细总结实验结果并按时提交实验报告；.

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分 子 生 物 学 实 验

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Presentation Transcript

  1. 分 子 生 物 学 实 验

  2. 分子生物学实验综合规程 • 分子生物学实验常用仪器设备 • 分子生物学基本技术 • 实验准备

  3. 分子生物学实验综合规程 • 上课时间提前5分钟进入实验室；不迟到、不早退，无故旷课累计3次没成绩； • 请假须医院病假条或班主任签字的假条； • 上课时需穿实验服，不许在实验室内吃东西，不背着书包做实验，不穿拖鞋进实验室； • 实验课期间不许打闹、闲聊等，不大声喧哗，保持课堂纪律，实验过程中，至始至终需全组同学一起完成，任何人中途不得缺席。 • 必须做到课前认真预习，课间做好实验记录、课后详细总结实验结果并按时提交实验报告；

  4. 公用试剂不得污染！每次都必须用新枪头。公用台上公用试剂不得私自拿到自己实验台上；公用试剂不得污染！每次都必须用新枪头。公用台上公用试剂不得私自拿到自己实验台上； • 不得私自拿走或乱放别人的实验物品、实验产品； • 不得擅自使用实验室中非本实验仪器、试剂。 • 实验废液不随便倾倒，随时保持实验台的整洁； • 爱护实验器材，实验器材损坏必须按规定赔偿； • 实验前按仪器性能与要求，进行仪器预热； • 实验完成后检查电源插座，用完仪器后必须复位，仪器清洁干净 、摆放整齐；每组实验物品齐全，需教师验收，枪量程要归位，发现问题及时报修；

  5. 每位同学负责自己实验台面和柜体的卫生，值日生负责公用实验台、地面等处卫生；每位同学负责自己实验台面和柜体的卫生，值日生负责公用实验台、地面等处卫生； 每次轮到打扫卫生的小组，要认真做好值日工作，离开实验室须向教师声明； 同学与老师之间、同学与同学之间、实验班与实验班之间一定要互相协作配合保持公用房间卫生，注意门窗水电的安全。 遵守通用的实验室规则。 违反上述任何一条规则责任自负，并要扣分，造成损失要照价赔偿。

  6. 实 验 成 绩 实验技能 20分 实验报告 20分 实验态度 15分 实验室常识 15分 实验实施 30分

  7. 参 考 书 • 分子生物学实验教程 自编 • 分子生物学实验指导魏群 高等教育出版社 • 分子生物学实验指导 刘进元 清华大学出版社

  8. 实验一 分子生物学实验的基本知识和基本技能培训 实验二 大肠杆菌感受态细胞的制备 实验三 质粒DNA的转化 实验四 碱裂解法提取质粒DNA 实验五 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 实验六 PCR基因扩增 实 验 内 容

  9. 分子生物学实验综合规程 • 分子生物学实验常用仪器设备 • 分子生物学基本技术 4 实验准备

  10. 样品、试剂和材料等的保存 温度控制系统--冰箱：4℃、-20℃、-70℃

  11. 纯 水 器

  12. 恒温培养箱 • 细菌平板的培养

  13. 恒温空气摇床 菌体的培养

  14. 灭菌器 培养基、试剂、耗材等的灭菌

  15. PCR 仪 PCR 扩增、保温实验等

  16. 恒温水浴及微量加热器 保证实验温度的恒定

  17. 电 泳 仪 电泳时提供电压和电流

  18. 电泳槽 核酸或蛋白质的电泳定性分析时的凝胶支架

  19. 凝胶成像系统 电泳结果的定性和定量分析

  20. 紫外分析仪 电泳结果的定性分析

  21. 台式高速冷冻离心机 样品的分离

  22. 落地式高速冷冻离心机 样品的分离

  23. 分光光度计 样品的定量测定

  24. 超净工作台 提供洁净工作环境

  25. 电子天平 样品、试剂等的称量

  26. pH 计 精确的pH值测定

  27. 液体试剂的精确取量 移 液 器

  28. 制冰机

  29. 分子生物学实验综合规程 • 分子生物学实验常用仪器设备 • 分子生物学基本技术 3.1实验规范训练－仪器的操作 3.2实验规范训练－量程的选择 3.3实验规范训练－标签 3.4实验规范－实验操作 4 实验准备

  30. 3.1 实验规范训练－仪器的操作 要求：仪器在未经培训前，不得擅自使用 严格按操作规程使用仪器， 有些仪器必须有教师在场时才能使用，并由教师操作 违反规定的使用者，造成的后果由使用者承担

  31. 3.2 实验规范训练－量程的选择 天平 烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶－－不同规格

  32. 量程的选择－移液器

  33. 3.3 实验规范训练－标签 • 所用的器皿上一定要做标记 • 标签一定要贴到固定的位置 • 标签上应包括具体的名称、组别、实验班、日期

  34. 3.4 实验规范－实验操作 • 详细记录和分析实验结果并按时提交实验报告 • 实验中一定要处处用心、勤动手，多问为什么 • 仔细操作和观察 • 保留好每一步的实验样品，在确准的情况下才能当废液扔掉

  35. 分子生物学实验综合规程 • 分子生物学实验常用仪器设备 • 分子生物学基本技术 • 实验准备 4.1 清点和熟悉常用玻璃器皿、耗材等 4.2 洗涤本学期实验用玻璃器皿 4.3 配制试剂 4.4 高温灭菌

  36. 4 实验准备 4.1 清点和熟悉常用玻璃器皿、耗材等 4.1 洗涤本学期实验用玻璃器皿 4.3 配制试剂 1） 0.1 mol/L CaCl2 100 mL 2） 5 mol/L NaOH 100 mL 胶塞 3） LB液体培养基 100 mL 胰蛋白胨（typtone) 1g 酵母提取物（yeast extract) 0.5g NaCl 1g 加部分水溶解后加20μL 5 mol/L NaOH，定容到100 mL

  37. 4） 10%(w/v)SDS储液 50 mL ，室温保存 5） 1 mol/L Tris 200 mL 6） 2 mol/L HCL 100 mL 7） 0.5 mol/L EDTA 100 mL 80 mL水中加18.61g EDTA-Na2H2O，用NaOH调 pH 8（约需2g NaOH），后定容至100 mL 8） 5xTAE 1000 mL 9） 70%乙醇 500 mL 10） Amp ：100 mg/ mL 20ml，分装每管 1 mL，－200C保存

  38. 4.4 高温灭菌 • LB液体培养基 • 1.5mL离心管 2瓶/组 • 枪头/1组 ： 1mL 1盒，200uL 1盒 • 培养皿 12套/组 • 无菌水 100 mL /班 • 0.1 mol/L CaCl2

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