João Aprigio Guerra de Almeida

1. Leite humano alimento inteligente João Aprigio Guerra de Almeida Microbiota do Leite Humano Dr. Franz Novaes Instituto Fernandes Figueira.(RJ) www.paulomargotto.com.br

2. Considerações Gerais • A preocupação em reduzir a mortalidade neonatal é crescente em todos os países. • Estima-se que somente no ano 2000, quatro milhões de bebês morreram nas primeiras quatro semanas de vida, sendo três quartos destes na primeira semana. Lawnet et al, 2005

3. “Alimentação do prematuro é uma questão de vida ou morte!” Carvalho, 2007

5. Após o parto Os RNs são expostos aos microrganismos: • Muitos através dos alimentos. • No caso do leite materno os microrganismos são originários dos mamilos, ductos lactíferos, pele circulante e até das mãos. • O processo de colonização afeta a morfologia, fisiologia, e diferenciação do epitélio intestinal. Falk, et al., 2003

6. “Germ Free” • Alimento • Água

7. Colonização experimental Efeito da administração de Lactobacilos reuteri no desenvolvimento de vilosidades do íleo após 3 dias. Cortes do tecido ileal.

8. A colonização bacteriana lenta, com número limitado de espécies, tende a ser perigosa pelo fato de que o super crescimento ser um dos fatores que promovem a translocação bacteriana Logo, iniciar a alimentação do RN com o colostro de sua mãe, representa um grande benefício

9. Alterações na microbiota intestinal durante os primeiros 7 dias após o nascimento. Mitsuoka, 1996.

10. Bifidobactérias do leite humano • Inibem seletivamente microorganismos patogênicos (enterobactérias) • Metabolizam lactose produzindo ac. latico, acético, fórmico e succínico que reduzem o pH intestinal • O crescimento das bifidobactérias é estimu-lado pela presença do fator bífido, não encontrado no LV.

11. Fator Bífidus B.bifidus B.longum B.brevis B.infantis CARBOIDRATOS Lactose Oligossacarídeos-N Ácido Lático ( pH) Ácidos Graxos de Cadeia Curta

12. A microbiota da criança amamentada Componentes pré-bióticos estimulam a proliferação de bactérias benéficas como bifidobactérias e lactobacillus. Os quais baixam o pH intestinal e inibem a prolifiração de bactérias patogênicas.  A microbiota intestinal funciona como componente da barreira defensiva da mucosa intestinal.

14. Lars et al, 2003

15. Translocação No hospedeiro normal ocorre em baixos níveis e as de bactérias são mortas no trajeto ou nos linfonodos.

16. Células M Placa de Peyer Placas de Peyer Epitelio especializado asociada a Placa de Peyer Epitelio absortivo Folículos linfoides dispersos

17. Tempo de vida útil destas células sob refrigeração é de: 12 -14 horas

18. Células da Linhagem Branca Sangue (8000/mm3) Leucócitos-PMN Neutrófilos Colostro Humano (800 - 2.000/mm3) Macrófagos; PMN Linfócitos ( ± 10%) X

19. Ecologia Microbiana

20. Tipos de contaminantes Microrbianos • Bactérias • Leveduras • Fungos

21. Como as bactérias se reproduzem 1=> 2=> 4=> 8=> 16=> 32=> 64=> 128=> 256=> 512=> 1024=> 2048=> 4096

22. Temperatura de crescimento

23. Como evitar a multiplicação microbiana? Atividade de água pH Fatores Oxigênio Tempo Temperatura Nutrientes

24. Ecologia do Leite Humano Ordenhado

25. Doadora • Mesmo quando proveniente de mamas absolutamente normais o leite apresenta variado números e tipos de microrganismos. • Suas fontes de contaminação podem ser classificadas como de origem primária e secundária. • Contaminação primária (interna)

26. Contaminantes primários • HIV • HTLV-I • HTLV-II • Vírus da hepatite B • Vírus da hepatite C • Citomegalovírus

27. Contaminação secundária • Dentre as principais fontes de contaminantes exter-nos, citam-se: • pêlos, • pele, • saliva, • cabelo, etc. • Normalmente, o LHO se conserva melhor quando refrigerado, pois os contaminantes são em sua maioria são mesófilos.

28. Os microrganismos x seres humanos Obs: O S. aureus era considerado um microrganismo saprófitas, atualmente é classificação oportunista.

31. Os microrganismos da mama • Funcionam como uma barreira viva entre os ductos e o meio ambiente. • Funcionam com se fossem uma colônia microbiana que se defende de outros microrganismos por meio da produção de substâncias semelhantes às colici-nas. • Além de produzirem ácidos orgânicos de cadeias curtas.

32. Funcionários • Podem contaminar por meio de mãos sujas, tosse, espirro ou conversa sobre os utensílios com ou sem o leite. • Os microrganismos podem ser desalojados das mãos durante a ordenha. • Quanto menores as contaminações durante a coleta, melhores as características bacteriológicas do LHO.

33. Alguns Perigos

34. Manipulador com Infecção

35. Cultura do dedo infectado Agar Sangue Caldo TSB

36. Higiene Ambiental - Produtos - Pessoal

37. Higiene das mãos

39. Mãos Sujas

40. Mãos após lavagem com água e sabão

41. Mãos após anti-sepsia com álcool 70%

42. Aliança

43. Pano de Limpeza

44. Dinheiro

45. Cabelo

46. Ar de corredor movimentado

47. Paramentação adequada Gorro Protetores oculares Máscara Luvas Avental Calça comprida Sapato fechado

48. Utensílios • Um dos maiores responsáveis pela má quali-dade do leite é a falta de cuidado com os utensílios (bambas, frascos, etc). • O grande número de microrganismos obser-vado pode ser explicado por sua multiplicação. • Os utensílios mal higienizados podem aumen-tar a carga microbiana em até 30 vezes.

49. Água • Os contaminantes da água pertencem aos gêneros Pseudomonas, Achromobacter, Alcaligenes, Flavobacterium, etc. Oriundos, em sua maioria do solo. • Tais microrganismos são psicrotróficos, proteolíticos e/ou lipolíticos causando problemas no leite refrigerado. • Por isso, só se deveria empregar água tratada.

50. Outras Fontes • Em 444 moscas foram encontradas de 5,5 x 102 a 6,6 x 106 bactérias. Média 1,2 x 106 • Se todas fossem transferidas para 50 litros de leite, cada mosca acrescentaria 25 bactérias/mL. • Nomalmente as moscas são atraídas pelo material fecal, a maioria das bactérias aderidas a elas são coliformes. (Pinheiro, 2006)