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PZA

Tema propuesto: Identificación de genes potenciales relacionados con el eflujo de membrana de Mycobacterium tuberculosis utilizando herramientas bioinformáticas.

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Presentation Transcript

  1. Tema propuesto: Identificación de genes potenciales relacionados con el eflujo de membrana de Mycobacterium tuberculosis utilizando herramientas bioinformáticas Título del Proyecto: Identificación de genes homólogos a EmrB (de Escherichia coli) como genes potenciales relacionados con el flujo de salida de Ácido Pirazinóico en Micobacterium tuberculosis

  2. Introducción PZA Pirazinamida Nicotinamida

  3. Monica Pajuelo Travezaño: Prodroga Enzima PZAsa Introducción PZA • Resistencia: mutaciones en PZasa • Resistencia: sin mutaciones y con actividad intacta PZasa + H2O + NH4+

  4. Antecedentes 1. Mecanismo de acción de la PZA

  5. Antecedentes 2. Resistencia a la PZA • Mutación en PZasa • ¿Bombas de flujo de salida involucradas? • M. smegmatis: • Tiene dos PZasas activas • Frente a inhibidores de transportadores: reserpina, valinomicina, las cepas se hacen sensibles

  6. Objetivos Objetivos • Identificar genes homólogos a EmrB de E. coli relacionados con el flujo de salida de ácidos orgánicos débiles o de drogas en M. tuberculosis • Verificar que los posibles genes contribuyan con el flujo de salida de POA en M. tuberculosis

  7. Planteamiento del Experimento Uso de COG Búsqueda de genes homólogos a Emrb de E. coli Búsqueda en TubercuList Predicción de Segmentos Transmembrana Uso de TMpred Resultados Preliminares

  8. Planteamiento del Experimento Recombinación genética homóloga Knockout de genes Acumulación de POA Uso de sustrato radiactivo marcado con C14 Determinación de la sensibilidad a PZA/POA Determinación de MIC Determinación de la actividad de PZasa Método de Wayne

  9. Planteamiento del Experimento

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