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《 植物生物学 Ⅱ 实验 》. 植物生理学实验的意义. 通过实验验证理论,加深理解 动手能力的培养,观察分析能力的培养. 植物生理学实验的要求. 实验前 实验中 实验后. 本学期实验安排. 植物组织水势的测定(小液流法) 根系活力的测定( α -萘胺法) 植物叶片硝酸还原酶活性的测定 钾离子对气孔开度的影响 叶绿素含量及植物光合强度的测定 呼吸速率的测定 切花保鲜及逆境造成的生理生化变化 不同植物生长物质对水稻幼苗生长的影响 不良环境对植物细胞膜的伤害. 成绩:平时成绩 50 %+期末考试成绩 50 %
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植物生理学实验的意义 • 通过实验验证理论,加深理解 • 动手能力的培养,观察分析能力的培养
植物生理学实验的要求 • 实验前 • 实验中 • 实验后
本学期实验安排 • 植物组织水势的测定(小液流法) • 根系活力的测定(α-萘胺法) • 植物叶片硝酸还原酶活性的测定 • 钾离子对气孔开度的影响 • 叶绿素含量及植物光合强度的测定 • 呼吸速率的测定 • 切花保鲜及逆境造成的生理生化变化 • 不同植物生长物质对水稻幼苗生长的影响 • 不良环境对植物细胞膜的伤害
成绩:平时成绩50%+期末考试成绩50% (期末理论考试成绩25%+期末操作成绩25%)
【本课程实验所需器皿】 器皿 数量 器皿 数量 小剪刀 1 滴管 2 量筒100ml 1 烧杯100ml 10 具塞试管 14 250、500ml 各2 漏斗 3 研钵 2 移液管0.1ml 1 三角烧瓶100ml 5 1、2、5、10ml 各2 玻棒 2 洗耳球 2 容量瓶25或50ml 12 培养皿 3 洗瓶 1
实验一 植物组织水势的测定 (小液流法)
实验一 植物组织水势的测定(小液流法) 水势是指偏摩尔体积水的化学势,规定纯水的水势为零,水分总是从水势高处流向水势低处。
【实验目的】 掌握一种植物组织中水势的测定方法。
小液流法 【实验原理】
【器材与试剂】 • 实验仪器:试管、离心管、直角弯头的毛细吸管、镊子、打孔器 (直径0.7cm)、解剖针、移液管 • 实验试剂: 1mol/L蔗糖溶液、甲基蓝 • 实验材料: 青菜叶片
【实验步骤】 • 配制不同浓度梯度:0.1、0.2、0.3、0.4M; • 对照组: 取4只试管编号 加入20ml不同浓度的蔗糖; • 实验组:另取4个离心管编号 从对照组试管中各取4ml溶液加入对应编号的离心管中。 • 植物叶片主脉附近打孔取小圆片(Ф0.7cm) 分别加入实验组离心管中(每瓶20片) 放置35min,其间摇动数次; • 每个离心管中挑入少许甲基蓝,摇匀,使溶液呈蓝色。 • 用毛细吸管从实验组离心管中吸取少量溶液 小心插入装有相同浓度蔗糖的对照组试管的中部 缓慢从毛细吸管尖端横向放出一滴蓝色溶液,轻轻取出滴管 观察蓝色液滴的移动方向并记录。
【实验步骤】 • 7. 计算叶片细胞的水势: • ψcell=ψout=-I cRT • 式中: I —— 解离系数,蔗糖为1; • c —— 小液流在其中静止的溶液的浓度(mol/L); • R —— 摩尔气体常数,0.083×105L·Pa/mol·K • T —— 热力学温度单位K,即273+t。
【注意事项】 • 试管、移液管和毛细管等要洗净烘干,移液管与毛细移液管要各个浓度专用。如只用一支则应从低浓度到高浓度依次吸取溶液。 • 甲基蓝不宜加得过多(溶液呈稍深的蓝色即可),否则将使实验组各管中溶液的比重均加大。 • 蔗糖溶液用前一定要摇匀,时间放久了的蔗糖溶液会分层,影响结果。 • 叶片投入离心管中要快,离心管及时加盖,防止叶内或离心管中水分蒸发影响实验结果。 • 释放蓝色液滴时要缓慢,防止过急挤压冲力影响液滴移动。
【思考题】 如果小液滴在各对照溶液中全部上升(或下降),说明什么问题?应如何改进实验设置?