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标准曲线的制作与运用

标准曲线的制作与运用. —— 以“考马斯亮蓝 G-250 法测定蛋白质含量”为例 许良政 2007.5. 标准曲线的制作与运用. 一、标准蛋白质溶液的配制 实验指导： P160 具体方法： 精确称取结晶牛血清蛋白 10mg ，加水溶解并定容至 100ml ，即为 100 μ g/ml 的 标准蛋白质溶液. 标准曲线的制作与运用. 二、不同浓度梯度的标准蛋白质溶液的配制. 或 5min. 或 620nm. 标准曲线的制作与运用. 二、不同浓度梯度的标准蛋白质溶液的配制 注意： 1 、各管振荡程度尽量一致

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标准曲线的制作与运用

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Presentation Transcript

  1. 标准曲线的制作与运用 ——以“考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量”为例 许良政 2007.5

  2. 标准曲线的制作与运用 一、标准蛋白质溶液的配制 • 实验指导：P160 • 具体方法： 精确称取结晶牛血清蛋白10mg，加水溶解并定容至100ml，即为100μg/ml的标准蛋白质溶液

  3. 标准曲线的制作与运用 二、不同浓度梯度的标准蛋白质溶液的配制 或5min 或620nm

  4. 标准曲线的制作与运用 二、不同浓度梯度的标准蛋白质溶液的配制 • 注意： 1、各管振荡程度尽量一致 2、振荡后放置3～4min 3、在595或620nm处比色，记录吸光度（OD值）

  5. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （一）打开Excel

  6. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （二）进入Excel工作表状态

  7. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （三）在Excel工作表输入数据和说明文字

  8. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （四）作图：1、用鼠标选中数据

  9. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （四）作图：2、选中图表类型

  10. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （四）作图：3、点“图表类型”对话框的“下一步”，出现如下对话框

  11. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （四）作图：4、点对话框的“系列”选项

  12. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （四）作图：5、嵌入系列（图表）名称

  13. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （四）作图：6、点“下一步”操作，出现：

  14. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （四）作图：7、再点“下一步”操作，出现：

  15. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （四）作图：8、点“完成”操作，散点图在工作表中出现：

  16. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （四）作图：9、用鼠标左键选中作图点

  17. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （四）作图：10、选定作图点后，再点鼠标右键并选中“添加趋势线”：

  18. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （四）作图：11、 单击“添加趋势线”

  19. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （四）作图：12、确定

  20. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （五）求直线方程：1、选中趋势线，点鼠标右键并选中“趋势线格式”：

  21. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （五）求直线方程： 2、点“趋势线格式”，在下图的“选项”中选“显示公式”和“R的平均值”：

  22. 标准曲线的制作与运用 三、标准曲线的制作 （五）求直线方程： 3、确定 注：R2至少要达到0.999以上

  23. 标准曲线的制作与运用 四、标准曲线的运用 将所测得“吸光度”代入“直线方程”的y项，利用Excel的计算功能即可方便求出X项的“蛋白质浓度”： 换算公式：X=(Y－0.0005)/0.0075

  24. 标准曲线的制作与运用 四、标准曲线的运用 • 如何用Excel求“蛋白质浓度”

  25. 标准曲线的制作与运用 四、标准曲线的运用 • 如何用Excel求“蛋白质浓度”

  26. 标准曲线的制作与运用 四、标准曲线的运用 • 如何用Excel求“蛋白质浓度”

  27. 标准曲线的制作与运用 四、标准曲线的运用 • 如何用Excel求“蛋白质浓度”

  28. 标准曲线的制作与运用 四、标准曲线的运用 • 如何用Excel求“蛋白质浓度”

  29. 标准曲线的制作与运用 四、标准曲线的运用 • 如何用Excel求样本“蛋白质浓度”的平均值

  30. 标准曲线的制作与运用 四、标准曲线的运用 • 如何用Excel求样本“蛋白质浓度”的平均值

  31. 标准曲线的制作与运用 四、标准曲线的运用 • 如何用Excel求样本“蛋白质浓度”的平均值

  32. 标准曲线的制作与运用 四、标准曲线的运用 • 如何用Excel求样本“蛋白质浓度”的平均值

  33. 标准曲线的制作与运用 四、标准曲线的运用 • 如何用Excel求样本“蛋白质浓度”的平均值

  34. 标准曲线的制作与运用 四、标准曲线的运用 • 如何用Excel求样本“蛋白质浓度”的平均值

  35. 标准曲线的制作与运用 附：样本中“蛋白质含量”的换算

  36. 标准曲线的制作与运用 附：样本中蛋白质的提取与测定

  37. The end!

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