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GRUPO HPA. INTRODUCCIÓN. FLIA. Pasteurellaceae RECLASIFICACIÓN EN 1996 SECCIÓN XVII VOL 2 (BERGEY) GROS. Actinobacillus, Haemophilus, Pasteurella y Mannheimia. INTRODUCCIÓN. ORGANISMOS GRAM NEGATIVOS, PATÓGENOS PARA ANIMALES (mamíferos y aves) Y HOMBRE
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INTRODUCCIÓN • FLIA. Pasteurellaceae • RECLASIFICACIÓN EN 1996 • SECCIÓN XVII VOL 2 (BERGEY) • GROS. Actinobacillus, Haemophilus, Pasteurella y Mannheimia
INTRODUCCIÓN • ORGANISMOS GRAM NEGATIVOS, PATÓGENOS PARA ANIMALES (mamíferos y aves) Y HOMBRE • PROCESOS SEPTICÉMICOS Y RESPIRATORIOS • INVOLUCRADOS EN CUADROS POLIMICROBIANOS
CARACTERÍSTICAS • BACILOS DE 0,4 X 1 HASTA 6 MICRAS • INMÓVILES, NO ESPORULADOS • FINA CAPA DE “SLIME” (ADHERENCIA DE COLONIAS AL AGAR) • UTILIZAN CARBOHIDRATOS CON PRODUCCIÓN DE ÁCIDO SIN GAS
MORFOLOGÍA Y TINCIÓN A. lignieresii A. suis
CARACTERÍSTICAS • ESPECIES PRINCIPALES: A. lignieresii, A. equuli, A. suis, A. pleuropneumoniae • ORGANISMOS EXIGENTES, AEROBIOS O MICROAERÓFILOS (5% CO2) • A. pleuropneumoniae REQUIERE FACTOR V (NAD) • COLONIAS PEQUEÑAS, REDONDAS, BLANQUECINAS
CARACTERÍSTICAS • SUPERVIVENCIA LIMITADA EN AMBIENTE • SENSIBLES A ANTIBIÓTICOS DE USO FRECUENTE • COMENSALES EN MUCOSAS RESPIRATORIA Y DIGESTIVA • GRAN VARIEDAD DE HOSPEDADORES
ESTRUCTURA ANTIGÉNICA • ANTÍGENOS TERMOESTABLES (SOMÁTICOS Y CAPSULARES) Y TERMOLÁBILES (SUPERFICIE) • A. lignieresii: 6 TIPOS (TERMOESTA-BLES); A. equuli (28 GRUPOS –LPS-) • A. pleuropneumoniae (ANTÍGENOS CAPSULARES Y SOMÁTICOS)
PODER PATÓGENO • A. lignieresii: COMENSAL CAVIDAD ORAL Y FARINGE EN RUMIANTES • CAUSA: LENGUA DE MADERA, PROCESO ESPORÁDICO TIPO GRANULOMATOSO • A. pleuropneumoniae: CAUSA PLEURONEUMONÍA FIBRINO-HEMORRÁGICA EN PORCINOS
PODER PATÓGENO • TOXINAS RTX (Apx) (CITOLÍTICAS/CITOTÓXICAS). REPETICIONES DE NONAPÉPTICOS RICOS EN GLICINA • Apx1 HEMOLÍTICA Y CITOTÓXICA PARA MACRÓFAGOS Y NEUTRÓFILOS • OTROS: CÁPSULA, LPS, FIMBRIAS, SUPERÓXIDO DISMUTASA
PODER PATÓGENO • A. equuli: ENFERMEDAD DEL POTRILLO DORMILÓN • LEUCOTOXINA, TOXINA TIPO RTX • A. suis: SEPTICEMIA, ARTRITIS, NEUMONÍA EN CERDOS • TOXINAS ApxI y ApxII
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN • MUESTRAS: LESIONES GRANULOMA-TOSAS, PLEURONEUMONÍA, etc. • REMITIR EN MEDIO DE TRANSPORTE • A. lignieresii: OBSERVACIÓN DIRECTA DE GRÁNULOS: BACILOS G – MEDIOS • A. pleuropneumoniae: IHQ, IFD
AISLAMIENTO • AGAR SANGRE (BOVINO U OVINO) • ALGUNOS CRECEN EN McCONKEY • A. pleuropneumoniae: FACTOR V, AGAR CHOCOLATE • MAYOR DESARROLLO EN MICROAEROFILIA (1-3 DÍAS A 37ºC)
IDENTIFICACIÓN • COLONIAS GRISES ADHERIDAS AL AGAR • COLONIAS “BLANDAS” Y “PEGAJOSAS” (RELACIÓN CON ESTRUCTURA LPS) • A. pleuropneumoniae, equuli y suis: HEMÓLISIS (EFECTO CAMP) • REACCIONES BIOQUÍMICAS: UREASA, FERMENTACIÓN DE CARBOHIDRATOS
IDENTIFICACIÓN • A. pleuropneumoniae: SEROLOGÍA (HEMAGLUTINACIÓN INDIRECTA) • MÉTODOS MOLECULARES: REACCIÓN DE POLIMERASA EN CADENA (PCR)
CARACTERÍSTICAS • BACILOS O COCOBACILOS 1 micra DE ANCHO Y LONGITUD VARIABLE • PLEOMÓRFICOS, INMÓVILES, AERO-BIOS Y ANAEROBIOS FACULTATIVOS • FERMENTAN CARBOHIDRATOS • NECESITAN FACTORES DE LA SANGRE (CARÁCTER NO EXCLUYENTE)
HÁBITAT • COMENSALES EN APARATO RESPIRA-TORIO, BOCA, VAGINA, TRACTO G.I., MUCOSAS EN GENERAL • BAJA PERSISTENCIA EN AMBIENTE • ESPECIFIDAD DE HOSPEDADOR • H. somnus (RUMIANTES), H. parasuis (CERDOS), H. paragallinarum (AVES)
ESTRUCTURA ANTIGÉNICA • GRAN HETEROGENEIDAD • H. parasuis: ANTÍGENOS TERMOES-TABLES, 16 SEROVARES POR PRECIPITACIÓN EN GEL DE AGAR • MUCHAS CEPAS NO TIPIFICABLES
PODER PATÓGENO • CÁPSULA (H. influenzae) • LPS (H. paragallinarum, H. parasuis, H. somnus) (mortalidad en septicemias) • FACTORES DE ADHERENCIA (PILI) • PROTEÍNAS CAPTADORAS DE Fe
PODER PATÓGENO • INFECCIONES SUPURATIVAS • H. somnus: VASCULITIS TROMBÓTICA, PROCESOS NECRÓTICOS Y HEMORRÁGICOS • H. parasuis: BRONCONEUMONÍAS SECUNDARIAS, ENF. DE GLÄSSER (poliserositis) • H. paragallinarum: CORIZA INFECCIOSA
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN • GRAN LABILIDAD DE LAS MUESTRAS • AGAR CHOCOLATE (FACTORES X y V), ADICIÓN DE ANTIBIÓTICOS • INCUBACIÓN EN 10% CO2 • COLONIAS DE HASTA 2 mm DIÁMETRO LUEGO DE 48 HS, BLANCAS, AMARI-LLENTAS, HEMÓLISIS SEGÚN ESPECIE
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN • POSIBLE ENRIQUECIMIENTO PREVIO EN CALDO • IDENTIFICACIÓN POR REACCIONES BIOQUÍMICAS: indol, ureasa, catalasa, oxidasa, producción de ácido a partir de carbohidratos • PCR: H. parasuis, H. paragallinarum
INTRODUCCIÓN • REVISIÓN TAXONÓMICA DEL GÉNERO Pasteurella EN ÚLTIMAS DÉCADAS • DIVISIÓN DE ESPECIES CLÁSICAS EN SUBESPECIES Y CREACIÓN DE NUEVAS ESPECIES • CREACIÓN DEL GÉNERO Mannheimia
CARACTERÍSTICAS • BACILOS O COCOBACILOS (0,3 – 1 µm x 1 – 2 µm), GRAM NEG., AISLADOS, PARES O CORTAS CADENAS • INMÓVILES, NO ESPORULADOS, ANAE-ROBIOS FACULTATIVOS, METABOLIS-MO RESPIRATORIO Y FERMENTATIVO • OXIDASA Y CATALASA POSITIVOS
HÁBITAT • Pasteurella: MUCOSAS RESPIRATORIA Y DIGESTIVA DE MAMÍFEROS Y AVES • Mannheimia: CRIPTAS DE TONSILAS • PARTE DE MICROFLORA DE GANADO SANO
ESTRUCTURA ANTIGÉNICA • ANTÍGENOS SOMÁTICOS Y CAPSULARES • P. multocida: 5 TIPOS CAPSULARES (A, B, D, E y F) Y 16 TIPOS SOMÁTICOS • SEROVARIEDADES: COMBINACIÓN DE AMBOS ANTÍGENOS • ASOCIADAS A ENFERMEDADES ESPECÍFICAS DE ANIMALES
ESTRUCTURA ANTIGÉNICA • A:1, A:3, A:4 CÓLERA AVIAR • E:2, B:2 SEPTICEMIA HEMORRÁGICA BOVINOS Y BÚFALOS • Mannheimia haemolytica (EX P. haemolytica BIOGRUPO 1) • POCO VALOR DIFERENCIACIÓN ANTIGÉNICA
PODER PATÓGENO • P. multocida (GRUPO D) TOXINA DERMONECRÓTICA CODIFICADA POR GEN toxA • PRODUCE OSTEOLISIS DE CORNETES NASALES (RINITIS ATRÓFICA CERDO) • CÁPSULA DE ÁC. HIALURÓNICO, LPS • ACTIVIDAD HEMOLÍTICA POST TRATAMIENTO CON TWEEN 80
PODER PATÓGENO • FIMBRIAS TIPO IV: ADHESIÓN • M. haemolytica: EXOTOXINA PROTEICA (LEUCOTOXINA, Lkt), MIEMBRO DE TOXINAS RTX • MODULADORES DE LEUCOCITOS • EFECTOS DEPENDENDIENTES DE CONCENTRACIÓN DE TOXINA
PODER PATÓGENO • Lkt FORMA COMPLEJOS CON LPS in vivo REFORZANDO ACTIVIDAD • TAMBIÉN PRESENTE EN P. multocida, P. aerogenes y P. trehalosi • PROTEÍNAS RECEPTORAS DE TRANSFERRINA (tpbA y tpbB)
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN • MUESTRAS DE ÓRGANOS O DE PUS, EXUDADOS, HISOPADOS, etc. • OBSERVACIÓN DIRECTA: TINCIÓN BIPOLAR, IF, IHQ • AGAR SANGRE Y AGAR McCONKEY (DIFERENCIAR ENTRE ESPECIES)
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN • COLONIAS BLANCO GRISÁCEAS, REDONDAS, BRILLANTES, MUCOIDEAS (CÁPSULA) • COLONIAS MUCOSAS A RUGOSAS LUEGO DE SUBCULTIVO • M. haemolytica: HEMÓLISIS, CRECIMIENTO EN McCONKEY • IDENTIFICACIÓN BIOQUÍMICA