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LDL动物调理实验

LDL动物调理实验. 姓名：王洋 导师:韩润林. LDL:低密度脂蛋白 细菌：M41（A群链球菌的一种） 调理作用：调理作用（opsonization）又称调理素作用，是指抗体、补体与吞噬细胞表面结合，促进吞噬细胞吞噬细菌等颗粒性抗原的作用。 调理素：病理学中指一类能增强吞噬细胞吞噬功能的蛋白质，例如： 甘露糖结合凝集素、表面活性蛋白、免疫球蛋白等等 。. 本次实验室为了探究病原进入机体后，机体内的LDL能否增加单核巨噬细胞对病原的吞噬作用，以此来判定LDL是否具有调理作用。. 试验用小鼠：生长20天以上的SPF小鼠

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LDL动物调理实验

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Presentation Transcript

  1. LDL动物调理实验 姓名：王洋 导师:韩润林

  2. LDL:低密度脂蛋白 细菌：M41（A群链球菌的一种） 调理作用：调理作用（opsonization）又称调理素作用，是指抗体、补体与吞噬细胞表面结合，促进吞噬细胞吞噬细菌等颗粒性抗原的作用。 调理素：病理学中指一类能增强吞噬细胞吞噬功能的蛋白质，例如：甘露糖结合凝集素、表面活性蛋白、免疫球蛋白等等。

  3. 本次实验室为了探究病原进入机体后，机体内的LDL能否增加单核巨噬细胞对病原的吞噬作用，以此来判定LDL是否具有调理作用。本次实验室为了探究病原进入机体后，机体内的LDL能否增加单核巨噬细胞对病原的吞噬作用，以此来判定LDL是否具有调理作用。

  4. 试验用小鼠：生长20天以上的SPF小鼠 菌注射方法：尾静脉注射法 取血方法：断头取血 试验用培养基： BHI琼脂平板 （活化) THY液体培养基（培养） 实验结果：平板活菌计数

  5. 实验目的：因为初次进行动物实验，所以实验的目的是确定注入小鼠体内的菌的数量。 要求30min和1h之后小鼠体内剩余的菌达到注入菌数的一半左右，才具有讨论价值

  6. 实验过程 第一天下午4点将冻存的菌在BHI平板上放入二氧化碳培养箱中进行活化 第二天上午8点半将菌刮如THY培养基中进行培养，当菌液OD=0.58左右时进行试验 取1ml菌液离心，用预冷过的生理盐水洗一遍，用生理盐水稀释到需要的浓度

  7. 取6只体重大体相同的小鼠，分为1组和2组，每组各三只。将100ul菌液在小鼠尾部注入，第一组30分钟后缺血涂板。第二组1h后取血液涂板。每100ul血液涂1块平板，每只小鼠平行涂板三个。（因为不采用抗凝剂进行抗凝，所以去血液后要立刻进行涂板。注射和采血的过程比较熬费时间，所以必须计划好操作时间，以免影响实验）

  8. 将涂好的平板放入二氧化碳恒温培养箱中进行过夜培养，第二天数板，记录每组实验的数据。根据平板上的菌的数量可以推算出小鼠体内剩余的菌的数量。

  9. 由于前几次实验经验不足，所以每次实验过后，平板上基本都没有剩下菌落，实验结果并不是很好，所以实验没有讨论的意义。再次进行实验时要继续增加注入的菌的数量。 数板时要注意菌落是不是链球菌，因为可能出现杂菌的污染，长出其他菌类的菌落，所以在经验判断的同时要做片子在显微镜下观察。

  10. 实验存在的问题： 1 菌（M41）的致病机理需要进行了解。 2 小白鼠体内单核巨噬细胞所占的比例。 3 病原进入小鼠体内被单核巨噬细胞识别的过程和时间等等。

  11. 谢谢

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