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芦蒿提取物抗氧化活性

芦蒿提取物抗氧化活性. 贾晓斌 博士 研究员 jxiaobin2005@hotmail.com 江苏省中医药研究院 现代中药复方创新制剂研究室. 一 、 研究背景. 芦蒿 ( Artemisia selengensis Turcz .) 为菊科蒿属植物，又名蒌蒿、藜蒿、柳蒿、香艾蒿、狭叶艾等。 多年生草本植物，全国各地均有野生分布。 古代的医药典籍 《 神农本草经 》 将蒌蒿列为 “ 上品 , 甘、平、无毒 ” 。 《 本草纲目 》 中记载其具有 “ 补中益气，利膈开胃，疗心悬，久服轻身，耳目聪明，长毛发令黑 ” 等功效。.

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芦蒿提取物抗氧化活性

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Presentation Transcript

  1. 芦蒿提取物抗氧化活性 贾晓斌 博士研究员 jxiaobin2005@hotmail.com 江苏省中医药研究院 现代中药复方创新制剂研究室

  2. 一 、研究背景 芦蒿(Artemisia selengensis Turcz .) 为菊科蒿属植物，又名蒌蒿、藜蒿、柳蒿、香艾蒿、狭叶艾等。 多年生草本植物，全国各地均有野生分布。 古代的医药典籍《神农本草经》将蒌蒿列为“上品,甘、平、无毒”。 《本草纲目》中记载其具有“补中益气，利膈开胃，疗心悬，久服轻身，耳目聪明，长毛发令黑”等功效。

  3. 芦蒿不仅有很高的食用价值，同时含有较高的营养价值，含有许多维生素和钙、磷、铁、锌等多种矿物质元素，其性凉、清热解毒，具清凉、平抑肝火、祛风湿、消炎、镇咳等功效。芦蒿不仅有很高的食用价值，同时含有较高的营养价值，含有许多维生素和钙、磷、铁、锌等多种矿物质元素，其性凉、清热解毒，具清凉、平抑肝火、祛风湿、消炎、镇咳等功效。 含有侧柏莲酮芳香油（C10H10O）而具有独特风味。其中抗癌微量元素硒是公认抗癌植物芦荟的十倍。另外，它对降血压、降血脂、缓解心血管疾病均有较好的食疗作用，是一种典型的保健蔬菜。

  4. 目前国内外对芦蒿产品的开发仅限于芦蒿干、芦蒿酒、芦蒿茶等粗制剂。通过我们前期的实验可知，芦蒿中含有多种活性成分：有机酸、黄酮、生物碱、酚类、挥发油等成分，芦蒿中的总酚类、黄酮具有很强的抗氧化活性，目前还未发现芦蒿抗氧化产品的报道，为充分开发利用芦蒿资源，将其开发成营养丰富、保健性强的抗氧化保健食品，本文研究了芦蒿提取物体内、外抗氧化活性大小，以及抗氧化活性与总酚、总黄酮含量的关系。目前国内外对芦蒿产品的开发仅限于芦蒿干、芦蒿酒、芦蒿茶等粗制剂。通过我们前期的实验可知，芦蒿中含有多种活性成分：有机酸、黄酮、生物碱、酚类、挥发油等成分，芦蒿中的总酚类、黄酮具有很强的抗氧化活性，目前还未发现芦蒿抗氧化产品的报道，为充分开发利用芦蒿资源，将其开发成营养丰富、保健性强的抗氧化保健食品，本文研究了芦蒿提取物体内、外抗氧化活性大小，以及抗氧化活性与总酚、总黄酮含量的关系。

  5. ABTS法 二、芦蒿不同提取物 FRAP法 体外抗氧化方法 DPPH法

  6. 1.芦蒿的提取 (1)芦蒿水提及不同溶剂萃取 芦蒿粉碎物 10倍量水提 2次，每次1.5h 合并提取液 浓缩 浓缩液 石油醚、乙酸乙酯、正丁醇 等体积萃取四次 浸膏 萃取液 减压干燥 减压干燥 芦蒿水提物 芦蒿水提各萃取部位

  7. (2)芦蒿70％乙醇提取 10倍量70%乙醇提2次 芦蒿粉碎物每次1.5h 合并提取液 浓缩 浸膏 减压干燥 芦蒿70%乙醇提取物 (3)芦蒿95％乙醇提取 10倍量95%乙醇提2次 芦蒿粉碎物每次1.5h 合并提取液 浓缩 浸膏 减压干燥 芦蒿95%乙醇提取物

  8. 2. ABTS法测定芦蒿提取物抗氧化活性大小 芦蒿提取物对ABTS自由基清除能力(μmol Trolox/g芦蒿，n=3) 从表中数据可知，ABTS法测定芦蒿提取物抗氧化活性大小顺序为： 芦蒿水提>芦蒿70％乙醇提取>95%乙醇提取； 芦蒿水提萃取后水溶液部位> 芦蒿水提乙酸乙脂萃取部位> 芦蒿水提正丁醇萃取部位>芦蒿水提石油醚萃取部位

  9. 3.FARP法测定芦蒿提取物抗氧化活性大小 FRAP法测定芦蒿提取物抗氧化活性大小[μmol Fe(II)/g芦蒿 ,n=3] 从表中数据可知，FRAP法测定芦蒿提取物抗氧化活性大小顺序为： 芦蒿水提>芦蒿70％乙醇提取>95%乙醇提取； 芦蒿水提萃取后水溶液部位> 芦蒿水提乙酸乙脂萃取部位> 芦蒿水提正丁醇萃取部位>芦蒿水提石油醚萃取部位

  10. 4.DPPH法测定芦蒿提取物抗氧化活性大小 DPPH法测定芦蒿提取物抗氧化活性大小(μmol Vc/g芦蒿,n=3) 从表中数据可知，DPPH法测定芦蒿提取物抗氧化活性大小顺序为： 芦蒿水提>芦蒿70％乙醇提取>95%乙醇提取； 芦蒿水提萃取后水溶液部位> 芦蒿水提乙酸乙脂萃取部位> 芦蒿水提正丁醇萃取部位>芦蒿水提石油醚萃取部位

  11. 小 结 由ABTS、FRAP、DPPH体外抗氧化实验结果可知，芦蒿提取物具有较强的抗氧化活性。 三种体外抗氧化方法结果一致，即： 芦蒿水提>芦蒿70％乙醇提取>芦蒿95%乙醇提取 芦蒿水提萃取后水溶液部位> 水提乙酸乙脂萃取部位>水提正丁醇萃取部位>水提石油醚萃取部位 由于芦蒿水提物具有最强的体外抗氧化活性，我们研究了芦蒿水提物的体内抗氧化活性，以期探明芦蒿提取物体内外抗氧化活性的相关性。

  12. 三、体内抗氧化方法

  13. 1.芦蒿水提取物的体内抗氧化 (1) 体内抗氧化方法 以D-半乳糖致小鼠氧化损伤为模型来测定过氧化脂质含量（丙二醛/或脂褐素）、超氧化物歧化酶活力（SOD/或GSH-Px）。 (2) D-半乳糖模型建立 D-半乳糖供给过量时，活性氧产生增加，打破了受控于遗传模式的活性氧产生与消除的平衡状态，引起过氧化效应。

  14. (3)芦蒿水提物对小鼠血清SOD活性及MDA含量的影响见下表(3)芦蒿水提物对小鼠血清SOD活性及MDA含量的影响见下表 芦蒿水提物对D-半乳糖致小鼠氧化损伤模型血清中SOD、MDA含量影响（x ±s)

  15. 从表中可以看出D－半乳糖所致的小鼠氧化损伤模型，给予不同剂量的芦蒿水提物，30d后，各剂量组对小鼠血清SOD活力与模型对照组比较有显著性差异（P<0.05或P<0.01）；各剂量组对小鼠血清MDA水平与模型对照组相比较有降低趋势，高剂量组与模型对照组比较有显著性差异（P<0.05）。表明芦蒿水提物具有较强的体内抗氧化活性。

  16. 小 结 芦蒿提取物能够显著升高氧化损伤动物血清中SOD活性，高剂量组能够降低MDA含量，表明芦蒿水提物具有较强的体内抗氧化能力，与芦蒿体外抗氧化活性研究结论一致。

  17. 四、芦蒿提取物抗氧化活性功能因子分析

  18. 1.芦蒿提取物总黄酮、总酚含量测定 (1) 芦蒿提取物总黄酮测定 采用铝离子显色法测定芦蒿提取物总黄酮的含量，以芦丁为标准体系，最终表达为 mg 芦丁/100 g芦蒿。 (2) 芦蒿提取物总酚含量测定 采用Folin-Ciocalteu法测定芦蒿提取物总酚的含量，以没食子酸为标准体系，最终表达为mg没食子酸/100g芦蒿。

  19. 3.测定结果 芦蒿不同溶剂提取及水提不同溶剂萃取物中总黄酮及总酚含量(n=3)

  20. (1)芦蒿提取物总酚含量大小顺序： ①芦蒿水提>70％乙醇提取>95％乙醇提取； ②芦蒿水提萃取后母液部位> 水提乙酸乙脂萃取部位>水提正丁醇萃取部位>水提石油醚萃取部位。 (2)芦蒿提取物总黄酮含量大小顺序： ①芦蒿70％乙醇提取>水提>95％乙醇提取； ②芦蒿水提萃取后母液部位> 水提正丁醇萃取部位>水提乙酸乙脂萃取部位>水提石油醚萃取部位。 由体外抗氧化实验结果可知，芦蒿提取物抗氧化活性大小与提取物中总酚含量大小顺序一致，与总黄酮含量不一致，说明芦蒿提取物中起主要抗氧化的活性组分为总酚类。

  21. 工作展望 芦蒿提取物具有较强的体内外抗氧化活性，下一步的工作： (1)解析具有抗氧化作用的功能因子 　　　　三级结构：▲具有功能作用成分的化学结构 　　　　　　　　　▲具有相同功能的同类成分的组合物结构(组成和配比) 　　　　　　　　　▲多类成分组合物结构(组成和配比) (2)研究抗氧化活性的作用机制 (3)开发抗氧化功能(或保健)产品。

  22. 江 苏 省 中 医 药 研 究 院

  23. 江苏省中医药研究院 实验动物中心(SPF级) 中西医结合临床研究所 中药研究所 (现代中药复方创新制剂研究室) 江苏省中西医结合医院 (国家GCP基地) ……

  24. 中药研究所 现代中药复方创新制剂研究室 ☆江苏省“三药”工程现代中药的重要创新基地 ☆研究方向： 　　★复方系统研究与现代中药复方创制 　　★中药ADME特性与现代剂型设计 　　★中药(制剂)质量标准体系研究 　　★中药资源合理与综合利用关键技术

  25. 江苏省现代中药制剂中试放大基地 ☆GMP ☆　提取分离、纯化富集、干燥 ☆　微丸、片剂、硬胶囊、颗粒 ☆　口服液、糖浆 ☆　软胶囊、滴丸 ☆　注射剂、粉针(冻干)、滴眼液 ☆　透皮贴片、巴布剂、软膏

  26. 国家专利产业化江苏中医药基地 建设有国家知识产权局批准的 国内唯一中医药专利信息平台 “国家专利产业化江苏中医药基地”

  27. 国家药物临床试验机构 SFDA批准附属医院“江苏省中西结合医院”为“国家药物临床试验机构”，目前已有：心血管、呼吸科、肿瘤科、骨伤科、泌尿科、妇产科、脑科、及临床药代(Ⅰ期)

  28. SPF级实验动物中心 按照国家新药研究开发规范和严格，通过改建及添置相关配套设施达到清洁级、SPF级实验动物室的条件。

  29. 致 谢 ☆南京市和栖霞区科技局科技项目资助 　★陈彦博士、研究员　　★研究生 　★范晨怡　　　　　　　★赵呈雷 　★李霞　　　　　　　　★成旭东 　★施亚芳　　　　　　　★黄丽霞

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