染色体分带（ C 带）实验

1. 染色体分带（C带）实验

2. 实验目的 初步掌握染色体分带（C带）的显带技术

3. 实验原理 用常规的染色体处理方法和染色方法，一般只能显示染色体的外部形态特征，如大小或长短、着丝点或次缢痕的位置以及随体等。但对于核型分析中较准确地识别染色体组的每个成员，以及其结构的变异，则仍有不少困难。通过不同的预处理和染色方法可导致染色体内部结构的分化染色，以获得更多的具鉴别性特征的信息，即染色体的“解剖学”特征。也就是染色体的分带技术。广义而言，凡能显示染色体结构分化的实验技术，均可列为染色体的分带技术。

4. 常见的带型 G带 也叫G显带，这是临床上最常用的显带方法。用蛋白水解酶，尿素待处理中期染色体标本均可显带。G带的特性是显带方法简单恒定，带型稳定，保存时间长。 Q带 用喹吖因染料染中期染色体标本可出现一种特征性黄光亮暗带型，一般富含AT-DNA区段表现为亮带，富含GC-DNA区段黄光较暗，常用于人类Y染色体长臂的观察。临床上较少用，不能长久保存。 C带 这种方法将结构异染色质和高度重复的DNA区域染色。在人类染色体上这些区域位于着丝粒和Y染色体上。常用于某一科题的研究。 R带 与G带相近，常用于染色体末端的研究。 Ag-NOR 也称银染色，着色的为与rDNA转录有关的酸性蛋白，即显示的是有转录活性的核仁形成区。用于研究rRNA的初态变化，临床上常用于着丝粒，随体等研究。

5. 实验用品 1.材料 小鼠骨髓细胞制片 2.药品 5%BaOH溶液、 2*SCC溶液、 0.1mol/L盐酸、5%Giemsa染液 3.器具 显微镜、水浴锅、染缸

6. 实验步骤 • 1.0.1mol/L盐酸处理30分钟，蒸馏水洗净 • 2. 染色体标本放入新配的5%BaOH染液的染缸中，室温静置15分钟。然后将染缸连同制片放在水龙头下冲洗（逐步置换法） • 3.复性 制片放入60℃，2*SCC溶液中保温1小时， 洗净 • 4.染色 放入5%Giemsa染液的染缸中，染色10-20分钟 • 5.观察 洗净干燥后观察

7. 绘图 绘制小鼠骨髓细胞中期染色体C带图