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杨友金 E-mail ： yyoujing@zju Tel: 13732209796 Address: 综合楼 909 室

杨友金 E-mail ： yyoujing@zju.edu.cn Tel: 13732209796 Address: 综合楼 909 室. 绪 论. 浙江大学医学院解剖细胞生学系杨友金. 目 录. 组织学 与胚胎学 研究内容和意义. 组织学发展简史和当代组织学. 组织学的学习方法. 组织学技术简介. 一 、 组织学与胚胎学的研究内容. 组织学 （ histology ）： 研究机体微细结构 及其相关功能的科 学. 胚胎学（ embryology ）：研究人体发生、

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杨友金 E-mail ： yyoujing@zju Tel: 13732209796 Address: 综合楼 909 室

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Presentation Transcript

  1. 杨友金 E-mail： yyoujing@zju.edu.cn Tel: 13732209796 Address: 综合楼909室

  2. 绪 论 浙江大学医学院解剖细胞生学系杨友金

  3. 目 录 • 组织学与胚胎学研究内容和意义 • 组织学发展简史和当代组织学 • 组织学的学习方法 • 组织学技术简介

  4. 一、组织学与胚胎学的研究内容 组织学（histology）：研究机体微细结构 及其相关功能的科 学 胚胎学（embryology）：研究人体发生、 生长及其发育机 制的一门科学

  5. 胚胎学研究内容： 胎 受精卵 儿 胚 （9~38周） （前8周） 组织学研究内容： 上皮组织 结缔组织 肌肉组织 神经组织 细胞 (cell) 细胞间质 (intercellular substance) 组织(tissue) 器官和系统 人体 胚胎早期发生

  6. 组 织 类 型

  7. 胃的细微解剖 胃的大体解剖

  8. 显微结构 超微结构 骨骼肌的光镜图 骨骼肌的电镜图

  9. 学习组织与胚胎学的意义 • 组胚学是生物学和医学的基础课程 • 组胚学与人类社会面临的众多实际问题和疾病防治密切相关 • 组胚学与众多学科交叉，如分子生物学、细胞生物学、生理学、生物化学、免疫学、病理学、组织工程学和环境毒理学等学科，理论上相互关联渗透，技术相互引用促进。 只有了解正常的机体结构、组成及其基本生命现象，才能理解机体异常的病理变化。同时也能将生命科学研究不断引向深入。

  10. 二、组织学发展简史和当代组织学 • 发展简史： • 从细胞的发现和细胞学说的建立起始 ，300余年 • Hooke、Malpighi 、leeuwenhoek、 Graaf、Bichat、Meyer 、Schleiden和Schwann等人均有所发现。 • 当代组织学： • 新仪器和相关技术，如流式细胞仪、图像分析仪、共焦激光扫描显微镜、免疫组织化学、原位杂交技术等。

  11. 组胚学发展概况 英国　　Hooke 1635-1703 “cell” 意大利　Malpighi 1628-1694 脾，肺，肾等组织结构 荷兰　　Leeuwenhoek 1632-1723 精子，红细胞，肌细胞，神经细胞 法国　　Bichat 1771-1882 “tissue” 德国 Schleiden 1838-18? 9 创立细胞学说 Schwann 19世纪中期　 组织学 20世纪初 组化，组培 20世纪40年代 细胞，组织超微结构 我国 20世纪初 从人体解剖学分化出—组织学 马文昭 1886-1965 细胞水平 张作干 1907-1969 细胞，组织超微结构 Histology (microanatomy) 细胞发现和细胞学说的建立 　　 组织学说 　　迄今（经历了三百多年）

  12. 三、组织学的学习方法 • 平面与立体 • 结构与功能 • 静态与动态 • 综合与比较

  13. 平面与立体

  14. 单柱上皮不同方位的切片图

  15. 结构与功能 舒张状态 收缩状态

  16. 静态与动态

  17. 综合与比较

  18. 四、组织学技术简介 光镜技术 • ⒈　普通光学显微镜术 • 石蜡切片术：适用于大多数组织样品的制作。主要步骤： • 取材 → 固定 → 水洗 → 脱水 → 透明 → 包埋 → 切片 → 贴片 → 染色 → 封片 。 • 其它制片方法：适用于某些特殊样品的制作，许多步骤与上相同，但某些步骤则有所不同，如： • 涂片法、铺片法、磨片法、火棉胶包埋法等。

  19. 组织胚胎学研究技术 问题解决方法 观察对象太小放大显微镜 观察对象无色，无反差染色（HE染色） 观察对象生化成分不同细胞化学、免疫组织化学 观察对象是活体培养

  20. Sampling fixed embedded staining HE染色：苏木精（Hematoxylin）伊红（Eosin）染色 碱性染料 酸性染料 将嗜碱性物质（本身酸性）染成蓝色 将嗜酸性物质（本身碱性）染成红色 细胞核中的DNA、RNA,细胞质中的RNA 细胞质、膜性结构（线粒体、溶酶体、滑面内质网） 一般光学显微镜（light microscope, LM）技术

  21. 光学显微镜 Light microscope 形态学研究 石蜡切片 冰冻切片 铺片 磨片 涂片

  22. Stretched Ground section smear

  23. 透射电镜（Transmission electron microscopy TEM）: 取材 固定 包埋 超薄切片 电子染色 透射成像 用途:观察细胞内部结构 扫描电镜（Scanning electron microscopy SEM） : 取材 固定 干燥 喷金 扫描成像 用途:观察组织或细胞表面的立体结构 电镜技术（Electron Microscopy）

  24. 扫描电镜 （Scanning electron microscope, SEM） 以电子束穿透样品,经聚合放大后,显像于荧光屏上进行观察与摄片 观察细胞或组织的表面结构

  25. 透射电子显微镜 Transmission electron microscope 组织块经取材固定后, 干燥 ,在标本表面先后喷一层碳膜和合金膜,镜下扫描成像 观察细胞内部结构

  26. 冷冻蚀刻复型术(freeze etch replica)

  27. 冷冻蚀刻复型术 兔胰腺腺细胞的冷冻割断电镜像 ×2000

  28. 组织化学和细胞化学技术(histochemistry&cytochemistry)利用化学或物理反应原理显示组织切片或细胞内某种化学成分,进行定位,定量及其与功能相关的研究.组织化学和细胞化学技术(histochemistry&cytochemistry)利用化学或物理反应原理显示组织切片或细胞内某种化学成分,进行定位,定量及其与功能相关的研究.

  29. 过碘酸 Schiff反应(periodic acid Schiff reaction)：简称 PAS反应，是确定组织或细胞中有无多糖存在的一种方法。 原理： Schiff 试剂 PA 多糖 紫红色沉淀 醛 氧化 多糖显示法—》PAS反应 DNA显示法------》Feulgen反应

  30. 免疫细胞（组织）化学: 利用抗原（antigen, Ag），抗体（antibody）特异结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。

  31. 激光扫描共聚焦显微镜 Laser scanning confocal microscope

  32. 原位杂交术 In situ hybridization 通过检测细胞内mRNA和DNA序列片段,原位研究细胞合成某种多肽和蛋白质的表达.

  33. 细胞培养(cell culture)

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