1 / 76

诊断和基本检查

诊断和基本检查. 中国医科大学附属盛京医院 检验科 卢丽萍. 本次课主要内容. 肝功能实验 肝炎病毒标志物检验 肿瘤标志物检验. 病毒性肝炎标志物的检查. 肝炎 病毒. 甲、乙、丙、 丁、戊 , 其他. 病毒性肝炎标志物检测. 病毒标志物： 指病毒本身或组成病毒的成分及病毒抗体等，是相关病毒的指示剂 病毒性肝炎标志物的组成： HAV-Ag 、抗 HAV-IgM 、 HAV-RNA HBsAg 、 Anti-HBs 、 HBeAg 、 Anti-HBe 、 HBcAg 、 Anti-HBc-IgM 、 Anti-HBc-IgG

lindsay
Télécharger la présentation

诊断和基本检查

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. 诊断和基本检查 中国医科大学附属盛京医院 检验科 卢丽萍

  2. 本次课主要内容 • 肝功能实验 • 肝炎病毒标志物检验 • 肿瘤标志物检验

  3. 病毒性肝炎标志物的检查 肝炎病毒 甲、乙、丙、 丁、戊,其他

  4. 病毒性肝炎标志物检测 病毒标志物：指病毒本身或组成病毒的成分及病毒抗体等，是相关病毒的指示剂 病毒性肝炎标志物的组成： • HAV-Ag、抗HAV-IgM 、 HAV-RNA • HBsAg、Anti-HBs、HBeAg、Anti-HBe、HBcAg、Anti-HBc-IgM、Anti-HBc-IgG HBV DNA、Pre S1、Anti- Pre S1 • Anti-HCV-IgM、Anti-HCV-IgG HCV-RNA

  5. 甲型肝炎病毒标志物测定 HAV：微小RNA病毒 在肝细胞内复制，经胆汁从粪便排出 测定方法： 抗-HAV-IgM，抗-HAV-IgG HAV-Ag RT-PCR HAV-RNA 参考值：HAV-Ag：ELISA ( - ) HAV-RNA： ( - ) 抗-HAV-IgM、IgA ： ( - ) 抗-HAV-IgG（+）部分成年人 ELISA检测

  6. ※临床意义： 甲型肝炎： HAV-Ag（+）占70.6~87.5% 粪便HAV-Ag（-）不需要隔离 血清HAV-Ag（+）有确诊甲肝价值 HAV-RNA诊断具特异性 早期诊断指标： 抗-HAV-IgM： 1~2周出现，持续3~6月后消失 正在感染，特异性指标 抗-HAV- IgA ：粪便中 抗-HAV-IgG：高滴度：诊断HAV感染 低滴度：既往感染，保护性抗体 恢复期血清抗体滴度高于急性期4倍以上有诊断意义

  7. 乙型肝炎病毒标志物测定 • 双链DNA病毒 • 中央为核苷酸含病毒DNA，周围包有表面蛋白和抗原。 乙型肝炎病毒 HBsAg DNA Polymerase HBcAg Double-Stranded DNA HBeAg Dane Particle

  8. HBV感染的现状 • 全球HBV感染者3.5~4.0亿其中75%分布在亚太地区 • 全球每年有100万死于HBV感染的相关疾病 • 占疾病死亡原因的第9位 • 我国慢性乙肝病毒携带者1.3亿 • 国内慢肝患者3000万以上，乙肝的发病数、 • 死亡数均居传染病前列

  9. 临床意义 1.乙肝病毒表面抗原（ HBsAg ） 1) 感染后1~2月血清出现 肝脏中有HBV存在，不含DNA 本身不具有传染性常与HBV同时存在 基因突变 乙肝潜伏期和急性期 慢性肝炎、肝硬化、肝癌 慢性HBsAg携带者 2）HBsAg（+）

  10. 2.乙肝病毒表面抗体（Anti-HBs ） 1). HBsAg转阴后出现 对HBsAg产生的中和抗体，为保护性抗体 机体对乙肝病毒有一定的免疫力 2). 抗HBs （+） 曾感染过HBV，现已恢复，并有一定的免疫力 接种乙肝疫苗 被动获得Anti-HBs（接受免疫球蛋白或输血治疗） 抗体可持续多年，效价与保护作用呈平行关系

  11. 3.乙肝病毒e抗原（ HBeAg ） 1). 由感染的肝细胞分泌入血，可游离存在 患有乙肝 病毒复制活跃 传染性强的指标 肝细胞有进行性损害 持续阳性： 乙肝活动期易转为慢性或肝硬化 3).孕妇——垂直传播70~90%感染率 HBeAg（+）、 HBsAg（+） 2）HBeAg（+）

  12. 4.乙肝病毒e抗体（ Anti-HBe） 1).非保护抗体，乙肝潜伏期的后期出现 急性感染恢复期 HBV部分被清除或抑制 复制减少，传染性降低 预后良好 急性肝炎 易转为慢性 慢性活动性肝炎 易转为肝硬化 2).抗HBe(+)

  13. 5.乙肝病毒核心抗原 （ HBcAg ） 存在于Dane颗粒核心，被HBsAg包裹， 不易检测 阳性：病毒复制活跃，传染性强，预后差 6.乙肝病毒核心抗体（ Anti-HBc） 不是中和抗体，反映肝细胞受病毒侵害 包括IgM、IgG、IgA

  14. 1). 抗HBc-IgM 乙肝病毒感染后血中最早出现的特异性抗体 乙肝急性感染及病毒持续复制的指标有强传染性 与乙肝转归有关：阴 阳：复发 对HBsAg阴性的急性乙肝诊断更有意义 慢性活动性肝炎

  15. 2). 抗HBc-IgG 病毒感染后1个月开始升高，持续终身， 无保护性 高滴度：正在感染 低滴度：既往感染指标 慢肝、肝癌中检出率高 献血员、血制品安全性筛选

  16. 乙型肝炎抗原抗体系列检查结果

  17. 7.乙肝病毒DNA （ HBV-DNA ） HBV的基因物质 HBV感染最直接、最灵敏、最特异的检测指标 1).阳性，乙肝直接诊断依据 2).应用疫苗后垂直传播的阻断效果监测 3).复制，高度传染性最可靠的指标

  18. 丙型肝炎病毒标志物检测 1. HCV-RNA 1).阳性： HCV复制活跃，传染性强，活动性感染 HCV感染最直接、最灵敏、最特异的检测指标 2).评价干扰素等疗效，检测血制品的安全性

  19. 2. Anti-HCV-IgM 1).病后4周，持续1~4周，6月转阴 2).病毒复制，传染性强 早期诊断敏感指标 3. Anti-HCV-IgG 1).已有HCV感染，输血后肝炎占80~90% 2).易转为慢肝、肝硬化肝癌 3).不能作为HCV感染早期诊断指标

  20. 丁型肝炎病毒抗体检测 丁型肝炎病毒(HDV)： 缺陷病毒，需HBV或其他嗜肝病毒的辅助才能复制传播 临床意义： 抗原检测：HDVAg出现早，持续1~2周 HDVAg（+）：诊断急性HDV感染的最好、最直接的证据 抗体检测： IgM：出现早，持续2~20周 早期诊断 IgG：只能在HBsAg阳性的血清中测得， 可靠诊断指标 HDV感染终止后仍可保持多年

  21. 戊型肝炎病毒抗体检测 临床意义： IgM（+）持续时间短，急性感染的诊断指标 IgG效价（恢复期）≥急性期4倍者，提示HEV新近感染。

  22. 庚型肝炎病毒抗体检测 目前HGV感染的血清学检测方法还不成熟 临床意义： 抗体（+）： 曾感染过HGV 输血后肝炎 使用血液制品引起HGV合并HCV感染者

  23. 输血传播病毒检测 • 输血传播病毒（TTV)： PCR为主要检测方法 • 参考值：PCR法阴性

  24. 临床意义： TTV DNA（+）： 表明有TTV存在，但普通人群中TTV阳性率较高，国内献血员阳性率报道为11-15%，无症状携带者较多，又由于TTV基因异源性较高，导致PCR法阳性率较高。因此尚不能全面了解TTV的临床和流行病学特征

  25. 评价肝功能状态应注意 贮备、再生和代偿能力很强 肝脏 功能繁多 灵敏度 特异性 检验肝功的方法 结合临床、影像、内窥镜 病原学（肝炎病毒标志物） 病理学（肝活检） 免疫学（自身抗体，肝癌标志物）

  26. 肝病检查项目的选择 1、选择原则： 1）病情需要 2）尽量选择敏感性、特异性高的指标 3）常规检查项目与特殊检查项目相结合 4）实验室条件允许

  27. 2、选择项目优化组合 1）健康查体: ALT、TB、ALB、A/G，肝炎病毒标志物 必要时加血清蛋白电泳

  28. 2）疑似肝炎： 急性（无黄疸）： 肝炎病毒标志物、ALT、PA、胆汁酸、 血清胆红素、尿胆原 慢性（无黄疸）: 加上AST、ALP、TP、 A/G、γ-GT、血清蛋白电泳

  29. 3）黄疸的诊断与鉴别： 血清胆红素、尿胆原、尿胆红素、ALP， GGT，胆汁酸 4）怀疑肝纤维化或肝硬化： 转氨酶，血清胆红素，白蛋白，球蛋白， 蛋白电泳 附加检查：MAO，Ⅲ型前胶原肽

  30. 5）原发性肝癌： 一般肝功（转氨酶，γ-GT，胆红素） 加测AFP、CEA、ALP同功酶、γ-GT同功酶等

  31. 6）疗效观察和病情观察： 急性肝炎：ALT，AST，PA， 胆红素，尿胆原，尿胆红素 慢性肝炎：ALT，AST，胆红素， 总蛋白，白蛋白，A/G，血清蛋白电泳 必要时附加：MAO，Ⅲ型前胶原肽 原发性肝癌随访： AFP，γ-GT，ALP及其同功酶

  32. 一般肝功能检查项目 蛋白电泳 血浆凝血因子 血氨等 A/G 蛋白质代谢 肝合成功能 肝细胞损伤 血清酶学 肿瘤、胆道通畅 肝合成功能 胆红素代谢 肝排泄功能 胆汁酸

  33. 肿瘤标志物检测（tumor markers,TM) • 1978年Herberman在美国国立癌症研究所召开的人类肿瘤免疫诊断会上提出 • 1979年确认并开始使用 • TM主要是指那些在血液、体液及组织中可检测到的、与肿瘤相关的、并反映其一定生物特性的物质，这些物质达到一定的水平时能揭示某些肿瘤的存在。 • TM的临床意义： 诊断 、 复发 、 判断疗效 、 预后

  34. 肿瘤标志物的分类 1. 细胞型肿瘤标志物 在肿瘤组织和肿瘤细胞膜上表达细 胞膜上的抗原、生长因子与激素受 体、染色体、癌基因和抑癌基因 来源和存在部位

  35. 2．体液型肿瘤标志物 由肿瘤组织合成并分泌 肿瘤细胞结构的一部分 肿瘤组织分解时释放 在血清、尿液和其他体液检测得到

  36. （1）癌胚抗原标志物 （2）糖类抗原标志物 （3）酶类标志物 （4）蛋白质类标志物 （5）激素类标志物 （6）基因类标志物 本身的生化学特性和免疫学特性

  37. 理想的TM ： • 特异性高，对肿瘤与非肿瘤鉴别的准确性可达100%。 • 敏感性高，能在极早期发现肿瘤的存在，不漏诊。 • 在体液中的浓度应与瘤体大小、临床分期密切相关，并可据此判断预后。 • 半衰期短，可根据其水平的升降监测治疗效果及肿瘤是否复发或转移。 • 检测方法灵敏可靠，操作简便，价格低廉。

  38. 常用肿瘤标志物 • 甲胎蛋白（AFP） • 癌胚抗原（CEA） • 糖类抗原（CA125、CA15-3、CA199、CA72-4） • ß2-微球蛋白（ ß2-MG） • 铁蛋白（Ft） • 细胞角质素片段抗原21-1（CYFRA21-1） • 神经元特异性烯醇化酶（NSE） • 鳞状上皮癌相关抗原（SCC-Ag） • 前列腺特异抗原（PSA） • 前列腺酸性磷酸酶（PAP） • 核基质

  39. 肿瘤标志物常用检测技术 • 免疫学检测技术 • 酶免疫测定技术 • 荧光免疫测定技术 • 放射免疫测定技术（RIA) • 免疫组织化学技术

  40. 分子生物学检测技术 • DNA提取技术 • DNA杂交技术 • 限制性内切酶片段长度多态分析 （RFLP） • PCR技术

  41. 肿瘤标志物的测定 ： • 肿瘤细胞特异或相关抗原的测定 • 肿瘤相关酶含量活性的测定 • 肿瘤相关激素水平及其受体数量的测定 • 细胞刺激因子的测定 • 癌胚基因产物、癌基因及其癌基因蛋白、抗癌基因等测定

  42. 肿瘤标志物测定中的几个重要事项： 动态变化比单次数据更有意义 良性疾病常呈一过性升高或轻微异常 即使在正常范围内，浓度有增加可能也有意义 动态TM含量测定可指示肿瘤复发或转移的类型和位置。 迅速升高（＞4ng/ml.6月） 骨或肝转移 缓慢升高（＞2ng/ml.6月） 脑、软组织 皮肤转移 肿瘤标志物测定值很大程度上取决于 肿瘤抗原的异质性和转移 产生、分泌、血液供应及清除等因素 术后CEA

  43. 肿瘤标志物的临床应用 筛选:用于有症状人群或有某种危险因素 人群的筛选（AFP) 分期:结直肠癌的CEA 有预后价值的标志物： CEA、β2-微球蛋白、CA125等 不适宜基本诊断、肿瘤定位(PSA/PAP例外）

  44. 疗效的检查和监测(最有意义的适用指标) 判断手术、放疗或化疗及免疫治疗是否成功 治疗: 制备对肿瘤标志物的单抗（瘤细胞表面抗原抗体），再用化疗药物标记抗体，使药物得以较集中的集聚至瘤细胞表面，达到治疗目的。 降至正常水平 肿瘤完全切除或消退 恒定或下降 重新增加 肿瘤残留或潜在转移 肿瘤标志物 正常 增加 肿瘤复发

  45. 常用肿瘤标志物 癌胚抗原 （Carcinoembryonic Antigen，CEA） • 主要来源于胎儿胃肠道和胰腺，内胚层肿瘤中可产生高浓度的CEA。 • 其生物半寿期为2~8天。 • CEA主要用于结肠直肠癌患者的治疗检查和监测。 • 在监测可治疗的手术后的患者中，CEA比CT、超声及内窥镜更敏感。

  46. [正常参考范围] 健康非吸烟者＜3ng/ml 吸烟者3~20ng/ml

  47. CEA [临床意义] 消化道癌肿：结肠癌、直肠癌 CEA＞20ng/ml 其他肿瘤：乳腺癌、肺癌、胰腺癌、胃癌、前 列腺癌、宫颈癌、卵巢肿瘤 良性疾病：直肠息肉、肝硬化、非特异性结肠炎 心血管疾病、糖尿病、胶原性疾病 肿瘤预后： 手术治疗成功：6~8周降至正常水平 降而复升：表示肿瘤有进展、复发或转移 逐渐上升（2~4ng/ml. 6months）： 局部复发 迅速增加： 有转移

  48. 甲胎蛋白(Alpha-Fetoprotein,AFP) 主要在胎儿肝脏和卵黄囊中合成，妊娠12~16周 达最高水平，然后逐渐下降，出生后不久（一年 内）降至正常水平。孕妇在32~36周血中AFP达 高峰，可达500 ng/ml 生物半寿期约5天 AFP主要用于原发性肝细胞癌的诊断和监测

  49. [参考值] 男人和非妊娠妇女＜8.5ng/ml 国内： 25ng/ml（25μg/L） （1U/ml×1.21=ng/ml） [临床意义] 原发性肝癌：早期诊断，阳性率67.8%~74.4% 原发性肝细胞癌AFP＞1000ng/ml AFP升高持续1个月以上,能排除妊娠、活动性肝炎、 幼儿性睾丸或卵巢、畸胎瘤等可确诊肝癌

More Related