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マッソントリクローム染色 （ Masson trichrome stain ）

マッソントリクローム染色 （ Masson trichrome stain ）. 目的. 膠原線維を選択的に染めることで、アザン染色と同じ目的である 膠原線維と筋線維を染め分ける 特徴をもつ。 核をヘマトキシリンで染め 、 細胞質を赤く 、 膠原線維を青く 染める、３色染色とよばれる。 核がヘマトキシリンで染まっているか否かで得られる情報の差は大きく、迅速に染まることと同時にこの染色の特徴である。. 原理. 分子量の異なる一連のアニリン色素を用いての配合染色。 鉄ヘマトキシリンで核を染め、その後に拡散速度の大きい小色素分子（酸フクシン、

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マッソントリクローム染色 （ Masson trichrome stain ）

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Presentation Transcript

  1. マッソントリクローム染色（Massontrichromestain）マッソントリクローム染色（Massontrichromestain）

  2. 目的 膠原線維を選択的に染めることで、アザン染色と同じ目的である膠原線維と筋線維を染め分ける特徴をもつ。 核をヘマトキシリンで染め、細胞質を赤く、膠原線維を青く染める、３色染色とよばれる。 核がヘマトキシリンで染まっているか否かで得られる情報の差は大きく、迅速に染まることと同時にこの染色の特徴である。 原理 分子量の異なる一連のアニリン色素を用いての配合染色。 鉄ヘマトキシリンで核を染め、その後に拡散速度の大きい小色素分子（酸フクシン、 ポンソーキシリジン）が細胞の細網孔へ浸透し、次いで拡散速度の小さい大色素分 子（アニリン青）が膠原線維の粗構造に入り込み青色に染め出す。

  3. 試薬 • 媒染剤 10%トリクロル酢酸水溶液　　　　　 1容 10%重クロム酸カリウム水溶液　　　1容 • ワイゲルトの鉄ヘマトキシリン液 • 1%塩酸70%アルコール • 1%酢酸水 • 1液 1%ビーブリッヒスカーレット　　90ml 1%酸性フクシン　　　　　　　　 10ml 　　酢酸　　　　　　　　　　　　　　 1ml • 2液 　　リンモリブデン酸　　　　　 5ｇ 　　リンタングステン酸　　　　 5ｇ　 　　蒸留水 　　　　　　　　　 200ml • 3液 　　アニリン青　　　 2.5ｇ 　　酢酸　　　　　　 　2ml 　　蒸留水　　　　　 100ml

  4. 染色方法 1％酢酸水（5分） すばやく水洗、脱水、透徹、封入 脱パラ、蒸留水水洗 媒染（10～15分） 水洗（5分） ワイゲルトの鉄ヘマトキシリン液（5分） 軽く水洗 1％塩酸70％アルコールで分別 色出し、水洗（10分）後、蒸留水水洗 1液（2～5分） 軽く水洗 2液（30分以上） 軽く水洗 3液（5分） 軽く水洗

  5. 試薬（細胞組織） • ブアン固定液（使用前に60℃に暖めておく） 　　　 ピクリン酸　 37.5ml 　　　ホルマリン原液　12.5ml 　　　酢酸 2.5ml • ヘマトキシリン • Gomori-one-step-stain液

  6. 染色方法（細胞組織） Gomori-one-Step-Stain液（60分） ヘマトキシリン（15分） 流水水洗（15分） アルコール分別（×3） 透徹、封入 脱パラ・流水水洗 ブアン固定（60分） 流水水洗（15分、黄色がなくなるまで）

  7. GOMORI’SONE STEP TRICHOME METHOD Gomori-one-step-stain Masson’s trochome method Chromotrope2R0.6g Light green0.3g Glacial acetic acid 1.0ml Phosphotungstic acid0.8g Distilled water100.0ml • 1液 1%ビーブリッヒスカーレット 90ml 1%酸性フクシン10ml 酢酸1ml • 2液 　　リンモリブデン酸　　　　 　5ｇ リンタングステン酸5ｇ　 　　蒸留水 　　　　　　　　　 200ml • 3液 アニリン青2.5ｇ 　　酢酸　　　　　　　 2ml 　　蒸留水　　　　　 100ml Chromotrope2R

  8. 染色結果 比較用：Azan染色 肝臓：M-T染色

  9. M-T　染色 Azan　染色

  10. ←　メチルブルー 結合組織：青 ライトグリーン　→ 結合組織：緑 http://info.fujita-hu.ac.jp/~hirasawa/gallery1/gallery1.html

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