1 / 17

МЕТОД ГОМОЗИГОТИЗАЦИИ МАТЕРИАЛА В КУЛЬТУРЕ ИЗОЛИРОВАННЫХ МИКРОСПОР ЯЧМЕНЯ

МЕТОД ГОМОЗИГОТИЗАЦИИ МАТЕРИАЛА В КУЛЬТУРЕ ИЗОЛИРОВАННЫХ МИКРОСПОР ЯЧМЕНЯ. Работа выполнена в рамках гранта МОН РК по теме: « Технология культуры изолированных микроспор в создании генетически однородных и стабильных сортов ячменя » № гос. регистрации 0112РК02744. Цель исследований:.

nina-york
Télécharger la présentation

МЕТОД ГОМОЗИГОТИЗАЦИИ МАТЕРИАЛА В КУЛЬТУРЕ ИЗОЛИРОВАННЫХ МИКРОСПОР ЯЧМЕНЯ

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. МЕТОД ГОМОЗИГОТИЗАЦИИ МАТЕРИАЛА В КУЛЬТУРЕ ИЗОЛИРОВАННЫХ МИКРОСПОР ЯЧМЕНЯ Работа выполнена в рамках гранта МОН РК по теме: «Технология культуры изолированных микроспор в создании генетически однородных и стабильных сортов ячменя» № гос. регистрации 0112РК02744

  2. Цель исследований: -Повышение частоты регенерации in vitro сортов ячменя в культуре изолированных микроспор; -Оптимизация параметров культуры клеток и регенерации растений in vitro; - Отработка первичного протокола культуры микроспор ячменя Задачи исследований: - Отбор сортов ячменя для улучшения биотехнологическими методами. Выбор условий для дигаплодизации генотипов ячменя в массовых масштабах. - Цитологические методы определения плоидности растений. - Отработка эффективной технологий ускоренной гомозиготизации генотипов ячменя (культура микроспор). - Разработка культур микроспор выбранных сортов, регенерация растений, удвоение хромосом.

  3. Сбор и подготовка колосьев 1. длина верхнего междоузлия – 16-18 см, длина колоса – 4.5-6.5 см 2. длина верхнего междоузлия – 9,5-12,5 см, длина колоса – 3.5-5 см Рисунок 1. 9,5-12,5 cм 16-18 cм

  4. Культура изолированных микроспор РИСУНОК 2. Микроспоры: A - свежевыделенные; B - после деления

  5. Развитие из культуры микроспоры Рисунок 3. 1 – эмбриоидо-подобные структуры (каллусы, эмбриоиды) на питательной среде 2 – меристемати-ческие очаги на регенерационной питательной среде

  6. Развитие из культуры микроспоры Рисунок 4. 1 – растения на питательной среде для регенерации 2 - доращивание растений-регенерантов в грунте

  7. Таблица 1 – Влияние стадии развития микроспор в пыльниках ячменя на частоту формирования новообразований на индукционной среде В

  8. Таблица 2 - Влияние источника углеводов на регенерацию растений, сорт Байшешек

  9. Таблица 3 – Питательная среда B для предобработки микроспор

  10. Таблица 4 – Питательная среда А для культивирования микроспор

  11. Оценка плоидности растений-регенерантов Рисунок 5. 1- диплоид, 2 – гаплоид 1 2

  12. Таблица 5 - Протокол получения дигаплоидов ячменя в культуре изолированных микроспор

  13. Продолжение таблицы №5 4 этап– Деление микроспор и разбавление культуральной среды: после 1-ой недели микроспоры начинают делиться и образуют колонии, каллусы и эмбриоиды. В чашки Петри добавляют среды А с уменьшенным содержанием мальтозы (20 мг/л). 5 этап - Регенерация и укоренение: пассирование эмбриоидоподобных структур на твердую регенерационную среду (MS соли + витамины + 0,1мг/л зеатина + 0,01мг/л гибберелловой кислоты). Через 3-4 недели образовавшиеся растения-регенеранты переносятся на среду для укоренения (1/2 MS соли + витамины + 15 г/л сахарозы). 6 этап– Удвоение хромосом. Контроль уровня плоидности. Пересадка в грунт, опрыскивание раствором ГК. Получение семенного материала. Кариологический и биохимический контроль полученных дигаплоидов.

  14. Методика проведения НИР - Приготовление питательных сред и стерилизации материала, инструментов по Ф.Л.Калинину и др., 1980. • Выделение микроспоры и получение гаплоидов ячменя по методам гаплоидной технологии по А.М.Тураеву и др., 1990; АЦФГР, 1997. • Цитоэмбриологические анализы по методике З.П. Паушевой, 1974. • Статистическая обработка – В.П.Доспехов 1987;

  15. Объемы работ - Выращивание донорных растений; - Сбор и подготовка колосьев на стадии незрелых соцветий; - Воздействие холодом (холодовой стресс) пыльников; - Стерилизация колосьев; - Выделение пыльников в асептических условиях; - Подготовка питательных сред; - Изолирование и очищение микроспор; - Наблюдения за делением микроспор; - Перенос эмбриоидоподобных структур на твердую регенерационную среду; - Колхицинирование гаплоидных растений ячменя; - Высадка регенерантов в грунт.

  16. План пропаганды научных достижений • 1. Заявление на патент РК на изобретение в РГКП «НИИС» “Способ создания генетически однородных и стабильных дигаплоидных генотипов ячменя на основе культуры изолированных микроспор.” Регистрационный №2013/0085.1 от 29.01.13. Башабаева Б.М., Абугалиева А.И., Исмагул А.Ж. • 2. Башабаева Б.М. А.Ж. Исмагул, А.И. Абугалиева, Б.Ш. Алимгазинова, Б.С. Сариев. Культура изолированных микроспор в создании генетически однородных и стабильных дигаплоидных генотипов ячменя //Биотехнология. Теория и практика. Май. 2013.

  17. С П А С И Б О З А В Н И М А Н И Е!

More Related