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PCR 产物回收 (胶回收试剂盒法)

PCR 产物回收 (胶回收试剂盒法). 4 步:溶解 - 吸附 - 洗涤 - 洗脱. 药学系 罗浩虹 0592-5953809. 本试剂盒采用离心柱吸附纯化 PCR 产物。回收率可达 80% 。每个离心吸附柱可吸附的 DNA 量为 10ug 。 本试剂盒回收的 DNA 可适用于各种常规操作,包括酶切、 PCR 、测序、文库筛选、连接和转化等实验。. 溶解、柱平衡、吸附. 1 、溶解: 取等体积溶液 PC ( 100ug 胶重对应 100ul 体积)加入回收胶中, 50℃ 水浴 10mins 。不间断翻转(振荡)。(溶液应为黄色 pH<7.5 ) 2 、吸附:

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PCR 产物回收 (胶回收试剂盒法)

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  1. PCR产物回收(胶回收试剂盒法) 4步:溶解-吸附-洗涤-洗脱 药学系 罗浩虹 0592-5953809

  2. 本试剂盒采用离心柱吸附纯化PCR产物。回收率可达80%。每个离心吸附柱可吸附的DNA量为10ug。本试剂盒采用离心柱吸附纯化PCR产物。回收率可达80%。每个离心吸附柱可吸附的DNA量为10ug。 • 本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。

  3. 溶解、柱平衡、吸附 • 1、溶解: • 取等体积溶液PC(100ug胶重对应100ul体积)加入回收胶中,50℃水浴10mins。不间断翻转(振荡)。(溶液应为黄色pH<7.5) • 2、吸附: • 取步骤1中溶液(室温)加入已平衡过的吸附柱中,12000rpm(约13400g)离心1min。 • 注意,吸附柱要预平衡: • 500ul平衡液BL 加入吸附柱中,12000rpm(约13400g)离心1min。倒掉废液。

  4. 洗涤两次 • 3、洗涤 • 取600ul漂洗液PW加入上述吸附柱(已经吸附了DNA)中,静置1min。12000rpm(约13400g)离心1min。倒掉收集的废液。 • 重复洗涤一次。 • 空管12000rpm(约13400g)离心1min。尽量去除漂洗液。

  5. 洗脱 • 4、洗脱并收集DNA • 取无菌干净的1.5ml离心管做收集管。 • 向吸附膜中间位置滴加15ul洗脱缓冲液EB,室温放置2min。12000rpm(约13400g)离心2min。收集DNA。

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