Microbiología I M. Paz-2012

1. FAMILIA Enterobacteriaceae Microbiología I M. Paz-2012 1

2. Enterobacteriaceae • Son el grupo más frecuentemente cultivado en el laboratorio clínico junto con los cocos piógenos.

3. Enterobacteriaceae • más de 50 diferentesgéneros (20-25 especies de importanciaclínica) • Escherichia • Shigella • Edwardsiella • Salmonella • Citrobacter • Klebsiella • Enterobacter • Hafnia • Serratia 3

4. Enterobacteriaceae • Proteus • Providencia • Morganella • Yersinia • Erwinia • Pectinobacterium 4

5. Enterobacteriaceae • Morfología y característicasgenerales • Bacilos Gram-negativo • No esporo-formadores • Catalasa-positiva • Oxidasa-negativa • Fermentanglucosa y pueden o no producir gas en el proceso (aerogénicosvsanaerogénicos) • Reducen los nitratos a nitritos 5

6. Bacilos Gram (-) 6

7. ANTÍGENOS DE LAS ENTEROBACTERIAS Cada especie presenta características antigénicas distintas, lo cual permite diferenciarlas mediante pruebas con antisueros específicas (SEROLOGÍA) Antígeno O = Somático Antígeno H = Flagelar Antígeno K = Cápsula

8. Enterobacteriaceae • Anaerobiosfacultativos • Algunosmóviles: • Flagelosperitricos • Muchos son habitantesnormales del tracto intestinal del hombre (y de otrosanimales) • Patógenos • Entéricos • Urinarios • Respiratorios • Relacionados con enf. Reumática 8

9. Enfermedades Oportunistas • septicemia • neumonía • meningitis • Infecciones del tracto urinario • Citrobacter • Enterobacter • Escherichia • Hafnia • Morganella • Providencia • Serratia 9

10. Enterobacteriaceae Enfermedades gastrointestinales • Escherichia coli • Salmonella • Shigella • Yersinia enterocolitica 10

11. Enfermedades asociadas al Síndrome de Reiter • Antígeno de histocompatibilidad (HLA) B27 • Enterobacteriaceae • Salmonella • Shigella • Yersinia • No-Enterobacteriaceae • Campylobacter • Chlamydia 11

12. Enterobacteriaceae • Adquiridas en la comunidad • Personas sanas • Klebsiella pneumoniae • enfermedad respiratoria • prominente cápsula • Infección urinaria • contaminación fecal • E. coli • Proteus • ureasa (degrada la urea) • orina alcalina 12

13. Enterobacteriaceae: cultivo • Crecenbien en distintosmedios de cultivoselectivos y diferenciales. • La mayoría de mediosselectivostienen sales biliares y colorantesqueinhiben el crecimiento de Gram positivos y puedensuprimir el crecimiento de especies no patógenas de la familia de Enterobacteriaceae. • Muchos son diferenciales en base a la fermentación de lactosa y/o producción de H2S. 13

14. Enterobacteriaceae • En agar sangre todas producen colonias similares, relativamente grandes y grisáceas. Pueden ser o no hemolíticas. • Los tres medios más útiles para identificar potenciales patógenos son: agar TSI, LIA, y urea o agar fenilalanina. • La estructura antigénica es usada para diferenciar a organismos dentro de un género o especie. Tres son los más importantes. 14

15. Crecimiento en MacConkey 15

16. Reacciones en TSI TSI = TRIPLE AZUCAR Y HIERRO Fermentación de la glucosa, sacarosa y lactosa 16

17. Kligler: posibles resultados 17

18. Reacciones en LIA Descarboxilación o desaminación de la lisina 18

19. Reacciones en LIA 19

20. Prueba de Indol (SIM) 20

21. Prueba de Ureasa 21

22. Prueba de Citrato 22

23. Prueba de movilidad, indol y descarboxilación de la ornitina (MIO) 23

24. Enterobacteriaceae • Antígenos somáticos O • Parte polisacárida termoestable del LPS. • La variación de colonias lisas a rugosas se acompaña de una pérdida progresiva del Ag O. • Antígenos flagelares H • Son termolábiles • Antígenos de la envoltura o cápsula K • Recubre al O y puede bloquear la aglutinación con antisueros O específicos. • Ebullición por 15 minutos destruye a K y desenmascara los antígenos O. • El Ag K es llamado Vi(virulencia) en Salmonella. 24

25. Estructura antigénica de las Enterobacteriaceae 25

26. Aglutinación 26

27. Enterobacteriaceae • Escherichia coli • Habitante normal del tracto G.I. • Algunas cepas causan diversas formas de gastroenteritis. • Es causa principal de infección urinaria y meningitis neonatal y septicemia. • Puede presentar cápsula. • Bioquímica • La mayoría es móvil. 27

28. Infección urinaria ascendente 28

29. Escherichia coli • Puede ser hemolítica en Agar Sangre • Especialmente en cepas patogénicas\ • Pruebas clave para la cepa normal: • TSI es A/A + gas • LIA K/K • Urea – • Indol + • Citrato – • Movilidad + • Hay un biotipo que es anaerogénico, lactosa (-) e inmóvil. 29

30. Escherichia coli 30

31. TSI E. coli A/A 31

32. E. coli ETEC • Factores de Virulencia • Toxinas • Enterotoxinas • PRODUCIDAS POR CEPAS ENTEROTOXIGENICAS DE E. coli (ETEC). • Causa movimiento de agua y iones de los tejidos al intestino resultando en diarrea acuosa. • Tipos de enterotoxina: • LT – termo lábil • ST – termo estable • Diarrea del viajero • Parecida al cólera (más leve) 32

33. Toxinas de E. coli • LT – Toxina termolábil • se une a gangliósidos Gm1 sobre las células epitelialesdel intestino delgado donde se estimula la adenilato ciclasa para aumentar la producción de cAMP. • El cAMP aumentado altera la actividad de los transportadores de sodio y cloro, produciendo un desbalance que resulta en transporte de fluido hacia el intestino. • ST – Toxina termo estable • se une a receptores que estimulan la producción de cGMP con los mismos resultados que la LT. • Ambas enterotoxinas están compuestas por cinco subunidades beta (para unirse) y una subunidad alfa (que tiene la actividad enzimática tóxica). 33

34. E. colienterotoxigénica • LT • Parecida a la colerigénica • Adenilciclasaactivada • AMP cíclico • secreciónagua/iones • ST • Guanilatociclasaactivada • cGMP • Captación de agua/iones 34

35. Actividad de LT vs ST 35

36. E. coli enteroinvasiva (EIEC ) • Disentería - Parecida a la shigelosis Lumen intestinal 36

37. Escherichia coli (EPEC) • E. coli ENTEROPATOGENA • Muy parecida a Shigella • Genéticamente muy similares • Patogenia muy parecida 37

38. EPEC Destrucción de los microvellos de la superficie Lumen intestinal • fiebre • diarrea • vómitos • náusea • heces sin sangre 38

39. EPEC 39

40. Micrografía electrónica de transmisión E. coli enterohemorrágica (EHEC) • O157:H7 Flagella 40

41. Transmisión alimentos contaminados (carne y vegetales) • Hemorrágica • Diarreasanguinolenta y copiosa • Pocosleucocitos • Afebril • Síndromehemolíticourémico • Anemiahemolítica • Trombocitopenia (recuentobajo de plaquetas) • Fallo renal 41

42. E. coli Enterohemorrágica • Toxina Vero • “shiga-like” • Hemolisinas 42

43. E. Coli EAEC • Toxinaparecida a la ST • Enteroagregativatoxina ST-like • Causadiarreaacuosa • Hemolisinas de dos tipos: • Unida a la célula • Secretada • Lisaneritrocitos y leucocitos y ayudan a inhibir la fagocitosiscuandoestáunida a la célula • Endotoxina 43

44. E. coli • Adhesión • Porfimbrias y otrosfactores no fimbriasinvolucradas en la adhesión • Por lo menos 21 diferentestipos de adhesiones. • Los anticuerposproducidos contra ellosprotegen de la colonización. • Factores de virulencia • Cápsula • Capacidad de capturar al hierro (enteroquelina) • Proteínasexternas de membrana • Involucradas en ayudar al organismo a invadir. 44

45. Fimbriasde E. coli Tipo 1 manosa P galactosa • glucolípidos • glucoproteínas 45

46. Varios tipos de E. coli 46

47. BFP EPEC EPEC EPEC 47

48. Resumen de las cepas de E.coli que causan gastroenteritis. 48

49. Tratamiento de la enfermedad gastrointestinal • Reemplazo de líquidos • Antibióticos • no usados usualmente a menos que sea sistémica • ej: Síndrome urémico hemolítico 49

50. Shigella • S. flexneri, S. boydii, S. sonnei, S. dysenteriae • Causa de: disentería bacilar • shigelosis • Heces sanguinolentas • Dolor intestinal • Pus (leucocitos en heces) 50