330 likes | 1.06k Vues
UYGULAMALI ÇALIŞMA V. KAN FİZYOLOJİSİ -2. DENEYLER. KAPİLER KAN TOPLAM LÖKOSİT SAYIMI KANDAN YAYMA PREPARAT HAZIRLANMASI: LÖKOSİT ALTGRUP DAĞILIMI (FORMÜLÜ) VENÖZ KAN PIHTILAŞMA VE (ANTİ-)KOAGÜLANLARIN ETKİSİ PIHTILAŞMA ZAMANININ TAYİNİ KANAMA ZAMANININ TAYİNİ (Duke Metodu)
E N D
UYGULAMALI ÇALIŞMA V KAN FİZYOLOJİSİ -2
DENEYLER KAPİLER KAN • TOPLAM LÖKOSİT SAYIMI • KANDAN YAYMA PREPARAT HAZIRLANMASI: LÖKOSİT ALTGRUP DAĞILIMI (FORMÜLÜ) VENÖZ KAN • PIHTILAŞMA VE (ANTİ-)KOAGÜLANLARIN ETKİSİ • PIHTILAŞMA ZAMANININ TAYİNİ • KANAMA ZAMANININ TAYİNİ (Duke Metodu) • KANDAN FİBRİN ELDESİ
TOPLAM LÖKOSİT SAYIMI Lökosit pipeti: + 11 e kadar ölçekli + Beyaz boncuklu SULANDIRMA KATSAYISI 1: 20 Sayma kamarası • Basamaklar: • Lökosit pipetine 0.5 çizgisine kadar kapiler kan alınır • Lökosit sulandırma eriyiği ile haznenin üst sınırına (11 çizgisi) kadar sulandırılır • Boncuk yardımıyla karıştırılır • Sayma kamarasına karışan kısım eklenerek mikroskopta sayılır
SAYMA KAMARASI 1/10 mm örnek derinliği
TOPLAM LÖKOSİT SAYISI 1 mm3=ml kanda4000-10000 1mm L 1mm SAYILAN DEĞER X (1-4) mm2 X 0,1 mm X 20 X 10 Sayılan alan Yükseklik Sulandırma katsayısı 1 mm3 = 1 mm3 kandaki toplam lökosit sayısı
DENEYLER KAPİLER KAN • TOPLAM LÖKOSİT SAYIMI • KANDAN YAYMA PREPARAT HAZIRLANMASI: LÖKOSİT ALTGRUP DAĞILIMI (FORMÜLÜ) VENÖZ KAN • PIHTILAŞMA VE (ANTİ-)KOAGÜLANLARIN ETKİSİ • PIHTILAŞMA ZAMANININ TAYİNİ • KANAMA ZAMANININ TAYİNİ (Duke Metodu) • KANDAN FİBRİN ELDESİ
PERİFERİK KANDAN YAYMA PREPARAT HAZIRLAMA İki lam: Birine 1 damla kapiler kan
Periferik Yayma Preparatı Gövde kısmı Kan sürüntüsünün baş kısmı Kuyruk kısmı
YAYMA PREPARATIN DEĞERLENDİRİLMESİ Boyanarak ışık mikroskobunda inceleme ile: Metilen mavisi + Eozin Asidik yapıları boyar Bazik yapıları boyar DNAMajör bazik protein (Örnek) Uygulanan yöntem: Giemsa Boyama • 5 ‘ May-Grünwald (Fiksasyon) Yıka • 10 ’ Giemsa Yıka • Kurut • İmersiyon objektifi (100X) ile imersiyon yağı damlatarak mikroskopta incelenir
PERİFERİK KAN LÖKOSİT ALTGRUP DAĞILIMI (FORMÜLÜ) % oranı Sayısı mm3=ml kanda Nötrofil% 40-75 1600-7500 Eozinofil % 1-6 40-600 Bazofil <% 1 <40-100 Monosit % 2-10 80-1000 Lenfosit% 20-45 800-4500
Normal Periferik Kan Eritrositler Lökositler Trombositler Sayım alanı
Lökosit Alt Grupları Kırmızı granül Parçalı çekirdek Mor ince granül Parçalı çekirdek Granül yok Parçasız çekirdek Mor granül Parçalı çekirdek Granül yok Çentikli çekirdek
Çomak ve Parçalı Nötrofil İnce mor granüllü
1 Lenfosit ve 1 Parçalı Nötrofil Yoğun yuvarlak tek çekirdek Dar sitoplazma
Monosit • Granül seçilmiyor • Çentikli geniş çekirdek • Geniş sitoplazma
Bazofil • Mor iri granüllü • Parçalı çekirdekli
Trombositler • Küçük parçacık görünümünde • Çekirdekli hücrelerin çekirdeklerine • yakın renkte • Kümeler halinde • Her alanda 1-2 adet
Analizatör Cihazlarla Lökosit Sayımı Sonucu Toplam lökosit sayısı 10^3=103, yani 1000 Lökosit sayısını söylerken binli sayılar olarak söylüyoruz Lökositleri % olarak verir L= Litrenin milyonda biri, yani mm3 karşılığı # (sayı) olarak da altgrupları verir
Analizatör Cihazlarda Lökosit Sitogramı Hücre büyüklüğü Her bir hücrenin büyüklüğünü ve granül içeriğini inceler ve iki boyutlu bir grafik olarak gösterir. Lökosit altgrupları bu ölçümlere göre değerlendirilir. Şüpheli durumlarda bu değerler periferik yayma preparatı ile doğrulanır. Granülarite
Analizatör Cihazlarda Lökosit Sitogramı Büyük ve granüllü hücreler: Nötrofiller Granülsüz ve küçük hücreler: Lenfositler Hücre artıkları
DENEYLER KAPİLER KAN TOPLAM LÖKOSİT SAYIMI KANDAN YAYMA PREPARAT HAZIRLANMASI: LÖKOSİT ALTGRUP DAĞILIMI (FORMÜLÜ) VENÖZ KAN PIHTILAŞMA VE (ANTİ-)KOAGÜLANLARIN ETKİSİ PIHTILAŞMA ZAMANININ TAYİNİ KANAMA ZAMANININ TAYİNİ (Duke Metodu) KANDAN FİBRİN ELDESİ
PIHTILAŞMA VE (ANTİ-)KOAGÜLANLARIN ETKİSİ Tüplere maddeler (0,2 ml) konulur ve kan (1 ml) eklenir: • + Kan • Sodyum (Na)-sitrat + Kan • Sodyum (Na)-sitrat + Kan + Kalsiyum (Ca) klorür • Heparin + Kan • + Kan + Kalsiyum (Ca) klorür • Pıhtılaşma gözlenerek değerlendirilir. • Yalnız kan olan tüpe göre farklar gözlenir.
KOAGÜLASYON REAKSİYONU (KASKADI) PIHTILAŞMA ZAMANI (GENEL TEST) HMWK Kallikrein İntrensek yol Doku faktörü Ekstrensek yol XII XI IX VIII PZ aPTZ VII Aktive parsiyel tromboplastin zamanı Protrombin zamanı V+X Trombin Fibrinojen Fibrin
KANAMA ZAMANININ TAYİNİ • Duke Metodu (Normal değeri: 1 – 3 ’) • Parmak ucundan lanset kesisi ile uygulanır. • Düzenli aralıkla (10 “) filtre kağıdı ile kan uzaklaştırılarak kanamanın durma süresi saptanır.
KANDAN FİBRİN ELDESİ Venöz kan örneği porselen yüzeyde “pıhtılaştırılırken” oluşan fibrin yapısı lifler halinde süpürge çöpünde gözlenir!! Fibrinin beyaz, şeffaf yapısı ve arasında sıkışan eritrositler ve pıhtı yorumlanır.