1 / 29

Kokainle Oluşan Karaciğer Hasarına Hem Oksijenaz-1 ‘in Etkisi

Kokainle Oluşan Karaciğer Hasarına Hem Oksijenaz-1 ‘in Etkisi. Banu Kırgız , Serdar Öztezcan, Murat Giriş, *Yeşim Erbil, Gülçin Aykaç-Toker, Müjdat Uysal İ.Ü. İstanbul Tıp Fakültesi Biyokimya ve *Genel Cerrahi Anabilim Dalı . Kokain.

spiro
Télécharger la présentation

Kokainle Oluşan Karaciğer Hasarına Hem Oksijenaz-1 ‘in Etkisi

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript


  1. Kokainle Oluşan Karaciğer Hasarına Hem Oksijenaz-1 ‘in Etkisi Banu Kırgız, Serdar Öztezcan, Murat Giriş, *Yeşim Erbil, Gülçin Aykaç-Toker, Müjdat Uysal İ.Ü. İstanbul Tıp Fakültesi Biyokimya ve *Genel Cerrahi Anabilim Dalı

  2. Kokain • Koka bitkisinin yapraklarından elde edilen benzoik asit ve metil ekgonin esterleşmesinden oluşmuş bir alkaloiddir. • Güçlü bir santral sinir sistemi uyaranıdır.

  3. Kokain Toksisitesi • Bağımlılık yapma potansiyeli oldukça fazladır. • Kardiovasküler toksisite • Serebrovasküler bozukluk

  4. Kokain Toksisitesi • Teratojen ve doğum sorunları • Karaciğer hasarı • Ciddi bir medikal ve sosyal problem

  5. Kokain Metabolizması H3C N COOCH3 KOKAİN Benzoil ekgonin Enzimatik olmayan hidroliz Enzimatik hidroliz serum kolinesterazları karaciğer esterazları Ekgonin Metil Esteri Sitokrom p-450 OOC-Phe Sitokrom p-450 N-HİDROKSİ- NORKOKAİN Sitokrom p-450 NORKOKAİN NİTROKSİT NORKOKAİN FADM HN .O FADM NADPH sitokrom p-450 redüktaz OH N N

  6. Hem Oksijenaz • Hem oksijenaz hemen tüm türlerde ve bunların çeşitli dokularında yaygın olarak bulunan mikrozomal bir enzimdir. • Hem katabolizmasında hız kısıtlayıcı enzim olarak görev yapar.

  7. Hem Oksijenaz • Hemdekiprotoporfirin halkasının alfa-meten köprüsünü yıkarak; CO, serbest Fe+2ve biliverdin oluşumuna neden olur.

  8. Hem Oksijenaz • Hem oksijenazın farklı genlerle kodlanan 3 izoenzimi vardır; HO-1, HO-2, HO-3 • HO-2, HO-3 yapısal formları iken HO-1 indüklenebilir formudur.

  9. HO-2 • Fizyolojik koşullarda başlıca izoenzim olan HO-2 36kDa ağırlığındadır. • Beyinde ve testiste yüksek düzeyde aktivite göstermektedir. • HO-2’ninekspresyonuadrenalglukokortikoidlerle sağlanmaktadır.

  10. HO-3 • Yapısı HO-2’ ye benzeyen HO-3 33 kDa ağırlığındadır. • Miktarının ve aktivitesinin düşüklüğü araştırmaları ve fonksiyonları hakkında yeterli bilgi edinilmesini zorlaştırmaktadır.

  11. HO-1 • İndüklenebilir form olan HO-1 32 kDa ağırlığındadır ve aynı zamandaHSP-32 olarak adlandırılan özgün bir ısı şok proteinidir. • HO-2 ye göre nispeten düşük olan HO-1 aktivitesinin en yüksek olduğu yer eritrosit yıkımının gerçekleştiği dalaktır.

  12. HO-1 • HO-1’in hem katabolizmasıdışında, hücresel düzenleme ve koruma mekanizmalarında önemli rol oynadığına dair bulgular gün geçtikçe artmaktadır. • Son yıllarda HO-1 üzerine yapılmiş birçok çalışmada bu enzimin; • antioksidan • antiapoptotik • antiinflamatuar etkilerinden söz edilmektedir.

  13. HO-1 • HO-1’in bu etkilerinden ürünleri olan • CO • Biliverdin BİLİRUBİN • Fe+2 FERRİTİN sorumlu olduğu bildirilmektedir.

  14. HO-1 indüksiyonu • iskemi-reperfüzyon hasarı • hipoksi • okside LDL • lipopolisakkarid • ısı • sitokinler • ağır metaller • endotoksinler • UV • Hemgibi organizmada stres yaratan çeşitli faktörlerle indüklendiği birçok çalışma ile gösterilmiştir.

  15. Amaç • Kokain ile oluşan karaciğer hasarında sitokrom P450 yolunun birincil öneme sahip olupolmadığını görmek istedik. • Oluşan karaciğer hasarının ne ölçüde oksidatif strese bağlı olarak geliştiğini araştırdık.

  16. Amaç • Kokainle oluşan karaciğer hasarına karşı dokunun HO-1 cevabını incelemek istedik. • HO-1 inhibitörü uygulayarak HO-1 in koruyucu potansiyelini görmeyi amaçladık.

  17. Gereç ve Yöntem • Balb/c fareler (28-30 g) • Gruplar (n=6) • Kontrol • Kokain • Kokain + SKF-525A • Kokain + Zn protoporfinin • Zn protoporfinin • SKF-525A • NaOH

  18. Gereç ve Yöntem • Binge model • Kokain, 2 kez/3 gün 25 mg/kg i.p. • ZnPP (25mmol/kg) i.p. • SKF-525A (30mg/kg) i.p. • 4.gün hayvanlar öldürüldü.

  19. Gereç ve Yöntem • Plazmada ALT • Karaciğerde • histopatolojik inceleme • oksidatif stres parametreleri • MDA • GSH

  20. Gereç ve Yöntem HO-1protein ekspresyonuWestern Blotting yöntemi ile analiz edildi; • SDS-PAGE • PVDF Membran transferi • Antikor inkübasyonu • ECL görüntülenmesi • imaj analiz programı ile değerlendirildi. • Sonuçlar ortalama ± SD (p<0,05) olarak verildi. • İstatistiksel analizler için ANOVA testi kullanıldı.

  21. Bulgular (ALT) c b a a a a a

  22. Histopatolojik Bulgular • Kontrol, SKF-525A ve NaOH grubunda normal karaciğer yapısı görüldü. • ZnPP ve Kokain+SKF-525A grubunda hafif yağlanma bulguları gözlendi. • Kokain grubunda portal alanlarda iltihapsal hücre infiltrasyonu,parankim nekrozu, hyalinleşme ve vakuollu dejenerasyon saptandı. • Kokain+ZnPP grubunda hasar daha ileriye giderek sentrilobüler alanlara uzandığı, lobüler yapıda ve trabekülasyonda bozulmalar olduğu gözlendi.

  23. Bulgular (MDA) b b a a a a a

  24. Bulgular (GSH) c bc bd ad ad ad a

  25. Bulgular (HO-1 Protein Ekspresyonu) b b a a a a a

  26. Sonuç • Kokainin miktarı ve uygulama şekli ile istenilen karaciğer hasarı oluşturulmuştur. • Kokainin karaciğerde oluşturduğu hasardan gerçekten sit P450 kullanan yolun sorumlu olduğu görülmüştür. • Kokainin hepatotoksik etkisinde oksidatif yolda oluşan radikaller etkilidir.

  27. Sonuç • Kokain karaciğerde HO-1 enzim ekspresyonunu arttırdı. • HO-1 enzim aktivasyonunun inhibisyonu ile karaciğerde oluşan hasarın artması bunun bir koruyucu etki oluşturduğunu göstermektedir.

  28. Sonuç • HO-1 in aktivasyonu ve/veya sentezini arttıran çeşitli maddelerin, yakın bir gelecekte oksidatif strese bağlı olarak gelişen çeşitli organ hasarlarını önlemede bir araç olabileceğini düşündürmektedir.

More Related