1 / 13

DOSAGEM C-Hb e M-Hb

DOSAGEM C-Hb e M-Hb. CO-OXIMETRO Princípio do método : Amostras de sangue total são quimicamente hemolisadas por íntimo contato com agente surfactante não iônico. O sangue hemolisado é então analisado espectrofotometricamente , através de um fluxo em cubeta termostática.

tana
Télécharger la présentation

DOSAGEM C-Hb e M-Hb

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. DOSAGEM C-Hb e M-Hb

  2. CO-OXIMETRO • Princípio do método: Amostras de sangue total são quimicamente hemolisadas por íntimo contato com agente surfactante não iônico. O sangue hemolisado é então analisado espectrofotometricamente , através de um fluxo em cubeta termostática. • O sangue total é aspirado pelo instrumento, misturado com diluente, hemolisado, e mantido em temperatura constante na cubeta. • A absorbância é gerada através de medida de luz monocromática em seis comprimentos de onda específicos (isolados no range de 530 a 670nm) que passa através da cubeta captada por um foto-detector.

  3. O microcomputador mede Hemoglobina Total (tHb), percentual de Oxihemoglobina (%O2Hb), percentual de Carboxihemoglobina (%COHb), percentual de Metahemoglobina (%MetHb) e percentual de Deoxyhemoglobina (%HHb). • Absorbâncias: • Medida do branco – obtida com seis leituras de absorbância da solução zero (zeroing solution); • Medida da amostra – amostra diluída e hemolisada (sangue, controle ou calibrador) obtida com seis leituras de absorbância;

  4. Cálculo da absorbância – As seis absorbâncias do branco são subtraídas das seis absorbâncias obtidas para a amostra: • A(NET) = A(SAMPLE) – A(BLANK) • Onde A = abs obtida em cada comprimento de onda • Cálculo da concentração: • È calculado através da concentração fracional de várias hemoglobinas presentes na amostra: • A = K1C1+2C2+3C3+......C • C = concentração de diferentes espécies de Hb • K = escala constante utilizada para calibração do processo tHb •  = coeficiente da matrix • A = Valor de absorbância no sangue nos diferentes comprimentos de onda

  5. Concentrações são utilizadas para determinar tHb e percentual relativo de espécies de Hb. • O valor de concentração da hemoglobina total (g/dL) é a soma das quatro concentrações: • CtHb = C(HHb)+C(O2Hb)+C(COHb)+C(MetHb) • Parâmetros de medida ( como todos os parâmetros são calculados): • Concentração de Hemoglobina Total: • A concentração de hemoglobina total é a soma da concentração das espécies de hemoglobina HHb, O2Hb, COHb e MetHb. • Valor de referência para adultos: 12.0 a 18.0g/dL • THb = (HHb+O2Hb+COHb+MetHb) x K

  6. Porcentagem deOxihemoglobina (%O2Hb) • Valor de referência para sangue arterial: 94.0 a 97.0% • %O2Hb = O2HbX 100 • HHb+O2Hb+COHb+MetHb • Porcentagem deCarboxihemoglobina (%COHb) • %COHb = COHbX 100 • HHb+O2Hb+COHb+MetHb

  7. Porcentagem de Deoxyhemoglobina %HHb): • %HHb = HHbX 100 • HHb+O2Hb+COHb+MetHb

  8. Detecção/correção de interferentes: • Detecção de sulfahemoglobina: • Devido a características espectrais do comprimento de onda utilizado no IL 682, a SHb pode interferir em medidas de outras hemoglobinas. A presença de sulfahemoglobina causa um aparente acréscimo de MetHb e um resultado negativo de carboxihemoglobina. EQUIPAMENTO SINALIZAALERTA: • SulfHb Warning – Sulfahemoglobina detectada superior a 1,5%ERROnão liberar resultado. • High SulfHb Warning – equipamento não libera resultado.

  9. Correção de turbidimetria: • Presença de lípides pode interferir na medida de absorbância e afetar os resultados do Co-oxímetro. Existe um sistema de correção automático. • Para valores de triglicérides de aproximadamente 1500mg/dL (acima de 3%) é liberado para o operador uma mensagem de alta turbidimatria . EQUIPAMENTO SINALIZAALERTA: High turbidity – não liberar resultado.

  10. Limitações: • Range Resolução Inexatidão * Imprecisão** • tHb 5-20g/dL 0,1g/dL + 0,3g/dL 0,2g/dL • O2Hb 0-100% 0,1% +1% 0,5% • COHb 0-100% 0,1% +1% 0,5% • HHb 0-100% 0,1% +3% 1,5% • MetHb 0-10% 0,1% +1% 0,5% • MetHb 10-100% 0,1% +10%relative 1,5%

  11. Exatidão definida como 95% dos limites de confiança para amostras com MetHb de 0 – 10% e hemolisadas no PH 7.0 a 7.4; • Precisão de um desvio padrão. • Interferências: • Sulfahemoglobina: Presença de SHb pode causar um aparente aumento de metahemoglobina e um decréscimo de carboxihemoglobina e Oxyhemoglobina • Bilirrubina: pode causar um decréscimo de 1,5% de Oxyhemoglobina e pode ter um acréscimo de 1 a 2% de carboxihemoglobina em um nível de bilirrubina de 30mg/dL. • Turbidimetria: acima de 3% interfere nos resultados • Indocyanine green (marcador de fluorescência): alterações de resultados do equipamento

  12. Azul de metileno: acréscimo de metahemoglobina e diminuição de oxyhemoglobina • Algumas drogas e substâncias que podem alterar hemoglobina a metahemoglobina causando metahemoglobinemia. Sulfahemoglobina podem ser formadas com o uso de certas drogas, causando interferência.

  13. Especificações do equipamento: • Amostra sangue total • Anticoagulante EDTA ou heparina • Quantidade de amostra 65L • Fluxo de reagentes Ciclo: Zero Diluent Cleaning • Sample 0.6mL 0.12mL NA • Prime 2.0mL 0.92mL 0.28mL • Clean 1.3mL 0.27mL 0.34mL • Zero ref. 0.6mL 0.10mL NA • Tempo do ciclo de amostra 58 segundos •  monitorados 535.0nm, 585.2mn, 594.5mn, 626.6mn, 638.3mn, 667.8nm • Temperatura ambiente 15-32º C • Humidade ambiente  90%

More Related