1 / 21

N -(2-hydroxypropyl)meta k rylamid (HPMA)

Využití “Fluorescence Lifetime Microscopy” pro analýzu intracelulární lokalizace polymerních terapeutik nesoucích doxorubicin.

walden
Télécharger la présentation

N -(2-hydroxypropyl)meta k rylamid (HPMA)

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Využití “Fluorescence Lifetime Microscopy” pro analýzu intracelulární lokalizace polymerních terapeutik nesoucích doxorubicin Hovorka Ondřeja, Šubr Vladimírb,Větvička David a, Kovář Lubomíra, Strohalm Jiříb, Strohalm Martina , Benda Aleš c,Hof Martinc, Ulbrich Karelb, Říhová Blankaa a Mikrobiologický ústav, AVČR v.v.i, Vídeňská 1083, 142 20, Praha 4 b Ústav Makromolekulární Chemie, AVČR v.v.i, Heyrovskéhonám. 2, 162 06, Praha6 cÚstav Fyzikální Chemie J. Heyrovského, AVČR, v.v.i., Dolejškova 2155/3, 182 23 Praha 8

  2. N-(2-hydroxypropyl)metakrylamid (HPMA)

  3. N-(2-hydroxypropyl)metakrylamid (HPMA) doxorubicin λex = 540nm, λem 612

  4. N-(2-hydroxypropyl)metakrylamid (HPMA) doxorubicin λex = 510nm, λem590 MW = 20kDa

  5. Intracelulární lokalizace doxorubicinu po inkubaci buněk s polymerním konjugátem jaderná membrána

  6. Intracelulární lokalizace doxorubicinu po inkubaci buněk s polymerním konjugátem jaderná membrána membrána andozómů

  7. Intracelulární lokalizace doxorubicinu po inkubaci buněk s polymerním konjugátem jaderná membrána membrána andozómů Golgiho aparát

  8. 7,8-dehydro-9,10-desacetyldoxorubicinone

  9. 7,8-dehydro-9,10-desacetyldoxorubicinone

  10. Emisní spektra doxorubicinu a D* při 488nm excitaci ve vodě kvantový výtěžek D* je 10-20 vyšší v závislosti na prostředí……

  11. doxorubicin D*

  12. spektrální unmixing směsi Dox + D* (5:1) založený na naměřených spektrech

  13. spektrální analýza polymerního konjugátu spektrální unmixing založený na naměřených spektrech

  14. Doxorubicin D*

  15. stanovené hodnoty „fluorescence lifetime“ pro Dox, D* a polymerní konjugát v roztoku bez buněk a v médiu zbaveném buněk

  16. distribuce hodnot „fluorescence lifetime“ pro Dox, D* a polymerní konjugát v buněčné kultuře

  17. doxorubicin D* Dox+D* (5:1) HPMA-Dox [ns]

  18. ZÁVĚR FLIM je technika která umožní oddělit i fluorochromy, jejichž emisní spektrální charakteristika se výrazně překrývá a algorytmy pro spektrální unmixing v takových případech selhávají Stanovili jsme lifetime pro Dox, D* a polymerní konjugát a podařilo se nám upřesnit a potvrdit jeho intracelulární distribuci.

  19. Ústav Makromolekulární Chemie, AVČR v.v.i, Mikrobiologický ústav, AVČR v.v.i, Ústav Fyzikální Chemie J. Heyrovského , AVČR, v.v.i., Hovorka O. Cimburek Z. Větvička D. Kovář L. Strohalm M. Říhová B. Benda A. Hof M. Šubr V. Strohalm J. Ulbrich K.

More Related