170 likes | 356 Vues
PYRUVATE CARBOXYLASE. SITI NURFAJRIAH 20510018. PENDAHULUAN MEKANISME REAKSI ISOLASI DAN PEMURNIAN DEFESIENSI PC. PENDAHULUAN. Pyruvate carboxylase (PC) memiliki nomor enzim 6.4.1.1
E N D
PYRUVATE CARBOXYLASE SITI NURFAJRIAH 20510018
PENDAHULUAN • MEKANISME REAKSI • ISOLASI DAN PEMURNIAN • DEFESIENSI PC
PENDAHULUAN • Pyruvatecarboxylase (PC) memilikinomorenzim 6.4.1.1 • Piruvatkarboksilaseadalahenzimdarikelasligase yang mengkatalisiskarboksilasipiruvatmembentukoksaloasetat (OAA).
PC merupakanenzimallosterik yang diaktifkanolehefektornyayakniAsetil-CoA • PC mengandung ion Mn2+ yang terikatkuatdangugusprostetik yang terikatsecarakovalenyakni biotin • PC berbentuk tetramer yang terdiriatas 4 subunit yaitu BC (biotin carboxylase), CT (carboxytransferase), BCCP (biotin-carboxy carrier protein), dan PT (PC tetramerization)
MEKANISME REAKSI Mekanismereaksidiatasterjadiduatahapreaksiparsial
MEKANISME KINETIK • Mekanisme Ping Pong Bi BiUniUni
ISOLASI DAN PEMURNIAN • PC disubklondari Staphylococcus aureusdalamvektor pET28a kemudiandiekpresikanpadaE. coli. • Sel yang mengekspresikanPC kemudiandimurnikandengan : 1. Pestle & Mortar (dengan N2 cair) 2. Centrifuge 3. Dialisis / KromatografiPenukar Ion • Aktivitas PC dianalisisdengan SDS-PAGE danspektrofotometer Massa
DEFISIENSI PC • Kekurangankarboksilasepiruvatmerupakangangguanbawaan yang menyebabkanasamlaktatdansenyawaberacunlainnya yang berpotensiuntukterakumulasidalamdarah • Adaduajeniskekurangan PC berdasarkantingkatkeparahannya: 1. tipe 1: terjadipenumpukanasamlaktatdalamdarah (asidosislaktit) 2. tipe 2 : terjadipenumpukanamoniadalamdarah (hiperamonemia)