990 likes | 1k Vues
slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve slideserve
E N D
اهمية فيلم الدم لتقييم الشكل الموفولوجى لخلايا WBCو RBCs و PLT وهذا يساعد فى تشخيص مجموعة كبيرة من امراض وسرطانات الدم يمكن الكشف عن اخطاء تحليل صورة الدم سواءا مانيوال او بالجهاز لتحديد نسبة كل نوع من خلايا الدم البيضاء WBCs
الفرد Blood film التثبيت Fixation الصبغ Staining الفحص Exam مراحل فيلم الدم
5 - 10 ul Fresh Whole blood
3 2 1
التحكم فى الفرد • Size of blood drop • Too much blood makes the blood film thicker • Too lowbloodand the smear will be too thin • Angle • Too high and the smear will be too thick • Too low and the smear will be too thin • Speed • high speed and the smear will be too thick • low speed and the smear will be too thin • Pressure on the push slide • low Pressure and the smear will be too thick • high speed and the smear will be too thin
high HCT زاوية اقل low HCT زاوية اكبر
أخطاء فرد فيلم الدم • سبب المشكلة • سطح الشريحة المتحركة خشن غير املس • حلها • تنعيم السطح بسنفرة زجاج
أخطاء فرد فيلم الدم • سبب المشكلة • اهتزاز اليد او التردد اثناء حركة الشريحة • حلها • الحفاظ على سرعة ثابتة اثناء الحركة
أخطاء فرد فيلم الدم • سبب المشكلة • الشريحة المتحركة سريعة • حلها • تبطيئ الحركة قليلا
أخطاء فرد فيلم الدم • سبب المشكلة • نقطة الدم قليلة • حلها • استخدام نقطة دم اكبر
أخطاء فرد فيلم الدم • سبب المشكلة • التسرّع فى تحريك الشريحة قبل انتشار نقطة الدم بالعرض • حلها • اعطاء نقطة الدم فرصة لتنتشر قبل تحريك الشريحة
أخطاء فرد فيلم الدم • سبب المشكلة • شوائب زيتية او دهنية على الشريحة الثابتة • حلها • نقع الشريحة فى الصابون السائل طول الليل • ثم غسلها بماء الحنفية • ثم نشطفها بالماء المقطر • ثم مسحها بالكحول الميثيلى وتجفيفها وتغطيتها لمنع الاتربة
أخطاء فرد فيلم الدم • المشكلة • الفيلم غير متماثل • حلها • الضغط بنفس المقدار على كلا الجانب الايمن والايسر للشريحة المتحركة
أخطاء فرد فيلم الدم • سبب المشكلة • التأخر فى تجفيف فيلم الدم • حلها • عدم التأخر فى تجفيف الشريحة بعد الفرد
اخطاء فى الفرد ناتجة من من طبيعة العينة • Cold agglutination - RBCs will clump together. Warm the blood at 37° C for 5 minutes, and then remake the smear. • Lipemia - holes will appear in the smear.There is nothing you can do to correct this. • Rouleaux - RBC’s will form into stacks resembling coins. There is nothing you can do to correct this
يجب تجفيف الشريحة فورا بالتلويح بها فى الهواء • ممنوع التجفيف بالنار • ممنوع النفخ فيها لان هواء الفم به رطوبة .. تصبح Crenated • الغمس لمدة ثوانى فى الكحول الميثيلى • الصبغات بتحتوى على ماء وعدم التثبيت قد يسبب فقدان الدم من الشريحة
فكرة الصبغ • Wright’s Stain • Methylene blue • Basic • stains acidicand basophilic cellular components • Stain Nucleus • Eosin • Acidic • stains basic and eosinophilic • Stain eosinophilic granules
.A الطريقة الاولى بستخدام صبغة ليشمان اغسل برفق بماء مقطر 1 2 لا تنسى التجفيف فورا 2 دقيقة 5 – 7 دقائق 100% 50%
طريقة صبغ فيلم الدم Blood film • .A الطريقة الاولى باستخدام صبغة ليشمان • اغمس الشريحة فى كوب يحتوى على صبغة ليشمان لمدة دقيقتين (أو أكثر إذا كانت الصبغة محضرة حديثًا) • بعد الدقيقتين خفّف صبغة ليشمان فى الكوب الى النصف بالماء ثم اترك الشريحة 5 – 7 دقائق فى الصبغة المخفّفة • نخرج الشريحة ونغسلها بالماء برفق • نمسح الجزء السفلى من الشريحة الخالى من الدم بالقطن • نضع الشريحة فى وضع رأسي حتى تجفّ
الطريقة الثانية باستخدام Rapid stain اغسل برفق بماء مقطر 1 3 لا تنسى التجفيف فورا 2 3 ثانية 10 ثانية 20 ثانية Methylene blue Eosin Alcohol (Methanol)
الصبغة قاعدية الصبغة حامضية الصبغة مظبوطة
التحكم فى الصبغة عن طريق • زيادة او انقاص تركيز كل مكون من مكونات الصبغة على حدا • درجة حموضة الصبغة Ph • وقت الغمس • كمية الماء فى الصبغة • وقت الغسيل بعد الغسل • وجود ترسيبات فى الصبغة (يجب فلترة الصبغة قبل الاستخدام)
طريقة الفحص الفحص بالعدسة الزيتية باستخدام زيت سيدر
العد التفريقى لتحديد نسبة كل نوع من خلايا الدم البيضاء WBCs يتم عد حوالى 100 خلية بيضاء كل ما كان العدّ اكتر كل ما كانت النتيجة ادق مثال : تم عدّ 50 خلية بيضاء وبها 30 خلية نيتروفيل × عدد خلايا النيتروفيل 100 = نسبة خلايا النيتروفيل العدد الكلى للخلايا 30 × % 60 100 = = 50
Differential count Neutro Lympho Mono Eosino Baso
انواع خلايا الدم الطبيعية • Rbcs • Platelet • WBCs • Neutrophil • Band • Segmented • Eosinophil • Basophil • Lymphocyte • Small • Large • Monocyte
RBCs • حجم الخلية • 7 to 8 μm • النواه • لا توجد نواة • السيتوبلازم • لونه مثل سمك السالامون او وردى • يوجد شحوب مركزى يمثل ثلث او ربع الخلية
Neutrophil (Segmented) • حجم الخلية • الحجم : 10 - μm 15 • النواه • النواة عبارة عن 2 – 5 فصوص تتصل مع بعضها بخيوط كروماتين • النواة خالية من النوية • نسبة النواة الى كمية السيتوبلازم • حجم السيتوبلازم أكبر من حجم النواة • حبيبات السيتوبلازم • الGranules صغيرة • Neutrophilic • متعادلة ليست حامضية ولا قاعدية • صبغة السيتوبلازم • (لون السيتوبلازم باهت) All WBCs
Neutrophil (Segmented) All WBCs