Genetické polymorfismy v kriminalistické historii

1. Genetické polymorfismyv kriminalistické historii Ivan Mazura

2. Historie genetických polymorfismů • 1980 – Ray White popisuje první polymorfní RFLP marker • 1985 – Alec Jeffreys objevuje první VNTR multilokusové polymorfismy • 1985 – PCR reakce popsána • 1988 – FBI poprvé používá DNA analýzu pro případ s kriminálním podtextem • 1990 – první zmínka o „short tandem repeats“ polymorfismech v odborné literatuře • 1996 – zpráva FBI pro kongres USA hovoří o přínosu DNA analýzy, jak pro potvrzení pachatele, tak pro včasné vyloučení osob z podezření

3. Historie genetických polymorfismů • 1998 – jsou definovány a dohodnuty polymorfismy CODIS systému • 2000 – STR polymorfismy na kapilární elektroforéze jsou považovány za slušnou rutinní analýzu kriminálních činů • 2001 – 16 lokusová sada Power Plex v jediné reakci • 2002 – připraven Identifiler s 5 fluores- cenčními barvami pro ABI Prism 3100 • 2004 – Y – STRs polymorfismy nalezeny a využity pro genetickou identifikaci • 2006 – DNA analýza je nedílnou součástí vyšetřování závažné trestné činnosti a pomocníkem v občansko-právních sporech

4. Klíčové případy sledované médii • 1986 - Alec Jeffreys řeší případy identifikace emigrantů a krátce poté i případ dvojnásobné vraždy pomocí VNTR – polymorfismů • 1988 – opakovaná znásilnění mladých žen potvrzena genetickou analýzou v případu Tommy Lee Andrews vs. Stát Florida • 1994 - dvojnásobná vražda mladé ženy a mladého muže s vyšetřováním podezřelé osoby, hráče amerického fotbalu a neúspěšného herce O.J.Simpsona

5. Co jsou STR polymorfismy? • STR sekvence-mikrosatelity • Nejčastější opakování 2-6 nukleotidů • Známo přes 20.000 tetra-nukleotidových sekvencí STR • Známo více než 1 milion všech STR polymorfismů • STR – polymorfismy zaujímají cca 3% celého lidského genomu

6. Pokroky v typizaci lidské DNA • 1985-1996 RFLP -multilokusové VNTR -jednolokusové VNTR • 1991-1996 PCR - DQ alpha, PolyMarker - D1S80 - single STR analýza - multi STR analýza • 2000-2006 SNP jednonukleotidové polymorfismy detekované oligonukleotidovými čipy

7. Výhody STR-genetické analýzy • Informace z malého množství DNA a degradovaných vzorků • Vysoká diskriminace v důsledku multiplex reakce v jediném testu • Komerčně připravené, snadno použitelné, soupravy • Dohoda o uniformní sadě STR-polymorfismů pro mezinárodní porovnávání DNA profilů • Velice krátké STR - amplifikáty

8. Možnosti využití identifikace lidské DNA • Možnosti porovnání DNA profilů podezřelých osob s profily v databázích • Testování otcovství a mateřství • Analýza historické DNA • Identifikace pohřešovaných osob • Identifikace osob při hromadných neštěstích • Identifikace osob v průběhu vojenských operací • Dodatečné usvědčování pachatele pomocí databáze DNA profilů

9. Budoucí výzvy forenzní genetiky • Určování stáří vzorku pomocí stupně degradace mRNA molekul • Určování stáří jedince pomocí struktury telomer • Využití laserové mikro-disekce • Důkladnější analýza vzorků směsí dvou i více biologických materiálů • Nové postupy pro analýzu biologických vzorků degradovaných chemickými látkami • Nové postupy pro analýzu vzorků obsahujících látky inhibující PCR reakci

10. Použití mitochondriální DNA • 1995-1996 - Bryan Sykes se zabývá podrobně využitím některých oblastí mtDNA pro forenzní účely a tvorbu haploskupin v populacích • Výhoda analýz těchto molekul je jejich rozměr a kruhová struktura

11. Forenzní genetika a rok 2006 Genetickými identifikacemi se zabývá mnoho státních laboratoří V některých zemích jsou využívány rovněž laboratoře privátní Analyzovány jsou ročně desítky tisíc vzorků DNA Řada zemí Evropy a Asie má své vlastní forenzně genetické programy Objevují se další např. “wild-life“ forenzně genetické laboratoře

12. Děkuji za pozornost