Respuestas fisiológicas de Neotrypaea uncinata ( Decapoda :

1. Respuestas fisiológicas de Neotrypaeauncinata (Decapoda: Thalassinidea) a la hipoxia y al parasitismo por Ionellaagassizi (Isopoda: Epicaridea) Autores: Lorena P. Astete-Espinoza1, Claudia F. Garrido1 y Cristian W. Cáceres1 Javi González Vázquez

2. Introducción: • Crustáceo excavador. • Habita playas y estuarios. • Su condición excavadora le expone a situaciones deficitarias de oxígeno. • Mecanismos compensatorios definidos en este tipo de situaciones: • Aumento en la [ emocianina] • Aumento de la afinidad de la emocianinapor el oxígeno • Cambios en el metabolismo de la glucosa y del lactato (aumenta y es usado para producir glucosa) • Neotrypaeauncinataparasitado desde etapas tempranas por Ionellaagassizi. • En la cámara branquial (rotura) • Hipótesis: la presencia del parásito Ionellaagassiziafecta a los mecanismos • respiratorios y a las vías energéticas de Neotrypaeauncinata, limitando su capacidad para soportar periodos de déficit de oxígeno.

3. Materiales y métodos: • Recolección de ejemplares: • Número: 300 ejemplares. • Localización: Lenga, Bahía San Vicente, zona centro sur de Chile (36º 45’S;73º10’W) • Método: bomba extractora manual. • Medidas y tratamientos previos : • 135 de los 300, fueron pesados y medido su cefalotorax (LCT) • Revisión visual de la presencia o ausencia del parásito. • Experimentos: • 55 camarones se usaron para evaluar el efecto del parásito en el área superficial branquial. • 80 camarones expuestos a diferentes condiciones de [oxígeno]

4. 40 sin parasitar Recipientes 400 ml Salinidad= mar Tª= 14°C 80 camarones 40 parasitados 2 x 4 Tratamientos experimentales 1º Control Normoxia N= 10 [oxígeno]= 4,5 mg/l 2º Hipoxia 3h N=10 [oxígeno]= 1 mg/l 3º Hipoxia 24h N=10 [oxígeno]= 1 mg/l 4º Hipoxia 72h N=10 [oxígeno]= 1 mg/l Hipoxia generada mediante burbujeo de nitrógeno. Al terminar la exposición se les extraen 0,3 ml de hemolinfa mediante punción en la zona pericárdica, para su análisis.

5. Análisis a partir de la hemolinfa extraida: • Determinación de proteínas totales: método de Biuret (Layne 1957) • Determinación de los niveles de hemocianina: método descrito por Chen & Cheng (1993). Se utilizó el coeficiente de extinción de 17,26 E mM 1cm-1 (Nickerson & Van Holde1971) • Determinación de los niveles de glucosa: método enzimático de punto final (Trinder) • Determinación de los niveles de Lactato: por colorimetría. • Determinación de los niveles de LDH: se usó como sustrato piruvato y NADH red. • Relación entre área branquial y tamaño corporal de individuos parasitados y no parasitados: análisis de regresión lineal. • Evaluación del efecto del tiempo de exposición a condiciones de hipoxia y el efecto del parasitismo sobre los niveles de los metabolitoshemolinfáticos: análisis de varianza. (ANDEVA)

6. Resultados:

9. Discusión: • Bahía San Vicente: constantes fluctuaciones de salinidad, temperatura, oxígeno y sedimentos con bajo potencial redox, característico de ambientes hipóxicos. • Estas fluctuaciones condicionan la fisiología de los camarones. • Además se suma el parasitismo por Ionellaagassizi,que a nivel individual afecta la reproducción de suhospedador. • La presencia de Ionellaagassizien la cámara branquial del camarón Neotrypaeauncinataafecta la superficie de intercambio gaseoso, presentando una disminución significativa del área branquial en comparación con los organismos no parasitados (Fig. 1) • Se ha descrito que en condiciones de falta de oxígeno los crustáceos favorecen la síntesis de hemocianina. (Fig. 2) • En normoxia se observan niveles similares de hemocianina. • Animales muy tolerantes al Lactato, acostumbrados a periodos de hipoxia, la [lactato] aumenta en las primeras horas (sustrato gluconeogénico) y bajan en horas posteriores • (Fig. 2) (lactato deshidrogenasa)

10. CONCLUSIÓN Los niveles de lactato encontrados en Neotrypaeauncinata, correlacionados con las concentraciones deglucosa estarían indicando que estos individuos utilizaríanalternativamente vías anaerobias ya que debido a suconducta excavadora en un medio de concentraciones deoxígeno variables. Contrario a lo esperado, esta respuestaadaptativa no estaría más acentuada en los individuosparasitados, debido a un efecto compensatorio a nivelmolecular o fisiológico que le permitiría al camarónfantasma contrarrestar el efecto del parasitismo o elparásito genere bajas demandas a su hospedador.