1978 年 7 月 25 日，世界上第一个试管婴儿路易斯 · 布朗在英国出生。她是由 Steptoe 和 Edwards 利用体外受精和胚胎移植技术，由代孕母亲生出的第一个试管婴儿。

资料 1978年7月25日，世界上第一个试管婴儿路易斯·布朗在英国出生。她是由Steptoe和Edwards利用体外受精和胚胎移植技术，由代孕母亲生出的第一个试管婴儿。据官方统计，英国1985～1995年间，诞生“试管婴儿”达2.2万名，成为治疗不育不孕症的重要手段之一。

第二节、胚胎工程 1、概念：体外受精和胚胎体外培养胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞通常指对高等脊椎动物，特别是哺乳动物的受精卵或早期胚胎，进行的各种操作技术。试管动物 2、研究的重要内容(技术手段)：胚胎干细胞培养胚胎干细胞核移植

一、体外受精和胚胎体外培养 (一)体外受精采集雌性动物成熟的卵细胞和雄性动物的精子，使其在试管中受精。 1、概念： 2、过程：（1）精子的收集和获能；（2）卵母细胞的收集和培养；（3）获能精子和卵细胞的受精；形成受精卵 3、过程：

(二)胚胎体外培养 应用人工创造的环境，对获取的早期胚胎进行体外培养。胚胎体外培养的培养液有什么要求？ • 培养液：（不同时期成分不同）培养液: 水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等。其他条件：适宜的温度等。

【特别提醒】“试管动物”并不是从试管中呱呱坠地的，由于没有任何一个科学家可以在实验室中模拟哺乳动物的子宫条件，所以，哺乳动物培育到早期胚胎（一般是囊胚期之前），必须移植到代孕母体的子宫中去，最后产出试管动物。【特别提醒】“试管动物”并不是从试管中呱呱坠地的，由于没有任何一个科学家可以在实验室中模拟哺乳动物的子宫条件，所以，哺乳动物培育到早期胚胎（一般是囊胚期之前），必须移植到代孕母体的子宫中去，最后产出试管动物。桑椹胚阶段：牛、羊不同动物胚胎移植时间不同 8或16细胞胚阶段：小鼠、家兔 4细胞胚阶段：试管婴儿

牛胚胎移植过程 受体母牛选择供体母牛供体：提供胚胎的个体。 ……同期发情处理…… 良种雌性动物促性腺激素超数排卵受体：接受胚胎的个体。一般品种的雌性动物配种供体公牛同期发情技术：主要是借助激素剌激卵巢，使其按照预定的要求发生变化，使处理母畜的卵巢生理机能都处于相同阶段，从而达到同期发情。取出早期胚胎胚胎移植质量检查、培养妊娠检查分娩（胚胎移植的犊牛）

二、胚胎移植 1、概念：将经济价值较高、遗传性状优秀的母畜，经过激素处理，使其超数排卵后受精。再将发育的（）移植到同期发情的（）的子宫内，通过代孕母妊娠产仔的技术。因此胚胎移植也被称做“（）” 代孕母畜早期胚胎借腹怀胎

讨论：为什么胚胎移植能成功? • 移动到任何一头动物子宫内都能发育吗? • 同种动物发情排卵后，在一段时间内供体\受体具有相同的生理环境。 • 为什么能收集到胚胎? • 早期胚胎一定时间内处于游离状态。 • 供体和受体会不会发生排斥？ • 同种动物之间基本上不排斥。 • 移植的胚胎能保留供、受体双亲的特性吗? • 胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系，但遗传特性不受受体的影响。

3、胚胎移植的意义 可充分发挥优秀个体的繁殖潜能缩短繁殖周期,增加一生繁殖的后代数量如：1)加速育种工作和品种改良 2)大量节省购买种畜的费用 3)一胎多产 4)保存品种资源和濒危物种

试管动物培育过程 培养使精子达到获能状态从附睾中取出成熟的精子共同培养培养从卵巢中获得未成熟的卵母细胞成熟的卵细胞体外受精胚胎体外培养常用方法：卵巢经超数排卵处理，使用超声监视器确定卵泡位置，插入穿刺针吸取卵泡液 (含卵母细胞)取出。胚胎移植早期胚胎试管动物代孕动物有性生殖试管动物的生殖方式为________。

练习 • 1.下列对于优良种畜的胚胎移植的说法不正确的是（） • A、供体母牛必须是同一物种的良种 • B、受体母牛必须是同一物种的良种 • C、供体公牛必须是同一物种的良种 • D、受体母牛可以是同一物种的一般健康牛 B

2.供体的胚胎移植到受体后，游离的胚胎在发育过程中形成胎盘与受体相连，并通过胎盘与受体的血液进行物质交换。以下说法正确的是（ ） • A.受体是为供体胚胎提供发育的条件 • B.受体与胚胎血型应相同，否则会发生免疫排斥反应 • C.受体与胚胎血液混融在一起 • D.胚胎心肺功能都能正常运行 A

3、下列有关动物胚胎移植的叙述中，错误的是（ ） • A、受孕母畜体内的受精卵或胚胎均能移植 • B、受体母畜必须处于与供体母畜同步发情的状态 • C、超数排卵技术要使用一定的激素 • D、试管婴儿只是受精及早期卵裂过程在试管中进行 A

胚胎分割 可看作是动物无性繁殖或克隆 1.概念: 指借助显微操作技术，将早期胚胎切割成几等份，再移植到代孕母子宫，产生同卵多仔后代的技术。 2.应用: 可成倍增加胚胎数量，可以快速繁殖良种畜。 3.特点: 后代具有相同的遗传物质。 4、选择的胚胎:发育良好的,形态正常的桑椹胚或早期囊胚. 理论依据：细胞的全能性

胚胎分割的基本过程 在显微镜下用切割针或切割刀；方法？采用胰酶处理等方式将卵裂球中的细胞分散开将早期胚胎细胞分散良种繁育体外培养胚胎移植

滋养层 早期胚胎（囊胚）胚胎干细胞胚胎干细胞内细胞团 1、胚胎干细胞的培养胚囊腔（1）胚胎干细胞 1.概念:简称ES细胞,是由早期胚胎（囊胚）的内细胞团中分离出来的一类细胞. 2.特点: 1)形态:体积小.细胞核大,核仁明显. 2)功能:具有发育的全能性. 3）在体外培养的条件下，ES细胞可以增殖而不发生分化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。

胚胎干细胞的培养 胚胎干细胞培养体系要求：促进其生长、抑制分化解决方法：培养皿底部制备一层饲养层细胞 —胚胎成纤维细胞分泌抑制细胞分化的物质

①将早期胚胎转入培养液中培养在胚胎成纤维细胞饲养层上； ②等内细胞团突出饲养层外，用酶消化或机械剥离内细胞团； ③将内细胞团用酶消化成单个细胞，可以加饲养层细胞培养，继续抑制分化并自我增殖出胚胎干细胞；

或者不加饲养层细胞培养，按需要诱导分化，形成我们需要的细胞。或者不加饲养层细胞培养，按需要诱导分化，形成我们需要的细胞。

2、胚胎干细胞核移植： 将胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中，经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由受体完成克隆动物的技术。 3、胚胎干细胞的主要用途： (1)基因敲除，获得移植器官。 (2)培育出人造组织器官，用于器官移植。 (3)改良创造动物新品种。

胚胎干细胞的应用前景 .优点

三、胚胎分割 借助显微操作技术将早期胚胎切割成几等份，再移植到代孕母的子宫中发育，产生同卵多仔后代。分割方法：机械法(切割针、切割刀) 酶处理

四、胚胎干细胞 胚胎干细胞(简称ES细胞)，是由早期胚胎(囊胚)的内细胞团分离出来的一类细胞。

胚胎干细胞特点： 1)形态：体积小、细胞核大、核仁明显。 2)功能：具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。 • 全能细胞 • 桑椹胚及以前 • 能发育成完整个体 • 多能干细胞(胚胎干细胞) • 内细胞团细胞、原始性腺细胞分离出来 • 能分化出动物体内的任何组织 • 专能干细胞(成体干细胞) • 如骨髓干细胞、皮肤生发层细胞等 • 能分化出特定的组织干细胞分类

1、胚胎干细胞培养： 培养关键：需要一种能促进胚胎干细胞的生长，但抑制其分化的一种培养体系。培养过程： 1、制备饲养层(胚胎成纤维细胞)； 2、培养胚胎到内细胞团突出饲养层； 3、酶消化或机械剥离内细胞团； 4、分为单个细胞。 5、加饲养层继续传代培养。

2、胚胎干细胞核移植： 将胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中，经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由受体完成克隆动物的技术。 3、胚胎干细胞的主要用途： (1)基因敲除，获得移植器官。 (2)培育出人造组织器官，用于器官移植。 (3)改良创造动物新品种。

1978 年 7 月 25 日，世界上第一个试管婴儿路易斯 · 布朗在英国出生。她是由 Steptoe 和 Edwards 利用体外受精和胚胎移植技术，由代孕母亲生出的第一个试管婴儿。