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DETERMINAZIONE DELLO STATO DI HER-2 NEL CARCINOMA MAMMARIO. TECNICHE A CONFRONTO. RISULTATI PRELIMINARI.

DETERMINAZIONE DELLO STATO DI HER-2 NEL CARCINOMA MAMMARIO. TECNICHE A CONFRONTO. RISULTATI PRELIMINARI. D Reghellin, V Rucco, MG Zorzi , A Brighenti, M Lestani U.O.C. di Anatomia Patologica ULSS 5 “Ovest-Vicentino” . Introduzione.

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DETERMINAZIONE DELLO STATO DI HER-2 NEL CARCINOMA MAMMARIO. TECNICHE A CONFRONTO. RISULTATI PRELIMINARI.

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  1. DETERMINAZIONE DELLO STATO DI HER-2 NEL CARCINOMA MAMMARIO. TECNICHE A CONFRONTO. RISULTATI PRELIMINARI. D Reghellin, V Rucco, MG Zorzi, A Brighenti, M Lestani U.O.C. di Anatomia Patologica ULSS 5 “Ovest-Vicentino”

  2. Introduzione • la determinazione dello stato di HER2 nel carcinoma della mammella ha un significato sia prognostico che predittivo di risposta alla terapia con Trastuzumab • requisito indispensabile per la somministrazione di tale farmaco è la dimostrazione di un'iperespressione della proteina HER2 e/o di un’amplificazione del gene HER2

  3. lo stato di HER2 può essere attualmente indagato studiando: a) la presenza di iperespressione dellaproteina HER2 con: ICH (immunoistochimica) b) la presenza di un’amplificazione del gene HER2 con: FISH (Ibridazione In Situ Fluorescente) CISH (Ibridazione In Situ Cromogenica) SISH (Ibridazione In Situ Argentica)

  4. Metodi • descriviamo i risultati ottenuti paragonando su casistica di routine i risultati ottenuti con ICH, SISH e FISH • sono stati selezionati 30 casi di carcinoma mammario infiltrante (27 carcinomi duttali, 2 carcinomi mucinosi e 1 carcinoma midollare), pervenuti fissati in formalina tamponata al 10%, inclusi in paraffina

  5. tutti i casi sono stati analizzati in sistema robotizzato secondo protocollo ICH standard (RE; RP; Ki67; ERB2) (PATHWAY®, Ventana) • la valutazione dell’amplificazione del gene HER2 è stata eseguita utilizzando la metodica SISH (INFORM®, Ventana) • in 10/30 casi (33%) è stata eseguita anche analisi FISH

  6. Valutazione colorazione ICH • I casi con score ICH 3+ sono stati considerati positivi, i casi con score 0 e 1+ negativi ed i casi con score 2+ come dubbi (sec. ASCO 2007)

  7. Valutazione SISH • la metodica SISH è stata valutata con metodo semiquantitativo • in presenza di isoforme del Chr17 l’analisi è stata ripetuta scegliendo un diverso campo o prelievo • nei casi con ratio HER2/Cr17 compresa tra 1.4 e 4, si è proceduto ad una seconda valutazione con metodo quantitativo (sec. Ventana 2007)

  8. HER2 Chr17 SISH per gene HER2 positiva con clusters di segnali nei nuclei delle cellule neoplastiche e SISH per cromosoma 17 (Chr17) con uno, due o tre segnali per ogni nucleo di cellula neoplastica (40x)

  9. Risultati

  10. Commenti alla tabella: Dei casi con ICH 3+ e SISH valutabile (n=5): • 4/5 (80%) sono positivi con SISH • 1/5 (20%) è negativo con SISH Dei casi con ICH 2+ e SISH valutabile (n=13): • 2/13 (15%) sono positivi con SISH • 10/13 (77%) sono negativi con SISH • 1/13 (8%) è incerto con SISH Tutti i casi con ICH negativa (n=4) si confermano negativi con SISH

  11. SISH vs FISH: In 10 casi è disponibile il dato FISH: • tra i casi positivi alla FISH (n=6), la SISH è valutabile in 3: 2/3 sono SISH-positivi ed 1/3 SISH-negativi • tutti i casi negativi alla FISH (n=4) sono risultati negativi anche alla SISH

  12. Conclusioni • I dati preliminari confermano la buona concordanza tra ICH e SISH (singolo caso discordante) • Il 15% dei casi con ICH 2+ (incerta) ha una SISH positiva, confermando la necessità di un approfondimento dello studio dello stato di HER2 con metodiche di ibridazione in situ • La SISH si propone come una valida metodica di analisi dello stato del gene HER2

  13. Bibliografia: • Wolff AC et al. American Society of Clinical Oncology/College of American Pathologists guidelines recommendations for Human Epidermal Growth Factor Receptor 2 testing in breast cancer. J Clin Oncol 2007; 25(1): 118-145 • Grogan TM et al. Interpretative guide for Ventana INFORM® HER2 DNA Probe staining of breast carcinoma. Ventana 2007

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