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Test de Widal: Un outil sérologique pour le diagnostic de la fièvre typhoïde

Le test de Widal est un test sérologique utilisé pour détecter les anticorps spécifiques associés à la fièvre typhoïde, une maladie causée par la bactérie Salmonella. Ce test repose sur le principe d'agglutination des anticorps en présence des antigènes de Salmonella. L'article aborde l'historique, la physiopathologie, la méthode de test, et l'interprétation des résultats du test de Widal.

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Test de Widal: Un outil sérologique pour le diagnostic de la fièvre typhoïde

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Presentation Transcript


  1. SERODIAGNOSTIC DE SERODIAGNOSTIC DE WIDAL ET FELIX WIDAL ET FELIX Par Yves MUKABA BM CHMonkole Sept 2023

  2. Plan Plan I. Introduction II. Historique III. Physiopathologie IV. Définition V. Principe VI. Exigence pour le test large A.Test Rapide sur plaque B. Test qualitatif en tube VII. Interprétation des résultats VIII. Application du test de Widal IX.Limite du test de Widal X. Conclusion Sept 2023

  3. I. Introduction I. Introduction Le test Widal est un test sérologique utilisé pour le diagnostic de la fièvre entérique ou de la fièvre typhoïde. La fièvre typhoïde ou fièvre entérique est causée par une bactérie à Gram négatif Sept 2023

  4. Introduction(Suite) Salmonella Salmonella Paratyphi) il est présente dans l'intestin de l'homme. Le Salmonella paratyphi provoque également la typhoïde mais sous une forme plus bénigne. enterica (Salmonella Typhi ou Sept 2023

  5. Introduction(Suite) Les salmonelles possèdent l'antigène O sur leur paroi cellulaire et l'antigène h sur leurs flagelles. En cas d'infection, ces antigènes stimulent l'organisme à produire des anticorps spécifiques qui sont libérés dans le sang. Sept 2023

  6. II. Historique II. Historique  1880 : Découverte de l’agent de la fièvre typhoïde par Eberth  1884: Culture de la bactérie par Gaftky  1886: Mise en évidence antigéniques des souches de Salmonelles par Widal de la diversités Sept 2023

  7. III. Physiopathologie III. Physiopathologie 1.Période mésentérique (7-15jours) 2. Période d’invasion lymphatique, les bacilles passent dans la circulation sanguine. Les bacilles au niveau des ganglions mésentériques sont détruits et endoxine. ou stade d’adeno-lymhite d’incubation : A partir du système libèrent leur Sept 2023

  8. IV IV. Définition . Définition Le test Widal permet de détecter les anticorps spécifiques dans l’échantillon de sérum de patients souffrant de typhoïde antigène-anticorps. Ces peuvent être détectés dans le sérum du patient après 6 jours d’infection (fièvre). grâce anticorps aux interactions spécifiques Sept 2023

  9. Définition Salmonella Typhi possède l'antigène O sur la paroi cellulaire et l'antigène Salmonella Paratyphi A possèdent également l'antigène O sur leur paroi cellulaire mais ont respectivement les antigènes AH et BH sur leurs flagelles. H sur les Paratyphi flagelles. et S. B Sept 2023

  10. V. Principe V. Principe du test Widal du test Widal Le test Widal est un test d'agglutination dans lequel les anticorps spécifiques de la fièvre typhoïde sont détectés en mélangeant le sérum du patient avec une suspension bactérienne tuée de Salmonella portant des antigènes spécifiques O, H, AH et BH et observés pour l'agglutination, Réaction antigène-anticorps. c'est-à-dire. Sept 2023

  11. Principe du test Widal (Suite) Le principe principal du test Widal est que si un anticorps homologue est présent dans le sérum du patient, il réagira avec l’antigène correspondant dans la suspension et donnera une agglomération visible sur la lame ou carte de test. Sept 2023

  12. VI. Exigences VI. Exigences pour le test large pour le test large i) Le sérum frais, conservé à 2-8°. Le sérum ne doit pas être chauffé ou inactive ii) Le kit complet contenant cinq flacons contenant l'antigène de Salmonella coloré • Antigène S. Typhi——O • S. Tyhhi——Antigène H Sept 2023

  13. Exigences pour le test large • Antigène S. Paratyphi—–AH • Antigène S. Paratyphi—–BH iii) Contrôle positif large iv) Carte ou lame de test Widal v) Bâton applicateur Sept 2023

  14. Exigences pour le test large Procédure du test Widal Le test Widal peut être effectué de deux manières : l'une est un test rapide sur lame et l'autre est un test en tube dans lequel le résultat peut être obtenu après une nuit d'incubation. Sept 2023

  15. A A. . Test rapide sur Test rapide sur Plaque Plaque 1. Nettoyez bien la plaque de verre ou la carte de test fournie dans le kit et séchez-la. 2. Étiquetez les cercles (1, 2, 3, 4, 5 et 6) de la carte de test comme O, H, négatif et contrôle positif AH, BH, contrôle Sept 2023

  16. I. Test rapide sur Plaque 3. Placez une goutte de sérum de test non dilué dans chacun des quatre cercles étiquetés (1, 2, 3 et 4), c'est-à-dire O, H, AH et BH et placez une goutte de sérum de contrôle négatif dans le cercle 5 et de contrôle positif dans le cercle 6. Sept 2023

  17. I. Test rapide sur Plaque 4. Placez une goutte d'antigène O, H, AH et BH dans les cercles 1, 2, 3 et 4 respectivement et aucun antigène dans le cercle 5 et l'antigène O/H dans le cercle 6. Sept 2023

  18. I. Test rapide sur Plaque 5. Mélangez le contenu de chaque cercle avec un bâtonnet applicateur en bois séparé et étalez-le pour remplir toute la surface du cercle individuel. 6. Secouez la carte de test pendant une minute et observez l'agglutination. Sept 2023

  19. Réaction Test Rapid sur Plaque Réaction Test Rapid sur Plaque Les volumes de sérum dans le test quantitatif sur lame correspondent approximativement à ceux du test en tube indiqué ci-dessous : Sept 2023

  20. Réaction Test Rapid sur Plaque Cercle Volume sérique Goutte d’antigène Env. titre du tube à essai 1er 0,08 ml 1 goutte 1 : 20 2ème 0,04 ml 1 goutte 1 : 40 3ème 0,02 ml 1 goutte 1 : 80 4ème 0,01 ml 1 goutte 1 : 160 5ème 0,005 ml 1 goutte 1 : 320 Sept 2023

  21. Réaction Test Rapid sur Plaque

  22. B B. . Test quantitatif en tube Test quantitatif en tube 1. Prenez un ensemble de 8 tubes à essai propres et secs (tubes Kahn) et étiquetez-les comme 1, 2,3, 4, 5, 6, 7 et 8 pour la détection des anticorps O. 2. De même, prenez 3 séries de 8 tubes à essai et étiquetez-les comme: 1,2….8 Sept 2023

  23. II. Test quantitatif en tube(Suite) 3. Diluer les échantillons de sérum comme suit : oPipeter dans le tube n°1 de tous les sets 1,9 ml de sérum physiologique Pipeter dans le tube n°1 de tous les sets 1,9 ml de sérum physiologique isotonique. Sept 2023

  24. II. Test quantitatif en tube(Suite) Dans chacun des tubes restants (2 à 8), ajoutez 1,0 ml de solution saline isotonique. o Dans le tube n°1 de chaque rangée, ajoutez 0,1 ml de l'échantillon de sérum à tester et mélangez bien. o Transférer 1,0 ml de sérum dilué du tube n°1 au tube n°2 et bien mélanger. Sept 2023

  25. II. Test quantitatif en tube (Suite) Transférer 1,0 ml de l'échantillon dilué du tube n°2 au tube n°3 et bien mélanger. Continuez cette dilution en série jusqu'au tube n°7 dans chaque ensemble.  Jetez 1,0 ml de sérum dilué du tube n°7 de chaque set.  Le tube n°8 dans tous les sets sert de contrôle salin.

  26. II. Test quantitatif en tube (Suite) Maintenant, la dilution de l'échantillon de sérum obtenue dans chaque ensemble est la suivante : N° de tube : 1 2 3 4 5 6 7 8 (témoin) Dilutions 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1 :1280. 4. Ajoutez une goutte d'antigène de test Widal approprié à tous les tubes à essai Sept 2023

  27. II. Test quantitatif en tube (Suite) 4. Ajoutez une goutte d'antigène de test Widal approprié à tous les tubes à essai 5. Bien mélanger et incuber à 37°C pendant 16 à 20 heures et rechercher une agglutination Sept 2023

  28. II. Test quantitatif en tube (Suite) 6. Le titre d’anticorps correspond à la dilution la plus élevée du sérum présentant une agglutination nette.

  29. VII. Interprétation VII. Interprétation des des résultats résultats

  30. Interprétation des résultats (Suite) Un titre d'anticorps supérieur à 1 : 80 est considéré comme significatif généralement un test positif pour une infection à Salmonella. De faibles titres sont souvent observés chez les individus normaux et suggère Sept 2023

  31. Interprétation des résultats (Suite) Un seul résultat positif est moins significatif que l’augmentation du titre l’augmentation du titre est considérée comme une preuve certaine d’infection. puisque d’anticorps, Sept 2023

  32. VIII. Applications VIII. Applications du test Widal du test Widal Le test rapide de dépistage de la fièvre typhoïde dans les zones endémiques. Lorsque les installations de culture ne sont pas disponibles, le test Widal est très fiable Utiliser pour Salmonella Typhi et Salmonella Paratyphi Sept 2023

  33. IX. Limites IX. Limites du test Widal du test Widal Le test Widal prend du temps pour trouver le titre d’anticorps et, souvent, lorsque le diagnostic est établi, il est trop tard pour commencer un traitement antibiotique. Sept 2023

  34. Limites du test Widal (Suite) Le test Widal peut être faussement positif chez les patients ayant déjà été vaccinés ou infectés par S. Typhi. Le test Widal ne peut pas faire la distinction entre une infection actuelle et une infection antérieure ou une vaccination contre la typhoïde. Sept 2023

  35. Limites du test Widal (Suite) Le test Widal montre une réactivité croisée avec d’autres espèces de Salmonella. Des résultats faussement positifs au test Widal sont également connus pour le typhus et le paludisme aigu à falciparum. Sept 2023

  36. Limites du test Widal (Suite) (En particulier chez les enfants), une maladie hépatique chronique associée à des taux de globulines élevés et des troubles tels que la polyarthrite rhumatoïde, la myélomatose et le syndrome néphrotique. Le test Widal doit être interprété à la lumière Sept 2023

  37. X.EN CONCLUSION L'Organisation mondiale de la santé (OMS) a déclaré qu'en raison pouvant influencer les résultats d'un test Widal, il est préférable de ne pas trop se fier à ce test. des différents facteurs Sept 2023

  38. MERCI POUR VOTRE MERCI POUR VOTRE COLLABORATION COLLABORATION Sept 2023

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