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实验一 果蝇( Drosophila melanogaster ) 遗传学系列实验(二) 果蝇杂交 (教材 p75-81). 实验目的. 学习杂交实验设计 验证/分析遗传学规律. 复习—— 遗传定律. 单基因: 分离规律 双基因: 自由组合定律 多基因: 连锁与互换 性染色体: 伴性遗传规律. 复习—— 雌雄果蝇的辨认 1. 复习—— 雌雄果蝇的辨认 2. 复习——. 雌雄果蝇的辨认 3. 复习——果蝇的生活史. 完全变态. 一、实验内容
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实验一 果蝇(Drosophila melanogaster)遗传学系列实验(二) 果蝇杂交 (教材p75-81)
实验目的 • 学习杂交实验设计 • 验证/分析遗传学规律
复习——遗传定律 单基因: 分离规律 双基因: 自由组合定律 多基因: 连锁与互换 性染色体: 伴性遗传规律
复习—— 雌雄果蝇的辨认3
复习——果蝇的生活史 完全变态
一、实验内容 在实验室现有的几种果蝇中设计杂交实验,达到分析: 单基因位点的遗传规律; 双基因位点的遗传规律; 伴性遗传规律; 多基因连锁与互换规律 及连锁基因之间的遗传距离计算等目的。
二、设计杂交 1 实验材料: 黑腹果蝇野生型品系: 野生型(+ ) 黑腹果蝇的突变品系: 黑檀体(e) —— 3号染色体 残翅 (vg) ——2号染色体 三隐性(Xmwsn3) 以上均为自交的纯合品系 2 设计原则: 用尽量少的杂交组合满足尽可能多的实验目的!
实验中用到的几种突变体 野生型(wildtype):灰体,红眼,长翅,直刚毛, 基因符号 + 黑檀体(ebony):黑檀体色,红眼,长翅,直刚毛, 基因符号 e
残翅(vestigial ):翅膀退化残缺不全,灰体,红眼,直刚毛, 符号 vg 三隐性: 白眼、小翅、卷刚毛 基因符号 m
三、实验步骤 (一)收集处女蝇(9.18-9.22) 什么是处女蝇? 为什么要挑选处女蝇? 收集方法: 1、 放飞成蝇 (生长好、接近羽化蛹多者)(以后不再严格统一时间) 2、清除成蝇后的10小时内收集处女蝇(<12h, 10h内为好,8h更可靠) 早上:7:00,下午4:00,晚上10:00 (注意:若3-4d出现幼虫,则收集失败)
(二)杂交实验 方法步骤 : 第一周(9.18-9.22) : 设立组合(小组设计→老师确定→黑板登记 →配发果蝇) 挑选处女雌(从今天领取果蝇开始计时,10h以内为一个时间段)
特别提问: 对于涉及X染色体的杂交, ♀是野生型,♂是隐性性状时,F1可否能直接互交,为什么?不直接互交应采取什么措施、如何分析? 今天下课交。 注意: 本系列实验的各代果蝇均要留存一些用于后期的遗传标记实验.(亲本材料到时老师提供)
第二周(9.25-9.29) : 杂交接种(次日就要检查,如有死亡及时补) 杂交瓶上注明: 杂交组合、实验日期、实验者姓名 第三周(“10·1”黄金周) : 放飞亲本蝇(部分蛹变黑,F1即将孵出前。为防止失败,可留存) 配制新培养基(为什么?)(老师提供) (更新培养基,用于下周F1同胞交配)
第四周(10.9-10.13) : F1代果蝇的观察和交配 (孵出7-9d统计。 ♀ ♂是否一致?选10-20对再杂交于1或多个新瓶) 第五周(10.16-10.20) : 移出F1代果蝇(留存备用?) 正反交雌、雄果蝇均要留存40只用于后期的遗传标记实验 第六周(10.23-10.27) : 观察、统计F2代的结果 (正反交结果。 X 2 检验。三点测验作图……) 正反交雌、雄果蝇均要留存40只用于后期的遗传标记实验
四、实验报告(今天先交一个设计方案) 要求: • 目的 • 材料 • 方法 • 程序计划 • 结果分析 • 问题讨论 提示: 教材上没有的实验”玉米花粉粒分离……”(以后做)的详细文本将发布在公共邮箱,请提前提取.