Ine Vansteenkiste

1. Ine Vansteenkiste “Experimenteel vergelijkende studie van kwantitatieve analysemethoden voor de bepaling van glucosamine in samengestelde preparaten”. EINDWERK Hogeschool West-Vlaanderen. 19 juni 2008

2. Overzicht • Probleemstelling/doel • Praktisch werk • Resultaten • Problemen • detectie • Besluit

3. Probleemstelling • Osteoarthritis • Glucosamine en Chondroïtine • Voedingssupplementen: controles! • Vb. Kwantificering met HPLC

4. Doel • Hoeveelheid glucosamine/chondroïtine bepalen in preparaten. • Met HPLC-methode • In toekomst gebruiken in routine.

5. Praktisch werk • Vergelijking 9 methoden • HPLC-U.V. • Efficiëntie, routine, kostprijs,... • Met meest geschikte methode: kwantificering op preparaten.

6. Resultaten • Methoden: opmerkingen • Onmogelijk om exact op zelfde manier uit te voeren => afwijkend resultaat. • Gewenst resultaat maar te ingewikkeld, duur, niet voor routine. • Verder gewerkt met meest geschikte methoden.

7. Problemen • Grootste probleem: geen scheiding van glucosamine en chondroïtine. • Geen scheiding => piek niet specifiek voor 1 stof. piekoppervlakte ~ concentratie. • Omzeilen via selectieve detectie.

8. Detectie • Component niet gedetecteerd => kan niet interfereren. • Aanpassen detectieparameters: enkel glucosamine of chondroïtine wordt gedetecteerd. • 2 aparte methoden nodig!

9. Glucosamine Chondroïtine Detectie • U.V.- spectra: absorptiemaxium absorptiemaxium

10. Detectie • U.V.- spectra: absorptiemaxima dicht bij elkaar. • Meten bij absorptiemaximum => interferentie. • Oplossing: niet bij absorptiemaximum meten. (wel nog detecteerbaar!)

11. Detectie: glucosamine • Derivatisatie => bij andere golflengte meten => selectiever.

12. Glucosamine Chondroïtine Detectie: chondroïtine • Oplossing: selectieve golflengte: 207 nm. (≠ absorptiemaximum)

13. Kwantitatieve bepaling • Twee aparte methoden • Glucosamine: derivatisatie, 340 nm, acetaatbuffer/methanol. • Chondroïtine: 207 nm, octanesulfonic acid/triëthylamine/fosforzuur/acetonitril => Selectieve methoden.

14. Kwantitatieve bepaling • Referentiestandaarden => ijklijn • Piekoppervlaktes ~ concentratie

15. Kwantitatieve bepaling • Piekoppervlakte onbekende invullen in vergelijking van de ijklijn.

16. Kwantitatieve bepaling • Monsters met glucosamine + chondroïtine + andere stoffen • Ook interferentie mogelijk! • Resolutie > 1.5 (farmacopee) => voldoende scheiding

17. Referentiestandaard Siroop Tablet Rs = 2.74 Kwantitatieve bepaling

18. Kwantitatieve bepaling • Samengestelde preparaten (tabletten, siroop): bevatten glucosamine + chondroïtine + vulstoffen. • Waarden tussen 90 en 110 % van de theoretische concentratie. • Afwijking door...? • => Moet nog herhaald worden!

19. Besluit • Kwantificering glucosamine/chondroïtine in voedingssupplementen. • Met meest geschikte HPLC-methode. • Interferentie => selectieve detectie. • 2 aparte methoden getest op monsters. • Verdere validatie nodig vóór gebruik van de methoden.

20. Dank • Chemiphar N.V. • Van Daele Leen • Quartier Bart • Hogeschool West-Vlaanderen • aanwezigen

21. Vragen?