抗體製備

抗體製備 產品部許嘉如

免疫系統簡介一 第一道防線：皮膚、黏膜(生理界壁) 宿主之防禦機制- 三道防線非特異性第二道防線：發炎反應及吞噬作用特異性第三道防線：抗體免疫

免疫系統簡介二

免疫系統簡介三-先天免疫系統 1.巨噬細胞把抗原分解成小片段，專一地表現給 TH細胞。　 ↓ 2.TH細胞動員 TK細胞及 B 細胞，後者生產專一性抗體。　 ↓ 3.抗體及 TK細胞攻擊入侵的抗原。　 ↓ 4.完成清除抗原後，免疫細胞休息。

A抗原 A抗體免疫系統簡介四-後天免疫系統後天免疫反應的兩大特點：專一性：由 A抗原所誘導的免疫反應只對 A抗原有效。　記憶性：痊瘉後若 A抗原再度入侵，可迅速動員掃蕩之。

抗原 ( Antigen ) 一物體進入脊椎動物後會刺激該脊椎動物產生對抗該物體之抗體的能力，此物體具抗原性。

抗原的種類

抗體 ( Antibody ) 抗體是由 B 細胞所分泌的蛋白質：抗體分子：由四條蛋白質長短鍊所組成 (兩重兩輕)。　結合區：抗體分子上有兩個抗原結合區 (二者相同)。　專一性：抗體與抗原結合極具專一性　

抗體結構

抗體的種類 IgG 、IgD、IgE是單一抗體分子， IgM (五元體) 及 IgA (二元體)。

抗原決定基 • 抗原決定基(antigenic determinant，epitope)：抗原分子上可以誘導出抗體的部位或片段。 • 一個抗原分子上通常都有許多處抗原決定基。 • 每個決定基至少都可誘生出一種抗體；因此在傳統抗血清中，都含有許多種不同的抗體，分別對抗這些不同的決定基。 • 蛋白質性抗原決定基含有六個以上的胺基酸序列。

抗體與抗原之作用模式

抗體製備流程 單株抗體多株抗體

至少boost三次 試採血 WK 多株抗體製作流程收全血

單株抗體製作流程

單株抗體製備原理

如何製備單株抗體一

如何製備單株抗體二

公司抗體製備規格 • 國內製程 ---- 昕穎+濁水溪 • 國外製程 ---- GenScript

國內製程一 • 抗原種類：Protein, Peptide, Bacteria(要死菌，並以福馬林處理過！！) • 免疫動物系統：紐西蘭兔(可4選2)，大鼠，小鼠 • 蛋白質抗原製備： Gene Construct 基因轉殖 His-tag Fusion Protein 基因表現 • 抗體純化： Protein A affinity purification Peptide / Protein Specific affinity purification Phospho & Non-Phospho Peptide Specific purification

國內製程二 • 出貨規格：紐西蘭兔( 二選一)：免疫前血清3~5 ml；抗血清80~100 ml 小鼠( X 5 )：抗血清0.5~1ml/隻大鼠( X 2 ) ：抗血清5 ml/隻 • 效價： Peptide > 3,000X Protein>10,000X • 報告書： Western Blot, Dot Blot 或ELISA

國外製程~全採包套模式 • 抗原種類：Peptide ( <15a.a., > 85%, 10mg,含KLH ) • 出貨規格：紐西蘭兔：免疫前血清2~3 ml；抗血清100~120 ml • 效價：Peptide > 3,000X • 報告書：ELISA 若需額外純化或conjugation，則需另外報價

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