Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium

1. Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium Elválasztástechnika kv1n1lv1

2. Kevésbé illékonyak Folyadék-folyadék extrakció (LL) Szilárd fázisú extrakció (SPE, MEPS, DPX, online …) Szilárd fázisú mikroextrakció (SPME) Keverőbabás extrakció (TWISTER) Membrán segített oldószeres extrakció (MASE) Diszperzív SPE Célvegyületek Folyadékminta

3. Szilárd fázisú extrakció (SPE)

4. Szilárd minta Célvegyületek • Kevésbé illékonyak • Soxhlet extrakció (SE) • Szuperkritikus fluid extrakció (SFE) • Accelerated Solvent Extraction (ASE) • Ultrahanggal segített szilárd-folyadék extrakció • Mikrohullámmal segített extrakció (MWE) • Mátrix-szilárd fázisú diszperzió (MSPD) • Quechers • Illékonyak • Gőztéranalízis (HS, DHS) • Szilárd fázisú mikroextrakció (HS-SPME)

5. QuEChERS Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe • 10 g minta + 10 ml acetonitril+ISTD • Intenzív homogenizáslás • + NaCl, MgSO4és citrátok(fázis szétválás, pH beállítás) • Intenzív keverés⇒ Nyers extrakt • A szerves fázis egy részletének d-SPE tisztítása (MgSO4 +szorbens pl. PSA) • Rövid keverés majd centrifugálás (esetleg védő reagensek mellett) ⇒ Végső extrakt M. Anastassiades, S. J. Lehotay, D. Stajnbaher, F.J. Schenck, JAOAC Int 86(2) 412-31

6. Ismétlés vége

7. SHS, SPME, SBSE Szükséges-e az egyensúly? A t

8. Származékképzés Miért ? : • Mérendő komponens illékonyságának növelése • Mérendő komponens termikus stabilitásának növelése • Retenciós tulajdonságok megváltoztatása • Kimutatási határ csökkentése

9. Származékképzés Mit kell tudnia a származékképzési reakciónak? : • Megfelelő sebességgel játszódjon le • Lehetőleg teljes legyen az átalakulás • Egy mérendő komponensből lehetőleg egy termék keletkezzen • Minta egyébkomponensei ne zavarjanak • A reagens felesleg és a reakció melléktermékei ne zavarjanak

10. Származékképzés Leggyakrabban alkalmazott reakció típusok : • Szililezés • Acilezés • Alkilezés • Észteresítés • …

11. Folyadék kromatográfia – HPLC

12. A kezdet 1903 Varsói Természettudományi Társaság Biológiai Közleményei

13. HPLC vs. GC

14. HPLC vs. GC

15. A HPLC rendszer főbb részei

16. A HPLC rendszer főbb részei Oldószerek Gáztalanító Pumpa Automata mintaadagoló Oszloptér Detektor

17. Mozgó fázis gázmentesítése • He sparging, on-line vacuum degassing, refluxing, vacuum filtration, ultrasonication

18. Kézi injektor Sample Loop Load - Inject Rear View Front View Inject

19. Kézi injektor Sample Load From Pump Solvent in Sample in Solvent out To column From Pump Solvent in Solvent out Sample in To column Sample Inject

20. Automata injektor Pretreatment with automatic injection system:

21. HPLC-s módszerek típusai

22. Folyadékkromatográfia típusok – Állófázis/eluens Normál fázisú folyadékkromatográfia (Normal-phase) NP-HPLC Fordított fázisú folyadékkromatográfia (Reverse-phase) RP-HPLC Fordított fázisú ionpár kromatográfia (Reverse-phase ionpair) RP-IP-HPLC Ioncserés folyadékkromatográfia (Ion-exchange chrom.) IC Méretkizárásos folyadékkromatográfia (Size exclusion chrom.) SEC Királis folyadékkromatográfia (Chiral chromatography) CC Affinitás folyadékkromatográfia (Affinity chromatography) AC

23. A vizsgálandó komponens és az állófázis között fellépő kölcsönhatások • Ionos (Ioncserés) • Dipólus - Dipólus (Normál fázisú) • Intermolekuláris erők, amelyek poláris molekulák pozitív és negatív dipólus momentumai között alakulnak ki; • Dipólus - Indukált Dipólus (Normál fázisú) • Dipólus momentummal nem rendelkező molekulákban poláris molekulák ideiglenesen dipólus momentumot indukálhatnak az elektronok szimmetrikus elrendeződését megbontva. • Hidrofób (Fordított fázisú) • Sztereospecifikus (Királis) • --- • Ezek mind kompetitív kölcsönhatások!!

24. Oszlopgeometria Félpreparativ oszlop 20 mm i.d. Félpreparativ oszlop 8 mm i.d. Preparativ oszlop 40-100 mm i.d. Analitikai oszlopok 3,0; 4 vagy 4,6 mm i.d. Mikro(bore)oszlopok 1 vagy 2 mm i.d. Kapilláris oszlopok 20-800 mm i.d. acél vagy PEEK Gyorsoszlopok 2,0- 4,6 mm i.d.

25. Van Deemter egyenlet Nyomásesés a kolonnán: Dp- nyomásesés; f- kolonna áramlási ellenállása; - eluens viszkozitás; L- kolonna hossz; dp- töltet átlagos szemcseméret dp= 10 mm H dp= 5mm dp= 3mm u (cm/sec)

26. A folyadékkromatográfiás állófázisok - szervetlen FÉMOXIDOK: SiO2, Al2O3, CaO, MgO, BaO, TiO2, CeO2, ZrO2, SÓK: SZILIKÁTOK, Mg-Al szilikátok és egyéb összetett vegyületek (Florisil, földpátok, bentonit, kaolin, síkpor, agyag) KARBONÁTOK, SZULFÁTOK (Ca-Mg-karbonát, Ca-szulfát), FOSZFÁTOK (Ca-, Zr-, HIDROXI APATIT) NITRIDEK – BN PORÓZUS ÜVEG SZEMCSÉK (Controlled Pore Glass, CPG 75-3000 μm) CPG GLYCOPHASE (gliceropropilszilán réteggel) SZERVETLEN (SZILIKA) – SZERVES (POLIMEREK) KEVERT TÍPUSOK

27. A folyadékkromatográfiás állófázisok - szerves SZÉN (aktív C, porózus grafitált karbon, PGC) POLISZACCHARIDOK (cellulóz, keményítő, porcukor) DEXTRÁN (keresztkötésekkel térhálósított gélek, Sephadex) AGARÓZ (agar-agar, agaropektin) POLIAMID POLIAKRILAMID (akrilamid - metilén bis-akrilamidkopolimer) POLIETILÉN IMINEK

28. Column Packing Materials - Silica Spherical Silica Sols Xerogels Irregular Particles are 3-10 m in diameter for standard columns.