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Bioquímica I 1º ano Mestrado Integrado em Medicina 2009-2010. Seminário Orientado 2 Métodos de identificação de biomoléculas e análise de proteínas: principais biomoléculas métodos de análise de proteínas estudo de proteínas para o diagnóstico em Medicina. 07-10-2009. Biomoléculas.
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Bioquímica I1º ano Mestrado Integrado em Medicina2009-2010 Seminário Orientado 2 Métodos de identificação de biomoléculas e análise de proteínas: principais biomoléculas métodos de análise de proteínas estudo de proteínas para o diagnóstico em Medicina 07-10-2009
Biomoléculas • Insoluvéis em água e solúveis em solventes apolares; • Ésteres de ácidos gordos ou amidas de ácidos gordos; • Funções biológicas: estruturas membranares, reserva energética, mensageiros (hormonas); • Classificação: Apolares Polares Lípidos complexos • Lípidos Lípido - triglicerídio • Proteínas • Polímeros de aminoácidos ligados por ligações peptídicas; • Funções: estruturais, defesa, hormonal, energética e enzimática; • Propriedades das proteínas; • As proteínas são construídas a partir de 20 aminoácidos; • Organização estrutural: primária, secundária, terciária e quaternária;
DNA e RNA: sequências de nucleótidos; • Componentes dos nucleótidos: pentose, grupo fosfato e base nitrogenada; • Funções dos nucleótidos: armazenamento e transmissão da informação genética, transporte de energia, constituição de co-enzimas e mensageiros químicos; • Tipos de RNA. • Estrutura do DNA e do RNA; • Ácidos nucleicos • Hidratos de Carbono • constituidos por grupo hidroxilo (OH) • funções: metabolismo energetico, reservas, estrutura, reconhecimento celular; • Classificação: monossacarídeos (açucar simples); oligossacarídeos; polissacarídeos(celulose, glicogenio);
Métodos de identificação de proteínas Baseiam-se na sua carga, solubilidade, tamanho e afinidade de ligação.
Consiste na passagem de macromoléculas através de uma coluna fixa (fase estacionária) que é desenhada para reter ou diminuir a velocidade de passagem da fase móvel em função de uma dada propriedade química. Cromatografia
Cromatografia por filtração em gel – separação por um critério de tamanho.
Cromatografia por troca iónica – separação por um critério de carga global proteica.
Cromatografia por afinidade – separação por um critério de bioreconhecimento.
Electroforese • É uma técnica de separação de moléculas que consiste na migração de moléculas com carga, numa solução, em função da aplicação de um campo eléctrico.
Electroforese em gel: separação por um critério de massa molecular Electroforese por Focalização Isoeléctrica – separação por um critério de radicais ácido/base. Electroforese Bidimensional – separação por um critério de radicais ácidos/básicos e de massa molecular; permite cruzamento de dados.
Diálise Outros métodos • Ultracentrifugação • Saltingout • Western blotting
3. Proteínas no diagnóstico médico 3.2 Avaliação qualitativa • Ex.1: Hemoglobina S ↔ Anemia falciforme • Ex.2: Amilóide ↔ Amiloidose 3.1 Avaliação quantitativa Hiperproteinémia: PCR (Proteína C-reactiva) ↔ Infecção, Inflamação. Hipoproteinémia: Hipoalbuminémia ↔ Insuficiência renal de último grau, Síndrome nefrótico, Insuficiência hepática grave. FMUC | Bioquímica I – SO2 | 7 de Outubro de 2009
BIBLIOGRAFIA e NETGRAFIA • ALBERTS, Bruce; JOHNSON, Alexander; LEWIS, Julian; RAFF, Martin; ROBERTS; Keith; WALTER, Peter, Molecular biology of the cell, 4ª edição Garland Science, New York 2002 • STRYER, Lubert; BERG, Jeremy M.; TYMOCZKO, John L., Biochemistry, 5ª edição International Edition, New York 2002 • “Técnicas de análise de proteínas”,Faculdade de Medicina do Porto • http://preview.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16534226?itool=EntrezSystem2.PEntrez.Pubmed.Pubmed_ResultsPanel.Pubmed_RVDocSum&ordinalpos=12 • http://en.wikipedia.org/wiki/C-reactive_protein • http://anatpat.unicamp.br/taamiloidose.html • http://pt.wikipedia.org/wiki/Amiloidose • MURRAY, Robert; GRANNER, Daryl; MAYES, Peter; RODWELL, Victor, Harper’s Ilustrated Biochemistry, twenty-sixth edition, 2003, pps. 580-584
Trabalho realizado por: Amélia Fernandes Ana Carolina Martins Ana Carolina Figueiredo Ana Carolina Padilha Ana Carlota Caetano Ana Catarina Cunha Ana Catarina Quintas Ana Catarina Lai