240 likes | 406 Vues
PCR (polymerase chain reaction). A specilis, kivlasztott DNS szekvencia amplifikcija enzimes reakcik ismtlodsvel in vitro krlmnyek kztt.Szelektv mdszer, elonye a hagyomnyos technikkkal szemben, hogy specilis DNS fragment vizsglatt teszi lehetov. Minden egyes PCR ciklusban a DN
E N D
1. Polimerz lncreakci Ksztette: Feigl Viktria
2. PCR (polymerase chain reaction) A specilis, kivlasztott DNS szekvencia amplifikcija enzimes reakcik ismtlodsvel in vitro krlmnyek kztt.
Szelektv mdszer, elonye a hagyomnyos technikkkal szemben, hogy specilis DNS fragment vizsglatt teszi lehetov.
Minden egyes PCR ciklusban a DNS mennyisge a reakcielegyben megduplzdik, azaz 30 ciklus utn 109-szerese a kezdeti DNS mennyisgnek.
A reakci vgtermke glelektroforzissel vizsglhat.
3. PCR trtnete Kary B.Mullis (Cetus) fedezte fel 1983-ban
1985-ben jelent meg a cikk
1993-ban kmiai Nobel-dj
tlet: olyan eljrst kellene kifejleszteni, amely a DNS-t mestersgesen megsokszorozza a DNS-polimerz enzim segtsgvel, megismtelt duplikcis ciklusok ltal.
4. A DNS polimerz enzim:
Megtallhat az lo szervezetekben
Funkcija a DNS lemsolsa a sejt osztdsakor
A DNS egyik szlhoz ktodve ltrehozza a komplementer szlat.
Az eredeti eljrs:
A kettos szl DNS kt szlra vlasztsa 96C-ra trtno hevtssel
5. 96C-on a DNS polimerz lebomlott enzimet minden ciklusban ptolni kellett Kevss hatkony Idoignyes Nagy DNS-polimerz fogyaszts Folyamatos figyelem Megolds: Thermus aquaticus Yellowstone Parkban izolltk (1969) Thomas Brock s Hudson Brock fedezte fel