Universidad de Panamá Facultad de Medicina Escuela de Medicina Seminario de Hematología

1. Universidad de Panamá Facultad de Medicina Escuela de Medicina Seminario de Hematología Presentado por: Héctor Lezcano Isamar Chávez Evelyn Monterrey Amaris Ramos David Weng Juan Alain ANALIZADORES HEMATOLÓGICOS

2. Introducción • El desarrollo de los Autoanalizadores hematológicos comenzó en la década de los 50 con los hermanos Wallace y Joseph Coulter, quienes inventaron en 1956 el primer contador automático de células sanguíneas. • En 1980 se introduce el diferencial 3 Diff, además del estudio de la serie roja con los cómputos de eritrocitos, la determinación de la hemoglobina y el cálculo de los índices eritrocitarios. • Todo equipo automatizado, suministra dos tipos de resultados: un informe numérico y un informe grafico (histogramas), y ambos poseen un software que contiene toda la información utilizando abreviaturas en ingles de utilidad en el informe numérico.

3. DISPOSITIVO DE MEDIDA Es la cámara donde se cuentan realmente las células sanguíneas (cámara de medida o de lectura). • DILUIDOR Disminuye la concentración de la sangre hasta el nivel adecuado para el funcionamiento del contador. Como líquido diluyente utiliza una solución isotónica con capacidad conductora. • COMPRESOR- ASPIRADOR Aporta la presión y el vacío necesarios para transportar la sangre, convenientemente diluida, al dispositivo de medida. • TRANSDUCTOR Transforma las señales, procedentes del dispositivo de medida, en impulsos eléctricos. Suele ser un fotomultiplicador • DISCRIMINADOR Diferencia los impulsos eléctricos generados por cada uno de los tipos de células sanguíneas. Componentes del analizador • PROCESADOR Recoge los datos obtenidos, los procesa y los proyecta en una pantalla. • REGISTRADOR Imprime en papel los resultados conseguidos.

4. Principio de los analizadores hematológicos

5. PRINCIPIO DE IMPEDANCIA El número de intermitencias indica la cifra de células sanguíneas y la amplitud de cada intermitencia es proporcional al volumen de la célula Ejemplos de instrumentos con este principio son el Contador Coulter, los instrumentos TOA Sysmex y los instrumentos Abbot Cell-Dyn. • Mientras que las células sanguíneas conducen mal la electricidad, el líquido diluyente es un buen conductor de la electricidad (posee una gran conductividad eléctrica).

6. El dispositivo de medida consiste en un pequeño orificio, a través del cual se hace pasar la sangre diluida. Tiene colocados un electrodo a su entrada y otro a su salida. • También se hace pasar una corriente eléctrica constante a través de ese mismo orificio. • Si el orificio es atravesado solamente por líquido diluyente, la resistencia eléctrica medida por los electrodos es mínima y constante, pero cuando el orificio es atravesado por una célula sanguínea, se produce un aumento de la resistencia eléctrica y un cambio de potencial entre los electrodos. El número de señales eléctricas generadas indica el número de células presentes en la sangre y la amplitud de estas señales es directamente proporcional al volumen celular.

7. Impedancia

8. DISPERSIÓN ÓPTICA basa en las mediciones de la dispersión de la luz obtenidas de una sola célula sanguínea que pasa ata través de un haz de luz (óptico o láser Estas células crean una dispersión hacia delante y lateral las cuales se detectan mediante fotodetectores . Ejemplos de instrumentos que atizan este principio son los Technicon H System. el lateral es una medición de la granularidad de la célula. El grado de dispersión hacia delante es una mediación del tamaño de la celular

10. fluorescencia • Un fluorocromo es una  molécula química que absorbe la luz a una determinada longitud de onda (ENERGIA ) energía de excitación y emite a una longitud superior (MENOR ENERGIA) • Interacciona con la luz de excitación procedente de el láser. 

11. ¿cómo es obtiene? absorbe energía del láser Emisión de fotones a una mayor longitud de onda llamada fluorescencia • libera energía absorbida por : • Vibración y disipación del calor.

12. Variedad de modelos • Sistema Technicon H-600: Capáz de realizar una biometría hemática completa y un conteo diferencial de cinco partes • Contador Coulter serie S-Plus: Introducido al mercado en 1983, es un analizador automático multiparámetros, opera por el principio de impedancia. • Contador Coulter STKS: Es una combinación de tecnologías para enumerar eritrocitos, plaquetas y leucocitos; y para determinar un conteo diferencial de cinco partes. Emplea el principio de impedancia. • Sysmex NE-800: Realiza conteos de células sanguíneas , determinaciones de hemoglobina y diferenciales de cinco partes

13. Sysmex NE-800: Realiza conteos de células sanguíneas , determinaciones de hemoglobina y diferenciales de cinco partes

14. Técnica de análisis celular multiparamétrico cuyo fundamento se basa en hacer pasar una suspensión de partículas  (generalmente células) alineadas y de una en una por delante de un haz de láser focalizado. • Es una tecnología (proceso) que permite la medida simultánea de múltiples características físicas de una sola célula. • Estas medidas son realizadas mientras las células (partículas) pasan en fila, a una velocidad de 500 a 4000 células por segundo, a través del aparato de medida en una corriente de fluido. Citometria de flujo

17. La luz dispersada frontalmente  en ángulo cónico pequeño (0-10 grados ) coincidente con luz incidente y es proporcional a tamaño de la partícula que produce la dispersión. Señales de Dispersión

18. Señales de Dispersión La luz dispersada lateralmente es proporcional al la complejidad de la estructura celular.

22. Radiofrecuencia

23. Eritrograma • Se trata del análisis de la serie roja e incluye los siguientes parámetros: • Recuento de glóbulos rojos: se trata de la cantidad de eritrocitos en un mm3. A partir del número de células contadas por unidad de volumen, se genera el histograma de distribución de eritrocitos. • Concentración de Hemoglobina: • Valores Normales:Hombres: 16 ± 2 gr% • Mujeres: 14 ± 2 gr% • Hematocrito: es el porcentaje de sangre que es ocupado por eritrocitos. • Valores Normales:Hombres: 47 ± 5 gr% • Mujeres: 42 ± 5 gr%

24. Índices Hematológicos Concentración de hemoglobina media corpuscular (C.H.MC):Se refiere a la concentración promediode hemoglobina por mililitro de eritrocitos. Puede ser calculada utilizando los valores de hemoglobina y de hematócrito o medida directamente mediante luz láser y su grado dispersión. Valor normal: 32% a 36% Volumen corpuscular medio (V.C.M):Expresa en micras cúbicas (u3) el volumen que ocupa un hematíe de tamaño medio. El valor de este parámetro puede ser obtenido a partir del histograma de distribución de volumen de los eritrocitos o medido directamente mediante la técnica de dispersión de la luz láser. Valor normal: 87 ± 5 u3 ó um3

26. Hemoglobina corpuscular media (H.C.M.): Es el valor promedio de la hemoglobina contenida en cada eritrocito. Puede ser calculada utilizando los valores de  hemoglobina y de hematocrito o medida directamente mediante luz láser y su grado dispersión. Valor normal: 27 – 32 pg Contenido de hemoglobina presente en los reticulocitos (CHr): Constituye un indicador precoz de eritropoyesis deficiente en hierro que es mucho más sensible a la suplementación con hierro que otros parámetros, tales como hematócrito, hemoglobina, VCM, RDW, HCM y ferritina. Es de reciente incorporación gracias a los analizadores hematológicos.

27. La Amplitud de Distribución Eritrocitaria (ADE o RDW): se utiliza como indicativo de anisocitosis. Este índice es facilitado por los contadores automatizados. Valor normal: 11,5 – 14,5%

28. Es la fracción del hemograma que se refiere al conteo total de los leucocitos (glóbulos blancos) y de las diferentes clases de leucocitos. En sí está compuesto por dos análisis: • Conteo total de leucocitos:Los leucocitos son las células encargadas de proteger al organismo contra las infecciones. La presencia de una infección normalmente altera el número total de leucocitos. Valor normal: 4,500 a 10,000 glóbulosblancospormicrolitro (mcL) • Conteo de leucocitos diferencial: apodado simplemente "diferencial", determina la proporción o porcentaje de las principales clases de leucocitos dentro del conteo total de leucocitos. (neutrófilos, eosinófilos, basófilos, linfocitos y monocitos). Cada clase tiene un papel diferente en la defensa del organismo. La cantidad de cada clase de leucocito da información muy valiosa acerca del estado del sistema inmune. Leucograma

29. Leucocitos en Frotis

30. Serie Blanca

31. Plaquetas (PLT):se refiere al recuento global de plaquetas realizado de forma automatizada. Valor normal: 150 a 400 × 109/L.4 Volumen medio plaquetario (VPM): es un indicador del tamaño de las plaquetas y muestra una relación inversa no lineal con el número de estas. Plaquetocrito (PCT): se calcula relacionando el recuento de células con el volumen medio plaquetario. Ofrece un estimado sobre la fracción del volumen sanguíneo total ocupada por las plaquetas. Su valor aumenta en situaciones que cursen con trombocitosis. Valor normal: 0,1 a 0,4 %. Plaquetograma

32. Componente medio plaquetario o concentración media de plaquetas (CPM): es un indicador del grado de activación plaquetaria y una variable clínica útil en el estudio y seguimiento de pacientes con riesgo de trombosiscomo en el caso de dializados, diabéticos, fumadores, angina inestable, mujeres embarazadas. Plaquetas reticuladas (PR): las PR son las más jóvenes de la sangre periférica con un contenido de ARN superior a las demás. Son detectadas mediante la aplicación del método inmunológico. El porcentaje normal de PR es de 0,98 ± 0,41 %.

34. Información Gráfica

35. Histograma de Eritrocitos DISTRIBUCIÓN NORMAL REL NIo RBC 6.09 HGB 17.5 HCT 50.6 MCV 83.1 MCH 28.7 MCHC 34.6 RDW 13.0 VCM x ADE CUERPO DEDO Artefactos glóbulos rojos aglutinados fL 100 130 200 50 300 RBC

36. Histograma de Leucocitos Granulocitos Recuento total de Leucocitos EJEMPLO DE ANALISIS REL Neutrófilos DISTRIBUCIÓN NORMAL NIo. WBC 8.3 LY # 2.5 MO # .8 GR # 5.1 MO o MID Linfocitos 90 160 300 50 100 200 400 WBC MO – MID = Eosinófilo, Basófilo, Monocito

37. Histograma de Plaquetas REL DISTRIBUCIÓN NORMAL NOMOGRAMA NORMAL NIo: PLT 319 PCT .239 MPV 7.5 PDW 16.3 2 10 20 PLT FEMTOLITROS

38. Recuento Diferencial de Leucocitos Cuadrante 6 Eosinófilos Cuadrante 3 Monocitos Cuadrante 4 Neutrofilos Cuadrante 2 Linfocitos Cuadrante 2 Linfocitos Cuadrante 5 Cel. Dañadas Cuadrante 1 Blastos

39. Recuento Diferencial de Leucocitos de Cinco Partes

40. Recuento Diferencia de Leucocitos Anormal 1 9 5. Eritrocitos nucleados 1. Blastos 2 2. Granulocitos inmaduros 6. Linfocitos Variantes 7 8 3. Neutrófilos envejecidos y lesionados 3 7. Blastos 6 8. Linfocitos Variantes 4. Plaquetas gigantes 5 4 9. Blastos

41. Neutropenia y Linfocitosis Cuadrante 4 Neutrofilos WBC Cuadrante 3 Monocitos Cuadrante 6 Eosinófilos VOLUMEN Cuadrante 5 Cel. Dañadas Cuadrante 2 Linfocitos Cuadrante1 Blastos DF1

42. Linfocitos Atípicos Cuadrante 4 Neutrofilos WBC Cuadrante 3 Monocitos Cuadrante 6 Eosinófilos VOLUMEN Cuadrante 5 Cel. Dañadas Cuadrante 2 Linfocitos Cuadrante1 Blastos DF1

43. Eosinofilia WBC Cuadrante 4 Neutrofilos Cuadrante 3 Monocitos Cuadrante 6 Eosinófilos VOLUMEN Cuadrante 5 Cel. Dañadas Cuadrante 2 Linfocitos Cuadrante1 Blastos DF1

44. Granulocitos Inmaduros Cuadrante 4 Neutrofilos WBC Cuadrante 3 Monocitos Cuadrante 6 Eosinófilos VOLUMEN Cuadrante 5 Cel. Dañadas Cuadrante 2 Linfocitos Cuadrante1 Blastos DF1

45. Dispersograma

50. Ejemplos de Histogramas