La toxine Botulinique de type A

1. La toxine Botulinique de type A • Bref historique • Structure et fonction de la toxine botulinique de type A et de ses protéines associées • Mode d’action de la toxine botulinique • Les toxines botuliniques sont différentes et uniques

2. BREF HISTORIQUE Approbation aux Etats-Unis par la FDA de BOTOX®pour le traitement de dystoniecervicale, le strabisme, et le blépharospasme VISTABEL® 1ère toxineapprouvée en Europe pour une utilisation cosmétique(glabelle) Azzalure et Bocouture 1970s – 1980s 1991 2002 2003 2009 Premiers développementscliniques: blépharospasme et strabisme

3. ToxineBotulinique de type A - Structure Moléculaire et Notion de Produit Biologique

4. Clostridium botulinum Les toxinesbotuliniquessontproduites par la bactérieClostridium botulinumqui: • estunebactérieanaérobiedont les spores se trouventdans le sol • qui se développedans les conditions: • température >10oC • milieu anaérobie • pH  4.6 • s’autolyse et libère la toxine native sousplusieursformes plus oumoinscomplexéesdépendant de la souchebactérienne

5. Toxine de Clostridium BotulinumStructure moléculaire unique Clostridium Botulinum est unebactérieanaérobie gram + en forme de batonnet qui produit sept serotypes distincts de neurotoxines (A, B, C1, D, E, F, G). Neurotoxine + Protéines annexes non-toxiques Schantz EJ Gasper E (1975) Jpn J Med Sci Biol28:66-69

6. Rôle des protéines accessoires Des données in vitro démontrent: • Protection de la neurotoxine 150 kDa contre la dégradation enzymatique.1–3 • Stabilisation de la protéine de 150 kDa contre le stress thermique et au stress lié au pH.4–6 • Ecran des épitopes antigéniques sur la chaîne lourde de 150 kDa.7 1. Chen et al. InfImmun1998;66:2420–5. 2. Ohishi et al. InfImmun1977;16:107–9. 3. Wagman. Arch BiochemBiophys1963;100:414–21. 4. Kukreja & Singh. Biochem 2007;46:14316–24. 5. Shimizu et al. Toxicon 2008;51:21. 6. Cheng et al. Toxicology 2008;249:123–9. 7. Chen et al. InfImmun1997;65:626–30. Figure adapted from Hasegawa et al. J Biol Chem2007;282:24777–83.

7. Formation d’anticorps NEUTRALISANT Dirigé contre la neurotoxine - terminaison C de la chaîne longue NON-NEUTRALISANT Dirigé contre les protéines accessoires HA/NTNH Dose1 Fréquence1 Prédisposition génétique1 Neutralisent l’activité biologique de la neurotoxine partiellement ou complétement AUCUN effet sur l’activité biologique de la neurotoxine 1. Atassi. Mov Disord 2004;19 (Suppl 8):S68–4

8. DifférentesMéthodes de Fabrication des NeurotoxinesBotuliniques • Les neurotoxinesbotuliniquessontclasséesparmi les produitsbiologiques • dérivésd'organismesvivants (bactéries) • le type d'excipientsainsique le procédé de fabrication impactent les propriétéspharmacocinétiques (diffusion + migration) • Il n' y a pas de produitsbiologiques "génériques" ni "biosimilaires" • “Le procédé de fabrication définit le produit”

9. Fabrication et formulation des différentes toxines botuliniques: le procédé définit le produit SIMILITUDES DIFFERENCES 1. Allergan toxin SPC 2003. 2. Ipsen toxin SPC, Ipsen, 2009. 3. Merz toxin SPC, Merz, 2006. 4. Schantz & Johnson. Microbial Rev 1992;56:80–99. 5. Panjwani et al. Botulinum J 2008 ;1:153–66. 6. http://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/nda/2009/125274s000_ChemR.pdf

10. entrainent des différences de profiles thérapeutiques Les différences biochimiques des spécialités disponibles • Dose • Efficacité • Durée d'action • Tolérance/sécurité • Affinité accepteur • Cible intracellulaire • Taille complexe • Formulation ProduitBiologique: caractéristiquesbiochimiquesdéterminent les profiles thérapeutiques1,2

11. US FDA Alert [08/2009]: information for healthcare professionals OnabotulinumtoxinA (BOTOX®/BOTOX® Cosmetic) AbobotulinumtoxinA (Dysport®) IncobotulinumtoxinA (Xeomin®) Les BoNTA sont différentes ET les unités sont spécifiques et non-interchangeables « Les unités sont spécifiques à chaque toxine botulinique, les doses et unités d’activité biologique ne peuvent pas être comparées ou converties d’une toxine à une autre. Cette nouvelle terminologie renforce ces différences et le manque d’interchangeabilité entre les produits. » www.fda.gov/Drugs/DrugSafety

12. Mode d'action au niveau du muscle strié

13. Myorelaxant à action périphérique • Injection intramusculaire • Dénervation chimique locale et temporaire de la plaque motrice • Inhibe la libération du neuromédiateur ACh au niveau des terminaisons nerveuses • Le muscle se réinerve progressivement par formation de nouvelles terminaisons nerveuses • Efficacité constatée de 3-4 mois environ

14. Transmission NeuromusculaireNormale 1:contraction musculaire : fusion des vésicules d’Ach au niveau de la menbraneprésynaptique du motoneurone et libération de l’Ach dans la fente synaptique * Simpson, L. L. (1995) Mov Disord.10: 362-70; Graphique: Arnon Stephen S et al.  JAMA 2001 Feb 28;285(8):1059-1070

15. ToxineBotulinique - Mécanismed'Action 2- Clivage par la chainelégère de la toxinebotulinique du SNAP 25 empêchant la libération de l’Ach : BoNT/A = SNAP 25 BoNT/B = VAMP * Simpson, L. L. (1995) Mov Disord.10: 362-70; Graphic: Arnon Stephen S et al.  JAMA 2001 Feb 28;285(8):1059-1070

16. Régression des bourgeons : après un certain temps, la formation de nouvelles terminaisons rétablit une conduction normale • restitution ad integrum de la jonction NM ToxineBotulinique - Mécanismed'ActionRéversible • Repousse nerveuse : émission de bourgeons de la terminaison nerveuse • Rétablissement de la connexion neurologique : libération d’acétylcholine à partir des bourgeons et régulation par des récepteurs nicotiniques. Neurotransmission fonctionnelle • Blocage : • 1-Chaine légère de la toxine libérée dans le cytosol • 2-Clivage de la protéine SNAP-25 • 3-Blocage de la liaison des vésicules d’acétylcholine à la terminaison nerveuse • 4-Inhibition de la libération de l’acétylcholine De Paivaet al. Proc NatlAcad Sci U S A 1999; 96: 3200–3205.

17. Muscles Faciaux • Les muscles faciaux bougent en réponse à nos pensées, sentiments, émotions and impulsions • Pour obtenir des résultatsoptimaux en esthétiquefacialeilestnécessaire de connaitre et de comprendreparfaitementl’anatomie du visage • Les muscles du visage comportent: Procerus Frontalis Nasalis (transversal) Corrugator Levator labii superioris Orbicularis oculi Levatorlabii superiorisalaeque nasi Masseter Orbicularis ori Depressor septi Depressor anguli oris

18. Muscles complexes de la Glabelle • Les rides de la glabelle sont formées par l’action des muscles suivants: • FrontalisContraction elevates the brows • CorrugatorContraction squeezes the brows medially Orbicularis oculi Contraction pulls brows medially and inferiorl) • Procerus Contraction pulls the brow inferiorly Werschler & Baumann. Skin Aging 2001; 9:36–42.

19. Les Rides de la glabelle • Les rides de la Glabelle sont des rides verticalesvisibleslors du froncement entre les 2 sourcils • Elles sont dynamiques, conséquence de l’attractionsur la peau par la musculature profonde1 • La toxinebotulinique de type A bloque la libérationd’acétylcholine au niveauprésynaptique de la terminaisonnerveusecholinergiqueconduisant à la dénervation du muscle et donc à une paralysie2 1. Pierard & LaPiere. Arch Dermatol1989;125:1090–2.

20. Traitement des rides glabellaires • Les toxinesbotuliniquessont indiquées dans la correction temporaire des rides verticales intersourcilières modérées à sévères observées lors du froncement des sourcils, chez l'adulte de moins de 65 ans, lorsque la sévérité de ces rides entraîne un retentissement psychologique important chez le patient. Contre-indications • Elles sont contre-indiquées : • En cas d’hypersensibilité connue à la toxine botulinique de type A ou à l’un des constituants du produit • En cas de myasthénie grave ou de syndrome de Lambert-Eaton • En cas d’infection au point d’injection.